進入21世紀,人們的生活正在從小康向富裕轉變。人們的消費水平也在不斷提高,食物消費將趨向多樣化、營養化、科學化、方便化等高質量的追求,這就對生產高質量農產品提出了新要求。農產品的質量一是決定於作物的遺傳因子,二是決定於生態環境因子,三是決定於生產技術措施。由於核科學的迅速發展,同位素示蹤技術在圍繞產品質量的上述三個領域內都被廣泛地應用。

作物的性狀、產量和品質都是受遺傳基因控製的,示蹤技術作為育種工作的一種手段,既可以用來直接鑒定或篩選優良基因型,以幫助選擇優良的親本組合,又可以用來測定某些性狀或生理過程,以幫助在分離的後代群體中選擇所希望的植株,作為選擇的依據。因為許多作物的性狀和生理過程,同它的產量與品質具有直接的相關性。示蹤技術一方麵可以直接分析作物的化學成分,以鑒定產品的品質;另一方麵可以研究作物品質形成的基本生理過程,以探索提高產品質量的途徑。對於育種學家來說,有些個體材料不可能在進行常規分析後確定其取舍,而需要進行活體的甚至無損的檢測,這時示蹤技術就能發揮最大的優越性。特別是近代信息技術的發展,計算機與示蹤技術的結合,使過去不能實現的某些檢測成為可能。

第一節品質育種中的中子活化分析法

農作物的品質反映在它的化學成分上,如蛋白質、氨基酸、油分、脂肪酸、糖分、澱粉、維生素和微量元素的含量。它們一般都可以用常規的化學分析法或儀器分析法來測定。在品質育種研究中,對一些材料的成分含量,在測定精確度上要求較高,或者在材料的數量上不可能大量提供,或者在時間上不允許進行常規的分析。中子活化分析顯示出了它的優越性,以測定蛋白質含量為例,作為品質育種測定的作物種子蛋白質含量,在方法上要能滿足以下要求:第一,在精確度上能夠區分蛋白質含量間的微小差別;第二,分析要快速、簡便,並在短時間內能分析批量樣品;第三,對珍貴材料或單粒種子,最好能進行非破壞性的分析或隻取小部分組織進行分析。一般常規分析方法難以滿足上述全部要求,用中子活化法來測定種子蛋白質的含量可以滿足上述要求。

一、活化法測定蛋白質的基本原理

氮元素是蛋白質的重要組成分,氮原子在快中子的照射下產生核反應。這個反應的意思是,1個中子打進的原子核中,結果從核中放出了2個中子,使14原子變成了13原子。

二、具體方法

1.樣品準備:由於活化分析是靈敏度極高的分析方法,所以在樣品采集和製備過程中,必須注意不受汙染,有時用刀切的材料或用粉碎機粉碎的材料會受到金厲汙染,甚至用手操作手汗也會帶來汙染,這些都必須注意。樣品量一般不大,在幾十至幾百毫克之間。分析種子蛋白質,根據種子的大小取數粒比較均勻的子粒進行輻照。如果種子(玉米等)粒大外形不規則時,可將其壓成餅狀,或取一部分胚乳壓餅,將胚留作播種。

2.樣品包裝:進入反應堆照射的樣品一般用紙包好後封入聚乙烯小袋中,或封入專用的石英輻照盒,再包上鋁箔。

3.輻照:包裝好的樣品放在樣品架上,一批可以放好幾個樣品,送入照射孔輻照。

4.作標準曲線:將一批已知不同含氮量的參考樣品送入堆中一起輻照,輻照完成後測定其放射性,並對其含氮量作圖便得到標準曲線。有了標準曲線,隻要測定試驗樣品的放射性,就可以從曲線圖上查到對應於某一放射性活度的含氧量。

5.樣品測定:在輻照過程中,樣品中的其他元素同時被照射而活化,所產生的7能譜會幹擾樣品的測定。這種情況一般是通過控製照射時間,以及控製樣品測量的間隔時間來解決,即讓一些短壽命的同位素衰變後再測定。樣品測量有非破壞性和破壞性測定兩種,前者可以直接進行測定,後者要進行化學分離,然後才能測定(如測定蛋白質中某一氨基酸組分探測儀器)一般用具有碘化鈉晶體探頭的多道分析譜儀,並與計算機連接。

第二節鑒定品質的其他示蹤測定法

作物品質的組分很多,用示蹤法測定某一組分的含量,常用同位素稀釋法。我們仍以種子蛋白質為例,當需要測定某種氨基酸的時候,可以將這種氨基酸用或標記,並將其加入到氨基酸提取液中,根據同位素稀釋法的原理進行測定。如測定賴氨酸或蛋氨酸,根據它們與轉移核糖核酸有高度專一性結合的特點,可以用目標記賴氨酸或蛋氨酸,形成氨基酰化。這種專一性結合對標記氨基酸和非標記氨基酸是相等的,所以隻要測定到放射性的量,就可計算出樣品中賴氨酸或蛋氨酸的含量。

攀斯鮑爾譜技術也是測定種子蛋白質含量的一種核方法,關於穆斯鮑爾譜的原理和方法已前文表述,它對鐵具有較強的分辨能力。用該儀器測定氨基酸就要設法使氨基酸與某種鐵結合,如利用賴氨酸與氯化亞鐵或硫酸亞鐵的結合,將它們製成複合體,根據鐵的穆斯鮑爾譜峰測定氨基酸的含量。它的優點是測定時間短,操作簡便。