一、實訓目標
（1）熟悉中藥材和中藥製劑中有機氯農藥殘留量的檢查方法。
（2）學會氣相色譜儀的使用方法。
二、實訓原理
農藥殘留是指農藥使用後殘存於生物體、農副產品和環境中的微量農藥原體、有毒代謝物、降解物和雜質的總稱。中藥材在生產過程中為提高藥材產量、減少病蟲害常需噴灑農藥，此外，土壤中殘留的農藥也可能引入藥材中，致使中藥材中農藥殘留問題較為嚴重，同時，也直接影響著中藥製劑的安全性。因此，有必要對中藥材和中藥製劑中農藥殘留量進行檢查。
農藥品種繁多，有機氯類和有機磷類農藥的毒性大，降解緩慢，因此，在接觸農藥時間長短未知的情況下，應對中藥材及其製劑進行有機氯類和有機磷類農藥殘留量的檢查。
擬除蟲菊酯類殺蟲劑是模擬天然植物除蟲菊的有效殺蟲成分除蟲菊素，經人工合成的一類農藥，目前使用較為廣泛，有時也有必要對其進行農藥殘留量檢查。
2005年版《中國藥典》一部中采用氣相色譜法測定中藥材和中藥製劑中部分有機氯農藥的殘留量。
三、主要儀器及試藥
儀器：氣相色譜儀，高效毛細管柱，離心機，旋轉蒸發器。
試藥：六六六（BHC）\[α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC\]、滴滴涕（DDT）\[PP′-DDE，PP′-DDD，OP′-DDT，PP′-DDT\]及五氯硝基苯（PCNB）農藥對照品；甘草藥材（市售）。
四、實訓內容與步驟
色譜條件與係統適用性試驗：彈性石英毛細管柱（30m×0.32mm×0.25μm）SE-54(或DB-1701)；63Ni-ECD電子捕獲檢測器。進樣口溫度230℃，檢測器溫度300℃，不分流進樣。程序升溫：初始100℃，每分鍾升高10℃升至220℃，每分鍾升高8℃升至250℃，保持10min。理論板數按α-BHC峰計算應不低於1×106，兩個相鄰色譜峰的分離度應大於1.5。
對照品儲備液的製備：精密稱取六六六（BHC）\[α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC\]、滴滴涕（DDT）\[PP′-DDE，PP′-DDD，OP′-DDT，PP′-DDT\]及五氯硝基苯（PCNB）農藥對照品適量，用石油醚（60～90℃）分別製成每1mL含4～5μg的溶液，即得。
混合對照品儲備液的製備：精密量取上述各對照品儲備液0.5mL，置10mL容量瓶中，用石油醚（60～90℃）稀釋至刻度，搖勻，即得。
混合對照品溶液的製備：精密量取上述混合對照品儲備液，用石油醚（60～90℃）製成每1L含1μg的溶液，即得。
供試品溶液的製備：取甘草藥材於60℃幹燥4h，粉碎成細粉，取2g，精密稱定，置100mL具塞錐形瓶中，加水20mL浸泡過夜，精密加丙酮40mL，稱定質量，超聲處理30分鍾，放冷，再稱定質量，用丙酮補足減失的質量，再加氯化約6g，精密加二氯甲烷30mL，稱定質量，超聲處理15min，用二氯甲烷補足減失的質量，靜置（使分層），將有機相迅速移入裝有適量無水硫酸鈉的100mL具塞錐形瓶中，放置4h。精密量取35mL，於40℃水浴減壓濃縮至近幹，加少量石油醚（60～90℃）如前反複操作至二氯甲烷及丙酮除淨，用石油醚（60～90℃）溶解並轉移至10mL具塞刻度離心管中，加石油醚（60～90℃）精密稀釋至5mL，小心加入硫酸1mL，振搖1min，離心（3000r/min）10min。精密量取上清液2mL，置具刻度的濃縮瓶中，連接旋轉蒸發器，40℃下（或用氮氣）將溶液濃縮至適量，精密稀釋至1mL，即得。
測定法：分別精密吸取供試品溶液和混合對照品溶液各1μL，分別連續進樣3次，取3次平均值，按外標法計算供試品中9種有機氯農藥的殘留量。
甘草中有機氯農藥殘留量：六六六（總BHC）不得過千萬分之二；滴滴涕（總DDT）不得過千萬分之二；五氯硝基苯（PCNB）不得過千萬分之一。
五、注意事項
（1）實驗中用到9種農藥對照品，應注意避免相互混淆並注意自我保護以防中毒。
（2）應注意氣相色譜儀的規範操作。
六、考核標準
優秀：熟悉中藥材及其製劑中有機氯農藥殘留量的檢查方法，能熟練使用氣相色譜儀，操作規範，方法正確，結果準確。
合格：熟悉中藥材及其製劑中有機氯農藥殘留量的檢查方法，會使用氣相色譜儀，操作基本規範，方法正確，會計算結果。
不合格：不會使用氣相色譜儀，操作方法不正確。