正文 附錄二 培養基配製(1 / 2)

1.牛肉膏蛋白腖培養基(培養細菌)

牛肉膏 3.0g

蛋白腖 10.0g

NaCl 5.0g

瓊脂 15.0~20.0g

水 1000mL

pH 7.2~7.4

0.11MPa,121.3℃滅菌20~30min。

2.澱粉瓊脂培養基(高氏1號培養基培養放線菌)

可溶性澱粉 20.0g

NaNO3 1.0g

NaCl 0.5g

K2HPO4 0.5g

MgSO4 0.5g

FeSO4 0.01g

瓊脂 20.0g

水 1000mL

pH 7.4~7.6

配製時,先用少量冷水,將澱粉調成糊狀,在火上加熱,邊攪拌邊加水及其他成分,溶化後,補足水分至1000mL。0.11MPa,121.3℃滅菌20~30min。

3.查氏培養基(培養黴菌)

NaNO3 2.0g

KH2PO4 1.0g

KCl 0.5g

MgSO4·7H2O 0.5g

FeSO4·7H2O 0.01g

蔗糖 30.0g

瓊脂 15~20g

水 1000mL

pH 自然

0.11MPa,121.3℃滅菌20~30min。

4.馬丁氏(Martin)瓊脂培養基(分離土壤真菌)

葡萄糖 10.0g

蛋白腖 5.0g

KH2PO4 1.0g

MgSO4 ·7H2O 0.5g

孟加拉紅(rose bengal) 33.4mg

瓊脂 15~20g

pH 自然

蒸餾水 1000mL

0.072 MPa,115℃滅菌30min。

5.複紅亞硫酸鈉培養基(遠藤氏培養基)

蛋白腖 10g

乳糖 10g

K2HPO4 3.5g

瓊脂 20~30g

蒸餾水 1000mL

無水亞硫酸鈉 5g左右

5%堿性複紅乙醇溶液 20mL

先將瓊脂加入900mL蒸餾水中,加熱溶解,再加入磷酸氫二鉀及蛋白腖,使之溶解,補足蒸餾水至1000mL,調pH至7.2~7.4。加入乳糖,混勻溶解後,115℃滅菌20min。稱取亞硫酸鈉置一無菌空試管中,加入無菌水少許使之溶解,再在水浴中煮沸10min後,立刻滴加於20mL 5%堿性複紅乙醇溶液中,直到深紅色褪成淡粉紅色為止。將此亞硫酸鈉與堿性複紅的混合液全部加至上述已滅菌的並仍保持溶化狀態的培養基中,充分混勻,倒平皿,放冰箱備用。貯存時間不宜超過2周。

6.伊紅美藍培養基(EMB培養基)

蛋白腖水瓊脂培養基 100mL

20%乳糖溶液 2mL

2%伊紅水溶液 2mL

0.5%美藍水溶液 1mL

將已滅菌的蛋白腖水瓊脂培養基(pH 7.6)加熱熔化,冷卻至60℃左右時,再把已滅菌的乳糖溶液、伊紅水溶液及美藍水溶液按上述量以無菌操作加入。搖勻後,立即倒平板。乳糖在高溫滅菌時易被破壞必須嚴格控製滅菌溫度,一般是0.072MPa,115℃滅菌20min。

7.乳糖蛋白腖培養液(“水的細菌學檢查”用)

蛋白腖 10g

牛肉膏 3g

乳糖 5g

NaCl 5g