秦軍滅趙、破燕並魏後，緊接著大舉進攻楚國。當時楚仍為中國南方大國，擁有今河南西部及東南部，山東南部，湖北、湖南兩省，洞庭湖以東和江西、安徽、江蘇、浙江全部。
楚國此時尚有對秦作戰所需要的實力。秦始皇認為年少壯勇的將軍李信，曾以數千兵急追燕太子丹於衍水，並獲得了勝利，是率兵攻楚的理想將領。於是便委以重任，並問李信說，如果派兵攻楚，需要多少兵馬？李信答複說“不過用20萬人”。始皇又問王翦，王翦則說“非60萬人不可”。始皇不同意王翦的意見，而同意李信的說法，當即說：“王老將軍老矣，何怯也！李將軍果然壯勇，其言是也。”王翦以言不見用，謝病告老，歸還頻陽。
秦軍排除楚邊境部隊的抵抗，於汝河南北分向寢、平輿展開攻擊，擊破楚軍，李信軍占領了平輿，蒙恬軍占領寢城。秦軍未遇楚軍重大抵抗，進占兩城後，渡過洪河東進。
楚軍統帥項燕以秦軍轉變進軍方向，孤軍深入，立即率楚軍主力，兼程急進，追擊秦軍於棠溪，給秦軍以沉重打擊。李信戰敗，率軍往城父方向撤退。楚軍乘勝猛追，3晝夜戰鬥不息。秦軍連日所築營壘，都被楚軍攻破，都尉一級將領7人陣亡，李信軍損失慘重，多虧城父蒙恬軍的掩護，李信得以突圍逃回秦境，才免被俘。這是秦統一戰爭中宜安戰後，又一次重大的挫折。
秦軍遭受重大挫折，秦始皇雖然感到自己當初對統帥人選有誤，但並未動搖滅楚之決心，仍然繼續進行滅楚戰爭。李信失敗後，秦軍統帥一職隻有重行起用王翦。秦始皇移樽就教，親往王翦家鄉頻陽邀請王翦出任秦軍統帥。王翦謝絕說，身體不好，難以從命。秦始皇則堅持請他出征，並問他有什麼要求。王翦此時才說：“大王必不得已用臣，非60萬人不可”。秦始皇應允。王翦於是接替李信，擔任秦軍統帥，率領60萬大軍對楚作戰。秦始皇親送王翦至京郊灞水之濱。王翦請求秦王多賜給他一些田宅。秦王答應了他的要求，王翦遂帶兵東去。
大舉伐楚。公元前225年，秦始皇派李信率軍攻楚。李信輕敵冒進，先勝後敗。公元前224年，秦始皇親請老將王翦，令率60萬大軍伐楚。大破楚軍於蘄南，殺楚將項燕，占領楚國大片領土。公元前223年，王翦與蒙武合攻楚都壽春，俘獲楚王負芻。次年王翦又率軍渡過長江，平定了楚國的江南地區，降服百越之君。楚國宣告滅亡。
吞滅齊國。楚國滅亡後，秦始皇派王賁率軍深入東北，掃除燕、趙殘餘勢力。公元前222年，王賁攻占遼東，俘虜了燕王喜。接著攻下代城，俘虜了代王嘉。燕、趙兩國徹底滅亡。至此，東方六國中就隻剩下齊國。公元前221年，秦始皇命王賁率秦軍從燕國邊界南下進攻齊國。王賁以迅雷不及掩耳之勢，在沒有遇到什麼抵抗的情況下，猝然攻入齊都臨淄。齊王建入秦投降，齊國也被納入秦國的版圖。
在連番的苦戰後，大秦帝國，終於橫掃六國，一統天下……
大秦帝國之所以會勝利，倒是有幾個原因……
首先，商鞅變法之後，秦國的國力變的空前強大，變法立於秦國的農業和征兵的強盛，所謂變法，也相當於是真正的改革……
以前，刑不上大夫，禮不下庶人！
這句話，出自春秋時期成書的《禮記》。自秦漢以來，對這句話的解釋都是“庶人沒有資格受禮遇，大夫擁有特權不受刑”……
而商鞅變法之後，就算是天子犯法，也與庶民同罪！