一、小鼠肝組織中丙二醛（MDA）的測定
MDA是自由基攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸而引發的脂質過氧化作用的最終分解產物,其含量的多少可反映組織細胞的脂質過氧化速率或強度。MDA含量異常增高會引起細胞損傷。
操作手續：
取小鼠肝組織1.0g,用冰冷的生理鹽水漂洗後，濾紙吸幹,稱重。置於5mL小燒杯中，量取9倍於體積塊體積的生理鹽水，將2/3的生理鹽水倒入燒杯中，以眼科剪迅速剪碎組織塊，再將剪碎的組織連同生理鹽水一起倒入玻璃勻漿器中，然後用剩餘的生理鹽水衝洗燒杯和眼科剪，並倒入勻漿器，勻漿6~8min，使組織勻漿化，整個過程應置於冰浴中完成。勻漿完全後將勻漿液以3000~4000r/min離心10~15min，上清液即為肝組織勻漿液。
於試管中加入10%的小鼠肝組織勻漿液0.20mL及不同濃度的樣品0.10mL，對照加等體積生理鹽水。37℃溫育1小時後取出，冰浴冷卻，按MDA測定試劑盒中方法操作，由於MDA與硫代巴比妥酸縮合形成的紅色產物在532nm處有最大吸收，因此在該波長下測定吸光度，計算其MDA含量，公式如下：（其中勻漿液蛋白含量測定以牛血清白蛋白為標準）
組織中MDA含量（10nmol/mL）＝測定管OD值－測定空白管OD值標準管OD值－標準空白管OD值×標準濃度÷蛋白含量
另取兩組試管，一組先加入10mmol/L的H2O20.10mL，另一組先加入1mmol/L的FeSO40.10mL，然後再按前述方法，向這兩組試管加入組織勻漿和樣品液，溫育，冷卻，測定MDA含量。
二、腫瘤抑製率、胸腺指數、脾指數測定
眼眶取血處死小鼠，摘取腫瘤、胸腺和脾，經生理鹽水洗滌後用濾紙吸幹稱重，分別計算抑瘤率、胸腺指數(mg胸腺/g體重)和脾指數（mg脾重/g體重）。
抑瘤率（%）＝對照組平均瘤重－劑量組平均瘤重對照組平均瘤重×100
胸腺指數(mg/g)＝胸腺mg數/體重g數
脾指數（mg/g）＝脾重mg數/體重g數
三、巨噬細胞吞噬百分率及吞噬指數測定
1.主要試液
Wright染液：取0.1g瑞氏粉加160mL甲醇，溶解後棕色瓶保存。
Hanks工作液：由A液，B液組成。
Hanks A液：取160g NaCl、8g KCl、2g MgSO4·7H2O、2gMgCl2·6H2O加入800mL水，另取2.8g CaCl2溶於100mL水種，將兩液混合後定容至1000mL，加2mL氯仿，4℃冰箱保存。
Hanks B液：3.04g Na2HPO4·12H2O、1.2g KH2PO4和20g葡萄糖加800mL水，另取0.4g酚紅充分研磨，逐漸加入0.1mol/L NaOH 10～15mL，待酚紅完全溶解後加水稀釋至100mL，將兩液混合後加水定容至1000mL，加2mL氯仿，4℃冰箱保存。
Hanks工作液由A液、B液和蒸餾水按1∶1∶18比例混合而成，經380Pa滅菌10min，冷卻後4℃保存，可用一個月，臨用前用3.5%NaHCO3調節至pH7.2～7.4。
2.操作手續
荷瘤小鼠第十天，向小鼠腹腔注射1%雞紅細胞（CRBC）1.0mL，輕揉小鼠腹部，30min後頸椎脫臼處死，腹腔注射2.5mL Hanks工作液，用注射器吸取腹腔液少許，於載玻片上推成塗片，自然幹燥後用Wright染液染0.5～1min後，以磷酸緩衝液衝去染液，幹燥後油鏡計數，按下式計算吞噬百分率計吞噬指數。
吞噬百分率（%）＝吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數100個巨噬細胞（吞噬及未吞噬的雞紅細胞數）×100%
吞噬指數＝被吞噬的雞紅細胞數/100個巨噬細胞
四、遲發型超敏反應（DTH）測定
實驗第5天，小鼠腹部去毛，用1%2，4-二硝基氟苯（DNFB）丙酮麻油染液在去毛處均勻塗抹致敏（每鼠25μL），24h後重複操作加強致敏一次。致敏第四天用10μL DNFB溶液均勻塗抹右耳（兩麵）進行攻擊，對照組同樣塗耳但未致敏。24小時後頸椎脫臼處死小鼠，剪下左右耳殼，用打孔器在雙耳相應部分各取下直徑8mm的耳片，稱重，以兩耳重差表示腫脹程度。
五、血清溶血素含量測定
1.主要試液
豚鼠血清：豚鼠心髒取血，將分離出的血清加入到綿羊紅細胞（SRBC）中（1∶0.2，體積比），4℃冰箱中放置30min，離心取上清液，用生理鹽水稀釋成1∶10血清備用。
2-巰基乙醇(0.2mol/L)：用生理鹽水配製，於4℃下貯存。
2.操作手續
實驗第2天，小鼠腹腔注射0.2mL 20%SRBC進行免疫，隔7天後，再注射一次。眼眶取血處死，分離血清，每隻小鼠血清分成2份，一份不作任何處理，另外一份加等量的2-巰基乙醇後於37℃保溫20min以破壞IgM，再分別稀釋500倍。
IgG溶血素的測定：取2-巰基乙醇處理血清0.5mL和5%SRBC懸液0.5mL充分混勻，加羊抗小鼠IgG（1∶25稀釋）和1∶5稀釋得豚鼠血清（補體）各0.5mL，再加1.0mL生理鹽水。空白以0.5mL生理鹽水代替血清。
IgM溶血素的測定：取未處理血清0.5mL、5%SRBC懸液0.5mL、1∶5稀釋的補體0.5mL和1.5mL生理鹽水混合於試管中。空白以0.5mL生理鹽水代替血清。
所有試管37℃保溫1h，中間振搖一次，3000r/min離心10min，上清液於540nm處測定吸光度，根據下式計算IgG溶血素（HCIgG）和IgM溶血素（HCIgM）含量。
HCIgG＝2-巰基乙醇處理血清的吸光度×稀釋倍數
HCIgM＝未處理血清的吸光度×稀釋倍數
其他測定方法請參考鄭建仙編著的《功能性食品》（第三卷）（中國輕工業出版社1999年出版）與其他相關文獻。
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