一、實訓目標
(1)學會用毛細管法觀察止血藥對小鼠凝血時間影響的實驗方法。
(2)了解小薊炭減少小鼠凝血時間的作用機理。
二、實訓原理
小薊具有涼血止血,祛瘀消腫的功效,炒炭後其止血作用增強。其主要機理是通過使局部血管收縮,抑製纖溶而發揮止血作用。通過本實驗觀察小薊炭對小鼠凝血時間的影響。
三、主要儀器、試藥及實驗動物
儀器和用具:秒表,直徑1mm毛細管。
試藥:小薊炭(過120目篩,用5%的澱粉水溶液將藥物研細,製成混懸液)、雲南白藥(市售)。
實驗動物:昆明種小鼠,雄性,30隻。
四、實訓內容與步驟
取小鼠30隻,體重(20±2)g,隨機分為3組,每組10隻,分為空白對照組、雲南白藥組(陽性對照)和小薊炭組(按小鼠1.5g生藥/kg給藥)。
給藥前12h禁食不禁水,灌胃給藥1h後,用玻璃毛細管插入小鼠眼內球後靜脈叢,深4~5mm,輕輕轉動再縮回。自血液流入管內開始計時,血液注滿後取出毛細管平放於桌上,每隔30s折斷兩端毛細管約0.5cm,並緩慢向左右拉開,觀察折斷處是否有血凝絲。至血凝絲出現為止,所曆時間即為血凝時間。
五、注意事項
(1)凝血時間可受室溫影響,溫度越低,凝血時間越長。本實訓室溫最好在15℃左右。
(2)測試用的毛細玻管內徑最好為1mm,並均勻一致。
(3)毛細管采血後不宜長時間拿在手中,以影響實驗結果。
六、考核標準
優秀:能學會實驗方法基本原理,操作熟練,方法正確,結果統計處理正確。
合格:理解實驗方法基本原理,操作正確,結果統計處理正確。
不合格:理解實驗方法基本原理,操作方法不正確。