正文 第四節 其他快速檢測方法(1 / 1)

一、生物傳感器技術

生物傳感器選用選擇性良好的生物材料(例如酶、DNA和抗原等)作為分子識別元件,當待測物與分子識別元件特異性結合後,所產生的複合物(或光、熱等)通過信號轉換器變為可以輸出的電信號、光信號等並予以放大輸出,從而得到相應的檢測結果。其具有較好的敏感性和特異性,操作簡便、反應速度快。如對沙門菌的檢測時間可縮短到24h以內。已有試驗成功表明,采用酶免疫電流型生物傳感器可實現對存在於食品中少量的沙門菌、大腸杆菌和金黃色葡萄球菌等的檢測。Tahir等人采用電化學免疫傳感器技術檢測E.coli O157:H7,可以在10min內完成分析,檢測精度可達10CFU/mL。

二、自動化儀器分析技術

計算機技術的應用極大地促進了微生物檢測技術的發展,自動微生物鑒定係統就是這兩者結合的產物。其原理是將微生物數碼鑒定的方法與計算機技術結合起來,通過係統對生化反應自動判定,組成數碼並與數據庫中的已知分類單位相比較,獲得相似係統鑒定值而獲得結果。國內外已有很多全自動微生物分析係統問世,如Vitek係統、Biolog係統、Midd係統、Sensitire係統、Autosceptor係統、Bax係統等。其中由法國生物梅裏埃集團生產的Vitek全自動細菌鑒定及藥敏分析係統和Vidas全自動快速致病菌篩選儀,已得到美國分析化學家協會(AOAC)認可,Vitek-AMS可以鑒定革蘭陽性菌、革蘭陰性菌、厭氧菌等約300餘種(屬)的微生物,Vidas分析儀隻需1~2.5h就能報告檢測結果,可同時分析30個標本,所有操作均為全自動,能檢測沙門菌、大腸杆菌等6種常見的致病菌。

三、“幹片”法

“幹片”法是利用無毒的高分子材料做培養基載體,快速、定性和定量檢測試紙和膠片的食品微生物檢測方法,集現代化學、高分子科學、微生物學於一體,已經達到作為定量常規法的水平。對有些項目的測定,幾乎可與標準方法相媲美。如3M公司的Perrifilm Plate係列微生物測試片,可分別檢測菌落總數、大腸菌群、黴菌和酵母菌計數。由RCP Scientific Inc公司開發上市的Regdigel係列,還有檢測乳杆菌、沙門菌、葡萄球菌的產品,並且與傳統檢測方法之間的相關性非常好。由於其準確度和精確度高,可測定少量檢品,不需要配製試劑,操作簡便快速,易於消毒保存,便於運輸,攜帶方便,價格低廉,可隨時進行。加之無其他任何廢液廢物,大大減少或消除對環境的汙染,故適用於實驗室、生產現場和野外環境工作,可以使防疫工作人員隨時取樣檢查,減輕勞動強度,提高檢驗質量。

四、綜合法

(1)ATP生物發光法近年來發展較快,在活細胞中ATP含量近乎是恒定的,利用特殊的酶試劑水解細菌的細胞膜,使ATP釋放,ATP與熒光素-熒光素酶製劑反應變成AMP和光,產生的光的強度與ATP成正比。細菌ATP的量與細菌數成正比,通過測定光的強度可以確定細菌濃度。這種方法可以用於鮮肉、鮮魚、牛乳、啤酒、礦泉水等多個領域的檢測。

(2)阻抗法微生物在生長繁殖的過程中,其代謝產物的增加會導致液體培養基中電阻的變化,使介質的導電性增強,即電阻減小。阻抗法就是依據該原理,通過檢測微弱的電位變化,培養過程中,在出現菌落之前就能檢測到微生物的存在。如法國生物梅裏埃公司生產的Bactormer細菌分析儀就是依此原理製成的。它能在6~12h測定各種食品的總菌數,以及選擇性檢測各種致病和非致病菌。目前市售商品有英國MalthuS Micro Biol Analyser係統,它測定電導率的變化。另一種是美國Bactometer微生物監控係統,它測定阻抗變化。