應用隨機引物法標記探針，需注意的是不能利用大腸杆菌DNA聚合酶全酶，因其具有5—3外切酶活性，而隻能利用大腸杆菌DNA聚合酶片段。該片段具有聚合酶活性，但不具備外切酶活性。因此，放射性標記產物全都是通過引物延伸而不是通過切口平移所合成。
本實驗就是采用隨機引物法標記探針。
實驗材料
恒溫水浴搖床、空氣搖床、台式高速離心機、微量可調移液器及其配套吸、電泳儀及電泳槽、紫外透射儀、攝相裝置、醫用X光膠片、暗盒及增感屏、幹燥箱、放射線檢測儀、塑封機、尼龍膜、濾紙、常規生化玻璃器皿、雜交袋、塑料帶蓋離心管。
實驗步驟
本實驗采用珠蛋白基因探針來檢測人基因組DNA經限製酶消化後產生的片段。以珠蛋白基因末端處一段重複順序，是廣泛分布在人基因組中小衛星家族中的一員。由於重複單位拷貝數在各個個體的染色體上呈高度變異性而得名。當用適當的限製酶，消化加入基因組時，由於。珠蛋白爾的多態性，在各個個體中可得到大小不同的片段，用放射性同位素標記作為探針進行雜交，可顯示這些片段的存在與大小。每一個體有兩條16號染色體，即存在兩個順序。因此雜合態中可見兩種大小不同的DNA片段。
人群中珠蛋白變異範圍在雜合子頻率達90%以上。由於“珠蛋白基因的高度多態性，可被用於法醫學檢測以及遺傳病成人型多囊腎病的基因診斷。
本實驗應用隨機寡核苷酸引物法標記探針。所采用試劑盒可自一些生物製品公司購買。紙與凝膠間不能留有氣泡。
用塑料保鮮膜圍繞凝膠周圍，作為屏障，防止液體直接流至凝膠上方的衛生紙中，即防止“短路”。
在凝膠上放置好的尼龍膜，使二者切角放齊，趕出氣泡。
取下尼龍膜，放置液中漂洗10分鍾洗去殘留凝膠碎塊。
取出尼龍膜，置濾紙上晾幹10分鍾。
取出雜交膜，用手提放射線探測器檢查膜上放射性強度，膜上無DNA部分應該不發出可檢測信號，否則需再洗潘一次。
放射自顯影洗滌後雜交膜置於濾紙吸去多餘液體，用保鮮膜包好。
將雜交膜固定在增感屏上，置於暗盒內。
取1張X光膠片，切成雜交膜大小，並切去一角，與雜交膜相對應。壓在雜交膜上。
取出暗盒，按常規顯影、定影各20分鍾即可觀察到X光片上有黑色條帶，進行分析。
注意事項
1.整個操作過程，均需戴上乳膠手套。是強誘變劑並有中度毒性，操作時應倍加注意。本次實驗要接觸到放射線，雖然射線為盡射線，在空氣中傳播距離僅1厘米左右，仍需注意保護。盡可能短地暴露在放射線下，標記時或雜交封膜時均應在鉛玻璃保護屏後麵操作。
2.含有放射性的雜交液以及被放射性同位素汙染的手套等物品均需放置在特定容器內，不得隨意丟棄，以免汙染環境，3午半衰期約14天，可集中存放在特定房間，等若幹個半衰期後再遺棄。