一、實訓目標
（1）學會用試管二倍稀釋法觀察清熱藥的體外抗菌作用的實驗方法。
（2）觀察黃連的抗菌作用。
二、實訓原理
黃連為清熱瀉火藥，具有清熱燥濕，瀉火解毒的功效。其主要有效成分為生物堿類，具有抗病原微生物的作用。本實驗采用試管二倍稀釋法，在含有不同濃度藥物的滅菌肉湯培養基試管內，接種實驗細菌，培養後觀察細菌能否生長，以此來判斷藥物的最低抑菌濃度（MIC）。
三、主要儀器及試藥
儀器和用具：滅菌小試管、試管架、吸管、滅菌小棉簽、小鑷子。
試藥：滅菌肉湯培養基、黃連水煎液（1g/mL）。
四、實訓內容與步驟
取滅菌小試管10支，按1～10編號，排列於試管架，按無菌操作分別加入肉湯培養基0.5mL，用吸管吸取黃連水煎液0.5mL放入第1管，並反複吹勻。從第1管吸取0.5mL放入第2管，同樣吹勻後吸出0.5mL放入第3管。依此法逐管進行稀釋至第9管。第10管不加藥液作為對照管。各管均加入培養18h並用肉湯稀釋至0.0001的金黃色葡萄球菌209-P菌液0.5mL（每1mL內含105～106個細菌），放入37℃培養箱培養24h後，取出觀察細菌生長情況，細菌不生長的最低濃度為黃連對金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度（MIC）。
五、注意事項
（1）操作應在無菌條件下進行。
（2）取量盡量準確。
六、考核標準
優秀：能學會實驗方法基本原理，操作熟練，方法正確，結果統計處理正確。
合格：理解實驗方法基本原理，操作正確，結果統計處理正確。
不合格：不理解實驗方法基本原理，操作方法不正確。