正文 實驗前的準備(1 / 3)

微生物學實驗是生物類專業的必修實驗課,通過該課程的教學可使學生完整、全麵地了解和掌握微生物學的基本理論和研究方法,使學生得到有關微生物實驗技能的基本訓練,進一步加深對微生物基礎理論的理解,並力求達到係統地培養學生分析問題、解決問題和實際動手能力,在實驗中進一步提高學生的科學素質修養。為了上好微生物學實驗課,並保證安全,特提出如下注意事項:每次上課前,必須認真閱讀實驗指導,明確該次實驗的目的要求、實驗原理和注意事項,熟悉實驗內容、方法和步驟,做到心中有數,思路清晰。

1.進入實驗室需穿著工作服、包覆式鞋子(嚴禁穿拖鞋、涼鞋)。實驗期間(特別是用火時),蓄長發的學生應將長發紮起於腦後。個人物品請勿放置於實驗桌上,實驗期間隨時保持桌麵整潔。

2.實驗室內應保持安靜和整潔,勿高聲談話和隨便走動,嚴禁吸煙和食用任何食品飲料。注意並熟悉醫藥箱、滅火器的存放位置,並熟知其使用方法。

3.實驗時應仔細認真,嚴格按操作規程進行,注意改變生活中的習慣動作,以掌握微生物學實驗的科學操作方法。認真及時做好實驗記錄,對於當時不能得到結果而需要連續觀察的實驗,則需記下每次觀察的現象和結果,以便分析。

4.使用貴重儀器應先事先熟知操作規程,遇儀器故障時請教師幫助解決。

5.使用藥品時,應確實了解藥品的物性、化性、毒性及正確使用方法,並且對實驗過程中可能發生的危險,采取適當的預防措施。實驗藥品宜采用少量稱取方式,若是不慎采取過量,可倒入特定回收容器,切勿倒回原來容器或隨意丟棄於水槽中。如果不慎將腐蝕性藥劑噴濺至臉、眼或身體其他部位,應盡快以清水衝洗5分鍾以上(高濃度酸液切不可直接以水清洗,需用幹淨毛巾將酸液擦幹淨後方能用清水衝洗),受傷較重者需送醫院處理。

6.注意防火安全,易燃物品如二甲苯、吸水紙等應遠離火源。打火機隻能用於點燃酒精燈,酒精燈用完應及時蓋上燈帽。用火時,實驗人員不可隨意離開實驗室,加熱結束應立即熄火。如不慎發生火災,視具體情況,適時選用濕布、幹沙或滅火器將之撲滅。

7.實驗需進行培養的材料,要標明姓名、組別、日期後,放於教師指定的培養箱中進行培養。如遇菌液外溢、皮膚劃傷或菌液吸入等意外,應立即報告教師及時進行處理,不得隱瞞,以免釀成後患。

8.厲行節約,對水、電、染色液、鏡油、擦鏡紙、吸水紙及其他藥品等均應節約使用。無法使用的已損毀玻璃器皿,應置於廢棄玻璃搜集箱內,不可隨意丟入垃圾桶。

9.不可擅自攜帶任何菌種、實驗儀器或藥劑離開實驗室,以免發生爆炸、自燃或誤食等情況。

10.實驗完畢,必須將儀器放到指定地點,帶菌工具應先進行消毒處理。實驗產生的高濃度酸、堿、含重金屬或有機物等廢液,應分別回收於廢液回收桶中等待處理,微生物培養物應及時殺滅以免造成環境汙染。

11.實驗結束後應清洗桌麵、實驗儀器以及水槽,整理清掃實驗室。檢查關閉非必要之電源、水源和其他開關,以避免危險發生。洗手後方可離開實驗室。

一、常用玻璃器皿及準備

微生物學實驗室所使用的玻璃器皿主要用於微生物的培養(培養皿、錐形瓶)、微生物的保存(試管)、吸取菌液(刻度吸管、移液器)、製片(載玻片、蓋玻片)等。使用前都需要經過洗滌清潔處理,至少無灰塵、油垢、無機鹽等雜質,才能保證獲得正確的實驗結果。有的器皿在洗滌後還要用一定的密封包裝、經過滅菌才能使用。

(一)試管

微生物學實驗室所用玻璃試管,其管壁必須比化學實驗室用的厚些,以保證塞棉花塞時管口不會破損。試管口的形狀要求沒有翻口,不然,微生物容易從試管塞與管口的縫隙間進入試管造成汙染,也不便於蓋試管帽。有的實驗要求盡量避免蒸發試管內的水分,則需要使用螺口試管,蓋以螺口膠木塞或塑料帽。培養細菌一般用金屬(如鋁)帽或試管塞,也可用泡沫塑料塞等。試管的大小可根據用途的不同,準備下列三種型號(圖1):①大試管(約18mm2×180mm),可盛放倒平板所需的培養基,可管內製備瓊脂斜麵用(需培養大量菌體時用)和盛液體培養基用於微生物的振蕩培養;②中試管[約(13~15)mm2×(100~150)mm],盛液體培養基培養細菌或作瓊脂斜麵用,亦可用於細菌、病毒等的稀釋和血清學試驗;③小試管[(10~12)mm2×100mm],一般用於糖發酵或血清學試驗和其他需要節省材料的試驗。圖1不同型號的試管

圖2德漢氏小管

(二)德漢氏小管

觀察細菌在糖發酵培養基內產氣情況時,一般在小試管內再套一倒置的小套管(約6mm2×36mm)(圖2)。此小套管即為德漢氏小管,又稱發酵小套管。

(三)小塑料離心管

又稱Eppendorf管(圖3)。

常用有20mL、15mL和05mL等型號,主要用於微生物分子生物學實驗,小量菌體的離心,DNA(或RNA)分子的檢測、提取和PCR反應等。圖3小塑料離心管

(四)吸管

1.玻璃吸管

微生物學實驗室一般要準備1mL、5mL、10mL的刻度玻璃吸管。吸管一般有兩種類型,一種是血清學吸管,又稱移液管(圖4),這種吸管刻度指示的容量包括管尖的液體體積;另一種是不計量的毛細吸管,又稱滴管(圖5),可配合膠頭使用,吸取動物體液和離心上清液以及滴加少量抗原、抗體等。圖4移液管