一、骨髓細胞學檢查概述
(一)骨髓細胞學檢查的適應證
1.外周血象多次檢查異常。
2.原因不明的肝脾淋巴結腫大。
3.原因不明的發熱,骨痛或惡病質。
4.查惡性腫瘤有無骨髓轉移。
5.助診類脂質沉積病,如戈謝病及尼曼-皮克病。
6.對血液病進行鑒別診斷和療效觀察。
(二)骨髓細胞學檢查的禁忌症
1.血友病及有明顯出血傾向的患者和晚期妊娠的孕婦作骨髓穿刺術應慎重。
2.小兒或不合作患者不宜做胸骨穿刺。
(三)骨髓細胞學檢查的臨床應用
1.明確診斷
某些造血係統疾病有些病具有特征性細胞形態學改變,骨髓檢查具有決定性的診斷意義。如各種白血病、巨幼紅細胞性貧血、多發性骨髓瘤、霍奇金(Hodgkin)病、骨髓轉移癌、類脂質沉積病、尼曼-匹克病、戈謝(Gaucher)病、黑熱病、瘧疾等。
2.協助診斷
某些疾病這類疾病多數是以骨髓造血功能改變為主,骨髓檢查能提供重要依據,如缺鐵性貧血,溶血性貧血、失血性貧血、再生障礙貧血等。
3.提高
某些疾病的診斷率檢驗瘧原蟲,黑熱病小體、紅斑狼瘡細胞(LE細胞)及細菌培養、染色體培養、幹細胞培養等。
4.觀察療效及預後的估計
如各種白血病、巨幼紅細胞性貧血、缺鐵性貧血等。
二、骨髓標本的采集和處理
骨髓標本由骨髓穿刺而獲得。采得骨髓液後,如做骨髓細胞形態學檢查,應立即將其製成塗片,如進行造血幹細胞培養則應用肝素抗凝接種在特定的培養基中進行細菌培養時操作同血培養。標本均需及時送檢。
1.標本采集由臨床醫生經骨髓穿刺獲取。標本吸取量以吸取骨髓液0.1~0.2mL為宜(針嘴見紅即止),否則會因骨髓稀釋而影響結果。
2.骨髓穿刺成功的指標
(1)抽吸骨髓時病人有特殊的痛感(銳痛)。
(2)骨髓液中有骨髓小粒和脂肪滴。
(3)鏡檢有骨髓特有細胞,如巨核細胞、漿細胞、組織嗜堿細胞、成骨細胞、破骨細胞、網狀細胞等。
(4)塗片中含有大量幼稚細胞,粒細胞的杆狀核>分葉核。
3.塗片
要求載玻片須清潔、幹燥。骨髓吸出後,應立即塗片,以免凝固,並將塗片在空氣中晃動使塗膜迅速幹燥,防止細胞聚集變形或溶血,膜麵要厚薄均勻,由厚到薄分出頭、體、尾三段,便於檢驗。每次應塗片3~5張,以備作各種染色時使用。
4.標本送驗
取選好的骨髓片3~5張,同時送當日血片2~3張及病曆摘要(或申請單)一份。
三、骨髓細胞學檢查步驟
1.挑選有骨髓小粒、塗膜均勻及厚薄適宜的塗片進行瑞氏染色。
2.用低倍鏡觀察全塗片情況,選擇取材、染色滿意的塗片作下列內容檢查。
(1)骨髓細胞增生程度
骨髓增生程度通常以骨髓中有核細胞的量來反映。一般常在低倍鏡下觀察有核細胞與成熟紅細胞之間的比例,並結合觀察骨髓小粒的結構及細胞數量與成分,來作出判斷。其增生程度分為五個等級,即增生極度活躍(見於各型白血病)、增生明顯活躍(見於各型白血病,增生性貧血)、增生活躍(見於正常骨髓)、增生減低(慢性型再生障礙性貧血)、增生極度減低(急性型再生障礙性貧血)
(2)觀察巨核細胞
先在低倍鏡下觀察巨核細胞數量,計數全部片膜上的巨核細胞數,必要時檢查兩張以上的塗片。然後轉油鏡觀察,進行分類計數,並注意觀察巨核細胞及血小板形態有無異常。對巨核細胞的觀察需注意其數量、成熟程度、血小板的功能及形態四個方麵。
(3)注意有無異常細胞
注意在塗片的尾部、邊緣、及骨髓小粒周圍其他的特殊細胞。如轉移癌細胞、Gaucher細胞、Niemann-Pick細胞等。發現這些可疑細胞,在油浸鏡下觀察確認。
3.用油浸鏡進行細胞分類
計數及形態觀察選擇塗片體部與尾體交界處、細胞分布比較均勻、結構清晰、著色良好的部位開始,向尾部迂回移動塗片進行分類計數,連續計數200個或500個(必要時計數1000個)有核細胞。在計數中應注意下列各項:
(1)紅細胞係、粒細胞係、淋巴細胞係及單核細胞係各階段比例、染色及形態有無異常現象。以紅細胞係的百分率去除粒細胞係的百分率,計算出粒細胞係紅細胞係比例,即粒:紅。