一、種曲
1.常規米曲黴種曲三級培養法
我國北方的釀造是以米曲黴為根基發展起來的。最初的曲上所繁殖的米曲黴來自自然界,米曲黴的習性,在老熟時要結出體態輕盈如塵的黃色孢子,可隨空氣的流動飛揚至殘飯上,迅速繁殖又結成黃色孢子,產生甜味及酒味,在人為的多次培養中,由於其強大的生命力,將部分微生物淘汰掉,殘留下來的依然以米曲黴為主,而且在反複製曲過程中,必然是增強的米曲黴群體,所以古代製曲常常利用製曲的場所附著的曲黴孢子為種子製曲,傳統製備米曲黴的曲室不進行滅菌的道理就在於此。另外據長期生產經驗,將其繁殖於某種培養基上,貯存起來備用,這就是人造種子,也是早期的種曲。農村生產醬,就常常用蒸豆作培養基製成團狀,懸掛於屋椽下使米曲黴繁殖,就是一例。隨著大規模生產的進行,以後常取部分良好的曲作下次製曲的種子,也可以說是一種工曲,又叫友曲。純正種曲的培養始自三十年代,形成了種曲三級培養法。種曲的生產是獲得純度高的曲黴分生孢子為目的,因此種曲的生產方法與大曲(生產用曲)不同。
種曲用材料以麥麩為主,有時因產品不同也有使用破碎大豆、小麥或碎米。曲料水分以45%~55%者為最多。種曲的製備一般采用三級培養,即原菌(試管斜麵)培養、三角瓶擴大培養及種曲製備三個階段。
(1)試管培養選用顆粒完整、無蟲蛀及未變質新鮮大豆,用清水洗淨,加相當於大豆質量4倍的清水,浸漬10~15h,冬天宜長,夏天宜短,並且每隔5~6h換水一次,待豆粒充分吸水膨脹,達到豆粒無皺紋、無硬心,兩指輕輕一撣、豆皮脫落為度,淋去水分,再加清水6倍於幹大豆,煮沸3~4h,經常補水,保持一定水位。趁熱用藥棉過濾。每100g大豆可得到波美5度豆汁100mL、每100mL豆汁加入磷酸二氫鉀0.1g,硫酸鎂0.05g,硫酸銨0.05g、葡萄糖2g、加熱熔化,用蔗糖調整濃度至波美7度,測定豆汁pH,用1mol/L NaOH調至pH6,每100mL豆汁加入剪碎瓊脂1.5~2g,加熱充分熔化,趁熱裝入幹燥滅菌試管,(以1.5cm長15cm者較適用)。每管約4mL,塞好棉塞,用防潮紙包裹。加壓98kPa滅菌20min。趁熱斜置作成斜麵。放入25~30℃培養箱,3d後,檢查培養基滅菌是否完全。
接種在無菌室內以無菌操作進行,放入28~30℃培養箱中培養,待菌絲發育成熟,結滿黃綠色孢子即成,約72~96h。存入4℃冰箱保存。
(2)錐形瓶培養培養基選用新鮮不變質麥麩及用50號細篩篩過細豆粉為原料,其配比可為80∶20,加同質量水拌勻,裝15~20g於滅菌500mL三角瓶,加棉塞,於98kPa壓力下滅菌30min。放入28~30℃培養箱中培養3d,檢查滅菌是否完全。
接種在無菌室以無菌操作挑取試管中斜麵原菌孢子(多量)一接種環,加棉塞充分搖瓶,於28~30℃培養,20~24h後搖瓶一次,搖碎結塊,待再結成硬塊後扣瓶,待孢子全麵變黃綠色,約72h即可。
(3)種曲的製備一般采用曲盤法,種曲室應充分滅菌,最簡易的是燃燒硫黃法,每立方米用25g,用炭火使燃,密封曲室20h後啟用。所用曲盤器具等均須清洗後裝入曲室疊成十字形或品字形滅菌。蓋曲盤用布簾也應在蒸料時蒸汽滅菌。
種曲用料仍按錐形瓶培養法,麥麩與豆餅之比為80∶20,加水100%,98kPa壓力下滅菌30min,燜30min。蒸料一般含水量55%左右。蒸料經過翻拌降溫至38~40℃,加入事先與少量幹蒸麩或麵粉混合的錐形瓶純種,拌勻即可堆積、保溫。待品溫升至37~38℃,翻拌使勻,待品溫升至37℃即可裝盤,厚度為1~1.5cm,曲盤堆成柱形,頂上蓋一空盤,保持室溫27~30℃,幹濕球相差1℃。
自接種裝盤後8h,當盤內品溫升至35℃,肉眼以明顯看到菌絲成微白色並稍結塊,即可進行第一次翻曲,使鬆散並攤平,蓋上已滅菌的濕布,改為品字形堆積,翻曲時通風換氣一次。約5~6h,曲料結滿白色菌絲,呈現硬塊,品溫升至36℃,即進行翻二遍曲,仍蓋上濕布,品字形堆積。每次翻曲即可達到調動曲盤上下左右位置的目的,在溫度管理中應注意蓋布,必要時要用殺菌水浸過,以保證製曲溫度。二遍翻曲後6h左右,已能見到微黃色孢子,此時品溫應保持在35~36℃。自蓋濕布40~48h,即可揭掉。此時孢子全部結滿,將曲改成柱形堆積、通風、排除濕氣,控製室溫30℃,準備出曲,總製曲時間約72h。
近年,由於對種曲質量要求較高,我國已開發了一種小型通風種製曲的裝置,從蒸料開始、拌種、培養均在一個容器內進行,實施了密封無菌作法。在厚約2cm的薄皮箱內裝入曲料,然後通過台車送入裝置中,密封,通入高壓蒸汽蒸熟滅菌,並進行真空冷卻,慢慢通入過濾的無菌空氣,空氣進入的同時將曲種吸入,這樣逐步使之達到常壓,在這期間曲料的空隙部分從真空回到常壓過程中,含種曲的空氣就被吸入,使菌種附著於曲料上。製曲時熱量的排除靠罐外夾套冷卻水及罐內風扇進行,並在適當時送入新鮮無菌空氣,供曲菌繁殖用。
2.種曲的條件、保管及使用
醬油的質量及原料配比、製曲技術、發酵管理、加熱滅菌等對影響很大。其中種曲良否的影響更大,獲得優良種曲是其先決條件,優良種曲應具備下列幾個基本條件:①保證安全;②具有強的酶活;③具有強的繁殖能力;④製曲過程中碳水化合物的消耗少;⑤具有香氣;⑥無雜菌。
種曲的使用以新鮮者為好,當室溫在10℃以下時,不必幹燥貯存,存放在原曲盤內即可。在10℃以上時,種曲一周內用不完,則需在曲室內烘幹、幹燥,溫度不使品溫超過40℃即可。種曲的幹燥含水量宜在15%以下,出售的種曲宜在含水量10%以下。
現在有將種曲孢子篩下,加填充劑製成“曲精”出售者。上海釀造一廠、石家莊鼎新公司等多家均有曲精出售。
為了保證種曲的質量,必須充分注意保管,除冬季,外界的大氣濕度高時,可能導致種曲發芽率的降低,貯存環境不佳,容易遭受汙染。因此,新鮮種曲的孢子發芽力高,未受汙染,最好立即使用,種曲購入量也應盡量減少,同時為了防止蟲害,宜與幹燥劑保存於密封容器內,夏季最好貯於冷庫(5~10℃)。
種曲的接種量,在過去曲盤法或簾子曲以0.1%為標準,以後采用旋轉罐,即日出鍋工藝後,為了防止雜菌的滋長,保證製曲安全,用曲量有所增加,一般為0.2%~0.3%。通風製曲的種曲用量增加到0.4%~0.5%。但是,由於最近種曲質量的提高,生產了幾乎無雜菌的種曲,通常的使用量已不是標準。應根據現場實際情況決定。
接種種曲的溫度超過40℃,會弱化種曲,可能降低種曲孢子的發芽力,增加了汙染的機會。夏季接種後的品溫,有時達45℃,應考慮使用冷卻設備。
二、製曲裝置
醬油曲在製曲過程中的菌絲生長期,尚未生成蛋白酶,進入孢子生長期才急劇大量生成。因此,在製曲設備方麵都是為了滿足這種溫度經過而設計的。設備種類雖然不少,但都必須具備下列條件。