正文 第四章 植物核輻射誘變育種技術(三)(1 / 3)

第三節利用核輻射選育品種

一、輻射誘變方法

利用核輻射選育品種,首先是要用輻射去誘發植物產生突變。如何去誘變呢?就要用某種輻射源以適宜的劑量和適當的方法處理植物。隻有處理方法得當,才能有效地誘發突變,供以後選育。

(1)誘變源的種類:在誘變育種中所指的誘變源通常有物理誘變源和化學誘變源,這裏隻介紹物理誘變源,也就是常用的各種電離輻射。

①β射線:β射線是一種波長很短的電磁輻射,對植物組織具有很強的穿透能力,是目前誘變育種中使用最多的一種射線。β射線來自放射性核素,目前應用最多的是來自鈷-60和銫-137近年來我國已建設了一批源裝置,幾乎遍及各個省市,使用十分方便。

②X射線:與β射線一樣,X射線是一種不帶電荷的中性電磁輻射。它由X光機產生,在輻照生物材料時,采用高工作電壓和適當的濾片,以吸收能量較低的軟輻射,即可得到穿透力強的X射線。

③中子:中子是一種不帶電的粒子〃通常由反應堆、加速器和中子發生器產生。在誘變育種中應用最多的是熱中子和快中子。中子有較高的誘發突變效力,在誘變育種中應用日益廣泛。

④β射線:β射線即為電子束。它質量小,在組織中的穿透力要比X、β射線小得多,一般僅若幹毫米。盡射線可由電子加速器產生,也可從放射性同位素衰變中產生。

誘變輻射源還有。粒子和質子等,目前很少應用。

(2)誘變材料的選擇:誘變親本材料的選擇是植物誘變育種成敗的關鍵。育種目標是選擇處理親本材料的主要依據,同時也要考慮到親本材料的遺傳背景及其對輻射的敏感程度。在誘變育種開始時必須認真選擇適當的親本材料,以保證育種目標的實現。

首先應考慮親本材料的類別,即是品種、雜種,還是野生種。

品種是遺傳性穩定的純合體,它具有綜合經濟性狀優良、高產、適應性較強等優點。但大多數品種也有某些缺點,這些缺點的克服可能就是誘變改良品種的目標。品種又可細分為地方栽培品種、新近推廣品種、引入良種及農家品種,它們各具特點。不同品種對輻射誘變反應往往有所不同,變異方向和性質也難於控製。因此,為了實現某一育種目標,應注意避免處理親本材料的單一化,最好同時處理2~3個材料。

選用符合育種要求的優良雜交當代或低世代材料作親本誘變材料,已成為誘變育種發展的重要趨勢,並已廣為采用。利用當代雜交種子進行誘變處理,能促進雙親染色體間的易位,同時亦可使輻射與雜交分離世代同步,便於選擇。采用雜交後代高世代優良選係作誘變材料也是可行的,它既易產生變異,又能改良其個別不良性狀,達到育種目標。近年來,有利用種間雜種作為誘變材料的,如小黑麥與普通小麥雜種,栽培花生與野生花生雜種,這對利用開發近緣種質資源有重要意義。

野生種常具有某些獨特的有利性狀,如抗病、抗蟲和抗逆性,以及對環境的高度適應性。因此經過誘變處理,對其加以馴化、改造,誘發出一般品種難以獲得的變異,使之成為很有價值的種質資源或生產利用品種。

現在我們來討論植物體的哪些部分可用作誘變處理對象。原則上來說,植物體的任何部位的組織、器官都可用來進行誘變處理,這就需要根據育種目標,誘變特點和工作條件加以確定。下麵分別介紹常用的誘變處理對象。

①種子:風千種子是誘變處理中最常用的材料,其最大的優點是便於大量處理,且操作簡便,攜帶方便,可長途運輸。種子還可在其他活體材料所不能忍受的條件下(如幹燥、高溫、極低溫、真空、充氮)進行處理。也可以處理用水浸泡的種子或已萌動的種子,這些種子的胚細胞與幹種子的胚細胞不一樣,它們已脫離休眠狀態開始細胞分裂,因此對輻射處理要敏感得多。

②活體植株:活體植株可進行整體輻照,也可局部輻照;可以在整個發育過程輻照,也可在某個特定發育時期輻照;活體植株輻照可用盆栽在輻照室進行,也可在田間的(把輻射源裝在田間進行。

活體植株正處於生長旺盛時期,對輻射較為敏感,而且不同的發育階段其敏感程度也有較大差異,因此在輻照時掌握適當的劑量就顯得非常重要,隻有用適宜的劑量才能得到理想的效果。

③花粉:花粉是單細胞,而且其染色體為單倍體,經射線處理後一旦產生突變,由此精細胞與卵細胞融合後發育的植物組織,其所有細胞均包含突變,可避免由於細胞間競爭而引起突變的消失,從而獲得較高的突變頻率和突變譜。

處理方法:可先收集花粉,經處理後授粉;也可照射穗子或花朵。花粉的壽命較短,且易於失活,所以收集花粉、輻照直到授粉要在盡量短的時間內完成。

輻照花粉結合單倍體培養,不僅能較大幅度地提高突變頻率,並且能在較短的世代裏得到純合的突變體。

④合子:合子是植物精卵融合後的單細胞,它尚未開始細胞分裂。用它作為輻照材料,與輻照花粉具有同樣的優點。處理合子的關鍵是要掌握授粉至受精的時間和合子休眠持續的時間,這與植物種類、品種和氣候等條件有關。如合子開始第一次分裂。合子對輻射較敏感,要采用低於輻照花粉的劑量才易於成功。

也可輻照原胚。原胚是指合子細胞分裂初期,原始細胞數較少,經射線處理後也能獲得較好的效果。

⑤接穗或插條:接穗和插條是無性繁殖植物的常用誘變處理對象,其中尤以休眠芽枝為主。休眠芽中芽原基細胞較少,誘變效果較好。對插條最好用鉛等把發根部位屏蔽起來,減輕其損傷,以利於將來扡插後的發根成活。

⑥地下根莖:無性繁殖植物的球莖、鱗莖、塊根等均可作為輻照誘變材料。為獲得較高的突變頻率,應盡可能使這些材料上的芽處於發育早期階段進行輻照。

⑦離體組織:離體組織指幼穗、幼胚、花藥、花瓣、幼葉、鱗莖片等各類組織,以及組織培養中的愈傷組織、懸浮細胞和原生質體等。輻照這些材料一般均與植物組織培養技術相結合,其優點是使產生的突變可在細胞水平上直接表現,並在大量細胞群中篩選所需突變,從而大大提高誘變育種效果。這種技術可稱為離體誘變,是近年來國內外發展起來的新趨勢。

(3)誘變劑量和方法:當誘變材料選定後,就要根據所選材料的特點,確定適當的輻照劑攝和處理方法。

①誘變劑量:在一定劑貴範圍內,增加輻照劑量可以提高突變頻率,但隨之也會增加植物的生理損傷和不利突變頻率,實際上反而降低了有利突變頻率。所以選擇適宜的誘變劑量顯得特別重要。那麼用什麼來判斷劑量是否適宜呢?通常采用輻照後植株生長抑製程度作為判斷指標,如半致死劑量、半致矮劑泣和臨界劑量(即輻照後植株中仍有20%~30%)能形成種子能力的劑量)。

實際上,前人的大量研究結架可供我們在選擇適宜劑量時參考。在實際工作中應當注意兩點:一是在正式試驗前,最好做預備試驗,以檢驗所選劑量是否適當;二是不宜隻選1個處理劑量,一般應選擇3~4個處理劑量,這樣保險係數會更大些。如粳稻幹種子可選擇200分、250分、300分和350分等4種劑量。

②誘變處理方法:誘變處理方法要根據不同的植物材料而定,通常有外照射和內照射。外照射就是用射線在外部對植物材料進行輻照,放射性元素並不進入植物體內。外照射包括急性輻照和慢性輻照。很多研究證明,慢性輻照植株的突變頻率要大於急性輻照種子的突變頻率。

內照射是利用放射性同位素,將其配成一定比活度的溶液,引入到植物組織細胞內進行輻照。常采用浸泡、注射等方法處理。對種子等材料的處理可用浸泡法,對莖稈、枝條、花芽等可行注射法,也可把放射性溶液塗於葉片。內照射的所有植物材料都含有放射性,人體不能直接與之接觸,需帶膠皮手套,用鑷子等工具進行操作處理。整個內照射處理過程要遵守放射性同位素操作規程。

在用射線進行誘變處理時,為了提高誘變效率,經常采用改變處理條件或進行複合處理的辦法。改變處理條件包括把種子放在液氮中、純氧中,調節種子含水量等。複合處理是指植物材料在用射線處理外還采用其他因素處理,其中主要是用化學誘變劑。化學誘變劑是對植物有誘變作用的化學物質。大多化學誘變劑對人是有毒的,有的是致癌的。研究證明,射線與化學誘變劑複合處理可以得到明顯的效果,尤其是誘變因素組配得當,並采用適宜的劑量組合及處理方法,會獲得較好的育種效果。