我國部分地區家蠶軟化病病毒性狀鑒定本文原載《蠶業科學》，1983，9（3）： 156-159。作者： 胡雪芳王紅林錢元駿戴仁鳴孫玉昆
對從廣東、浙江及江蘇等地收集得到的7個家蠶軟化病病毒樣品，與本所濃核病毒（DNV）進行抗原性及病原性比較試驗，並鑒定了核酸性質。結果證明，從以上地區所收集的軟化病病毒，其抗原性、病原性均與本所濃核病毒相同，核酸均為單鏈DNA，因而確認都是濃核病毒。
一、緒言
我國與日本先後在1959年、1960年證明家蠶空頭性軟化病是由病毒引起的。以後，日本在軟化病病毒中又發現和分離了病毒大小不同以及抗原性、病原性不同的若幹病毒株。研究較多的為阪城株及伊那株，FV阪城株是典型的傳染性軟化病病毒（InfectionsflacherieVirus）簡稱IFV，屬於細小核糖核酸病毒科（Picornaviridae），為28±2nm的球狀病毒，核酸為單鏈RNA，寄生在蠶中腸杯形細胞的細胞質中，分類密碼為R／1∶2.4／29∶S／S∶I／o。FV伊那株現已證明為濃核病毒（DensonucleosisVirus）簡稱DNV〔1，2，3〕，分類上屬於細小病毒科（Parvovirus）濃核病毒屬（Densovirus），為20nm左右的球狀病毒，核酸為單鏈DNA，寄生在家蠶中腸圓筒形細胞的核中，它是與IFV完全不同的病毒，分類密碼為D／1∶1.7／28∶S／S∶I／o。此外還有古田株、鬆井株、姬野株。近期的工作證明古田株（SFV）基本上同DNV〔4，5〕，姬野株FV與IFV近緣〔5〕，對鬆井株FV性質的看法說法不一。
我國對軟化病病毒的性狀研究開展較晚。1979年，我們解決了軟化病病毒的生物純化問題〔6〕，為大量純化軟化病毒提供了方便，同年武漢病毒所對軟化病病毒的形態結構進行了初步研究。1980年，我們用硫酸銨鹽析法純化軟化病病毒獲得成功〔1〕，這一簡易方法的建立為大量純化病毒創造了條件。在此基礎上我們開展了軟化病病毒的血清學研究及其化學特性研究〔8〕，實驗證明，我們所研究的軟化病病毒是直徑約為20nm的球狀顆粒，核酸為單鏈DNA，分類上與日本伊那株相同，也是濃核病毒的一種。但關於我國廣大蠶區軟化病病毒的抗原性及病原性究竟有無差別？有沒有不同的株係？這些問題以往尚未深入研究過。自1980年起，我們向全國各省蠶研所及有關農業院校征集了家蠶軟化病病毒，連本室保留的DNV共八隻樣品，對這些樣品進行了抗原性和病原性比較試驗，並對其中六隻樣品的病毒核酸進行了分析鑒定，現將結果報告如下。
二、材料與方法
1. 病毒來源
本所保存的濃核病毒標號“本所DNV”，廣東的三隻樣品分別標為廣軟Ⅰ、廣軟Ⅱ、廣軟Ⅲ，浙江的兩隻樣品標號為浙軟81、浙軟82，來自滸關蠶專的二隻樣品標號為滸軟81、滸軟82。以上病毒均經蘇3·秋3×蘇4繼代後取組織幹保存備用，或用病蠶鮮腸經純化後製成病毒懸液備用。
2. 血清製備
純化後之本所DNV，每周對雄性家兔經耳靜脈注射一次，共注射3~4次，總劑量約20OD260，最後一次注射後10~15天頸動脈放血，製得的抗血清對流免疫電泳效價為1024〔7〕。
3. 抗原性測定
（1）中和試驗： 抗體用抗DNV血清1∶8稀釋。抗原用各地軟化病病毒1％腸幹研磨離心之上清液。中和時將上述抗體與抗原等量相混，置37℃環境中作用1小時，然後再稀釋5倍，使病毒濃度為0.1％組織液，給蘇3·秋3×蘇4二齡起蠶添食接種，另以同濃度未經中和的病毒作對照，飼養至四齡調查發病率，比較中和效果。