公豬精液質量的評定
一、?前言
豬精液采集後,首先要評定公豬精液質量,然後才能對精液進行進一步處理,以獲取高質量的精液。處理精液以前,選擇能有效篩選精液的方法對提高豬場的繁殖性能是必要的。在最理想的情況下,在精液處理前對公豬的精液進行全麵地評估,以鑒別出那些劣質精液。對儲藏的精液,每天必須檢查總活動精子數和評估精子的外形;這樣,將可以確保用於人工授精的精液不被汙染。因此,這篇文章的目的就是敘述公豬精液質量的評定方法和說明哪些公豬的精液可以進入試驗室進行進一步處理。
二、密度
一般在評定公豬精液的質量時應檢測四個基本參數:精子密度、活力、外形和頂體完整性。其中,精子的密度和活力這兩個基本參數常在精液處理前篩選精液。原因是測定這兩個參數花費的時間最少,而且可以用它們來計算精液的稀釋倍數。
測定精液的濃度或精子的總數不僅是評定精液質量的組成部分,更重要的是用來監控公豬健康狀況和繁殖潛力;並且,它還是優化個體遺傳潛力的主要考慮因素。正確的評定精液的質量不隻是增加公豬每次射精量和提高公豬舍的使用效率的唯一因素。精液質量評定的目的是保證有足夠數量有活力的精子用於人工授精。
三、精子的活力
精液的活力是精液評定的一個重要方麵。最近的一個研究表明:當在采精後立即(少於24h)進行評定和輸精時,使用精子活力低於62.5%,產仔數/產仔率將下降。然而,由於商用種公豬的精液很少會在這麼短時間內使用,所以,一般精液都經過處理後才輸送到母豬場使用。精液經過儲存後,它的活力會下降。所以在評定種公豬精液時,活力最小值應大於60%。許多種公豬站製定了精子活力在70~80%之間的篩選標準。精液經過實驗室處理後活力最小值應根據使用前計劃儲存時間和在這段儲存時間內的預期活力下降而定。並且,種公豬站必須考慮養豬場精液儲存條件和處理精液的能力比公豬站差這一點。考慮公豬站與母豬場之間精液輸送的差異將有助於公豬站選擇初活力的接受水平以確保輸送精液的精子活力在60.0%以上。
通過顯微鏡從視覺上估計精子活力的方法應用最廣泛。技能和經驗對結果準確性有一定的影響。簡而言之,在溫熱的載玻片上放置一小滴精液稀釋液(所有的評估中精液的稀釋率必須統一標準),然後蓋上蓋玻片。樣本稀釋到用400倍的物鏡足以觀察全部精子細胞,總體的估計來自觀察的精子群。這樣,應首先對實驗員進行培訓。這種培訓首先要求實驗員對總體精子活力進行估計,然後實驗員用顯微鏡計算在5個區域內10個單元格的精子總數和有活力的精子占總精子的百分數,以驗證精子總活力。
四、外形
精子的外形和頂體完整同樣對精子的生存力有影響。就估計精液質量而言,評定精子外形比評定精子活力更能體現精液質量。這兩個參數和精子活力在精液質量評定時都至關重要。它們一起決定精液的取、舍。
運動的精子可能外形上不正常;但是,運動力低的精子可能受精。然而,沒有頂體的精子不可能受精。用這三個參數標準評定精液質量就很可能低估了精液真正的受精能力和公豬精液質量。
正如精子的活力,精子的外形評定表明:在使用人工授精時,需要一個確定正常精子外形百分數提高母豬繁殖率。研究資料還表明:精子常規評定使用的是外形這個參數。如果是使用精液,那麼正常形態精子百分數小於70%的精液應認為是劣質精液。由於正常形態精子百分數在儲存期將減少,而且由於在公豬個體間差異較大。所以,當使用長期儲存(>24h)的精液時;最初處理的精液的正常形態的精子百分數要達在70%以上。
在檢查精子活力同時可以粗略地對精子外形進行評定。然而,理想的外形檢測要使用顯微鏡,它能區分精子的各個部分。精確地評定精子的外形是通過分別計算正常精子頭部、微滴和尾部數。吸取1-2滴精液按1:10與稀釋劑混合,使用顯微鏡(400倍或1000倍)觀察,外形百分數可以直接計算出來。如果精液不可能立即被檢測(<30分鍾),應先用0.5-1毫升生理鹽水固定或保存在載玻片上。除了保存樣品,精子同時被固定。因此,更容易觀察。可以觀察濕的樣本或者製成幹的固定的標本再進行觀察。頭部、尾部和胞質畸形的精子計為不正常的精子。盡管有近端小滴(靠近頭部)的精子對精液質量評定的影響較小。然而,當近端小滴迅速增加時,用產仔率和產仔數來衡量的繁殖力將逐漸降低。在采集的精液中末端微滴比近端小滴更易被發現,末端小滴的影響似乎與近端小滴一樣。盡管一些資料認為公豬精液細胞質微滴的影響是有限的。
五、頂體完整性
頂體膜覆蓋精子頭部的三分之二,它含有穿透卵母細胞所必需的酶。頂體完整性的評定很費時,需要比較先進的顯微鏡,並且要有熟練地操作技能。一些研究表明:頂體完整性比精子的活力在評定精子質量方麵更具有代表性。頂體完整性檢查與精子外形檢查的方法一樣。然而,在檢測單個精子細胞時應該先把載玻片放在顯微鏡下,然後觀察精子頂體層的差別。頂體完整率小於51%的精液認定為劣質的精液,即使精液的受精率可能是處於同一水平。頂體的完整性評定使用與活力和形態學評定一樣的原理。當精液被長期保存時,正常頂體百分數小於51%精液的受胎率可能很低。活力,外形,或頂體完整性的評定乎並不能完全估計繁殖力,但是它卻是精子生存能力的基本表現。與公豬的射精能力預測產仔數和受胎率相比,以上所述的估計方法是通過消滅劣質的精液來影響受胎率和產仔數。