正文 項目四 雙黃連口服液的製備、質量分析及平喘作用(1 / 2)

一、實訓目標

(1)學會雙黃連口服液製備的工藝流程及操作注意事項。

(2)學會雙黃連口服液的質量檢查方法。

(3)熟悉雙黃連口服液平喘作用的實驗方法。

二、實訓原理

1.中藥口服液的生產工藝流程

中藥→提取→純化→濃縮→配液→過濾→灌封→滅菌→檢漏→貼簽→包裝等

2.中藥口服液的質量檢查

質量檢查主要有裝量、微生物限度、相對密度、pH、主藥含量等項目,以保證藥劑質量和用藥安全。

3.藥物平喘作用藥理實驗方法

觀察藥物的平喘作用多是采用藥物誘導製備動物哮喘模型,之後給予相應的藥物,觀察藥物的平喘作用。

觀察平喘作用常用的製備動物模型的方法有:

(1)豚鼠噴霧致喘法對豚鼠使用藥物(組胺和乙酰膽堿)噴霧法引起支氣管痙攣窒息,由於抽搐而跌倒,給予對應藥物,觀察藥物對支氣管平滑肌的鬆弛作用。

(2)離體支氣管實驗法觀察藥物對豚鼠離體氣管的作用,從而證明藥物對支氣管平滑肌的收縮或鬆弛作用。

三、主要儀器、試藥及實驗動物

儀器:托盤天平、萬能粉碎機、標準篩、燒杯、精密pH試紙、溶劑過濾器、可調定量加液器(5~10mL)、手提式高壓滅菌器、垂熔玻璃漏鬥、微孔濾膜及其裝置、真空泵、減壓過濾裝置、全自動灌封機、噴霧器、密閉的霧室、秒表、天平、一次性注射器、注射針頭等。

試藥:金銀花、黃芩、連翹,鹽酸、醋酸、氯仿、甲醇、氫氧化鈉、蔗糖、香精、黃芩苷、綠原酸、連翹苷對照品、聚酰胺薄膜、矽膠G板、組胺和乙酰膽堿等。

實驗動物:健康豚鼠60隻。

四、實訓內容與步驟

1.雙黃連口服液的製備

取金銀花(375g)、黃芩(375g)、連翹(50g)三味,黃芩加水煎煮三次,第一次2h,第二三次各1h,合並煎液,過濾,濾液濃縮並在80℃時加入2mol/L鹽酸溶液適量調節pH至1.0~2.0,保溫1h,靜置12h,過濾,沉澱加6~8倍量水,用40%氫氧化鈉溶液調節pH至7.0,再加等量乙醇,攪拌使溶解,過濾,濾液用2mol/L鹽酸溶液調節pH至2.0,60℃保溫30min,靜置12h,過濾,沉澱用乙醇洗至pH為7.0,回收乙醇備用;金銀花、連翹加水溫浸30min後,煎煮二次,每次1.5h,合並煎液,過濾,濾液濃縮至相對密度為1.20~1.25(70~80℃)的清膏,冷至40℃時緩緩加入乙醇,使含醇量達75%,充分攪拌,靜置12h,濾取上清液,殘渣加75%乙醇適量,攪勻,靜置12h,過濾,合並乙醇液,回收乙醇至無醇味,加入上述黃芩提取物,並加水適量,以40%氫氧化鈉溶液調節pH至7.0,攪勻,冷藏(4~8℃)72h,過濾,濾液加入蔗糖300g,攪拌使溶解,再加入香精適量並調節pH至7.0,加水至1000mL,攪勻,靜置12h,過濾,灌裝,滅菌,即得。

2.雙黃連口服液的質量分析

主要進行包括性狀、鑒別、相關項目檢查和成分測定等分析。

【性狀】本品為棕紅色的澄清液體;味甜,微苦。

【鑒別】(1)取本品1mL,加75%乙醇溶液5mL,搖勻,作為供試品溶液。另取黃芩苷對照品、綠原酸對照品,分別加75%乙醇製成每1mL含0.1mg對照品的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005版附錄Ⅵ B)試驗,吸取上述三種溶液各1~2μL,分別點於同一聚酰胺薄膜上,以醋酸為展開劑,展開,取出,晾幹,置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的熒光斑點。

(2)取本品1mL,加甲醇5mL,振搖使溶解,靜置,取上清液,作為供試品溶液。另取連翹對照藥材0.5g,加甲醇10mL,加熱回流20min,過濾,濾液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2005版附錄Ⅵ B)試驗,吸取上述兩種溶液各5μL,分別點於同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的矽膠G薄層板上,以氯仿-甲醇(5∶1)為展開劑,展開,取出,晾幹,噴以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加熱數分鍾。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。