飼用纖維素酶活力測定方法的探討
飼用纖維素酶作為新型飼料添加劑，在飼料工業中應用已相當普及，對其質量檢測顯得日益重要，但在國家飼料工業標準中，尚未見有纖維素酶活力的測定方法。據研究所知纖維素酶是一種複合酶，按作用底物的能力劃分為兩部分，一部分是對棉花纖維素能起催化水解作用，一般稱為G1酶；一部分是對羧甲基纖維素鈉（Na－CMC）水解能力區分，稱為C1酶；針對上述情況，一般采用兩種測定方法，一種是CMC法，適用於Cx酶；另一種是濾紙法，則適用於C1酶活力的測定。
1?CMC（羧甲基纖維素）法
1.l??飼用纖維素酶??由河南省科學院生物研究所提供。
1.2??主要試劑??磷酸氫二鈉（AR）；檸檬酸（AR）；羧甲基纖維素鋼（AR）；?3，5－二硝基水楊酸（AR）；氫氧化鈉（AR）；酒石酸鉀銷（AR）；亞硫酸鈉（AR）；苯酚（AR）。
1.3??主要儀器??721型分光光度計；恒溫水浴鍋；PHS-2型酸度計；秒表。
1.4??試劑配製
1.4.1? pH5.0檸檬酸緩衝液
1.4.1.1? 0.2mol/l磷酸氫二鈉（Na2HPO4·12H20）液稱取7.16g磷酸氫二鈉，溶解於蒸餾水中，定容至100ml。
l.4.1.2 ? 0.lmol/l的檸檬酸（C6H8O7·H2O）液
稱取2.10g檸檬酸，溶解於蒸餾水中，定容至100ml。
取A?24.3ml，B?25.7ml混勻，用精密酸度計測至pH值為5.0。
l.4.2? 羧甲基纖維素鈉溶液
準確稱取2.00g羧甲基纖維素鈉溶於200ml水中，沸水浴中加熱至溶化，過濾，取濾液100ml，加檸檬酸緩衝液20ml，蒸餾水40ml，混勻，貯存於冰箱中備用。
l.4.3???? 3，5一二硝基水楊酸顯色液
準確稱取6.30g?3，5－二硝基水楊酸，置於ZN氫氧化鈉262ml溶液中，然後加酒石酸鉀鈉的熱溶液（182.0g酒石酸鉀銷溶於500ml水中），再加?5.0g苯酚和5.0g亞硫酸鈉，攪拌至溶解，冷卻後定溶至1000ml，貯存於棕色瓶中，冰箱中備用。
1.4.4??? 0.L%標準葡萄糖溶液
精確稱取經105％℃烘至恒重的無水葡萄糖250?.0mg，溶解於蒸餾水中，定容至250ml。
1.5??標準曲線的繪製
分別吸取0.l％標準葡萄糖溶液2.0ml、4??oml、6.0ml、8.0ml、?10.?0ml，分別定容至50ml。再分別吸取上述溶液各2.5ml於試管中，各加?2.5ml??3，5一二硝基水楊酸顯色液，煮沸5min（另作一管對照，取2.5ml蒸餾水，2.5ml??3，5一二硝基水楊酸，同樣煮沸5min）。冷卻後，用721型分光光度計，在530nm波長下比色，記錄各管的光密度值，以光密度作縱坐標，對應標準葡萄糖溶液含糖的毫克數為橫坐標，繪製標準曲線。
1.6測定方法