而一旦江賢前往黑洲遇害的話,那麼他們則是想後悔都來不及了!
對於江賢,他們可是一直抱著一絲的希望。
隨後江賢在和楊教授又聊了幾句之後,便給了場內的這些人一些大致的研究方向。
1.滅活疫苗
將EBOV通過福爾馬林滅活或熱滅活後,滅活的EBOV不能對非人靈長類提供保護。此外,通過碘萘基疊氮化物滅活病毒,可保護機體免遭致死性病毒的攻擊,但如果使用γ射線滅活,就不會達到同樣的保護效果,說明滅活方法可能會影響病毒蛋白的結構和免疫原性。雖然滅活疫苗可避免預存免疫和載體本身誘導的免疫反應問題,但須在4級生物安全實驗室中操作活病毒,成本高,且麵臨安全性等問題,限製了此類疫苗的發展。
2.複製子疫苗
委內瑞拉馬腦炎病毒(-svirus,VEEV)複製子表達EBOV糖蛋白(GP)或核蛋白(NP)後,被用於埃博拉疫苗的研究。單獨免疫表達NP的VEEV複製子可對小鼠提供完全保護,單獨免疫表達GP的VEEV複製子可對豚鼠提供完全保護,將二者聯合免疫,既可保護小鼠,又可保護豚鼠。
但不論是單獨免疫還是聯合免疫,即使免疫劑量為107病灶形成單位(focus-,FFU)也不能保護短尾猴。當免疫劑量達到時,才可保護非人靈長類。需高劑量免疫和預存免疫限製了此疫苗在人類中的應用。庫京病毒,為黃病毒家族的一員,具有自我複製RNA能力,以此病毒為基礎製備的複製子疫苗可保護25%至86%的豚鼠。此疫苗未在非人靈長類中進行評價,且雖然VEEV複製子疫苗對豚鼠提供100%保護,但需要高劑量才能保護非人靈長類,因此庫京病毒複製子疫苗的前景不被看好。
3.亞單位疫苗
用杆狀病毒表達係統,在昆蟲細胞內生產EBOVGP蛋白並純化後,免疫豚鼠1次,或在免疫DNA疫苗後作為加強免疫,可誘導產生較高水平的抗體,但不能保護機體免遭病毒的攻擊,且保護率與中和抗體水平間無對應關係。
病毒樣顆粒(virus-,VLPs)以其獨特特點吸引研究者關注:可對免疫個體進行多次免疫;由於VLPs空間結構與天然病毒相似,因此誘導中和抗體的能力比可溶性抗原更強;
VLPs易被抗原提呈細胞(如樹突狀細胞)捕獲,從而刺激機體產生抗體和細胞免疫反應;可將免疫刺激分子融合表達於VLPs中,用以增強免疫反應。最早的研究是將表達GP和VP40蛋白的DNA載體轉染人293T細胞後獲得,3次免疫後,可保護小鼠。
如果在VLPs中加入佐劑,2次免疫小鼠即可抵抗高劑量病毒的攻擊,免疫1次就可保護豚鼠,還可保護非人靈長類,首次證明非病毒載體疫苗在非人靈長類模型中可激發保護性免疫反應。此外,也可利用昆蟲細胞生產VLPs,其形態和功能均與在哺乳動物中生產的相似,可在小鼠體內激發有效的保護反應。使用昆蟲細胞生產提高了產量,大幅度降低了生產成本,且昆蟲細胞更安全,但須在非人靈長類模型中驗證其有效性。