2.8驗證試驗 煎煮3份金蕎麥藥液,煮沸時間均為5 min,分別與1 mmol·L-1 AgNO3溶液按1∶10的體積比在25 ℃條件下反應3.5 h,將混合溶液4 000 r·min-1離心15 min,取離心後的上清液13 000 r·min-1離心15 min,用蒸餾水洗滌沉澱3 次,再用適量蒸餾水溶解,超聲20 min得金蕎麥銀納米粒溶液,經檢測,3批樣品溶液在300~800 nm的吸收變動範圍小於3%,由結果可知該工藝穩定性、重複性良好。
2.9金蕎麥銀納米粒的TEM表征 取少量金蕎麥銀納米粒溶液,滴加到銅網上,幹燥後,用 Tecnai 12 型透射電鏡,觀察金蕎麥銀納米粒的外觀形態及粒徑分布。為了更直觀地反應金蕎麥銀納米粒的粒徑分布情況,對其透射電子顯微鏡圖進行分布統計。25 ℃下,金蕎麥提取液與1 mmol·L-1 AgNO3體積比為1∶10時還原製得的銀納米粒近球形,偶見三角形,粒徑範圍為6.69~30.63 nm,平均粒徑為18.98 nm,分散均勻,未發生團聚。銀納米粒黑色粒子外包裹有灰色物質,由紅外圖譜結果推測這種物質可能是鍵合在銀納米粒表麵的金蕎麥有效成分。
2.10金蕎麥銀納米粒的動態激光散射(DLS)表征 將樣品溶液經0.22 μm微孔濾膜過濾,用DLS測其粒徑分布及Zeta電位。銀納米粒平均粒徑為(27.15±2.6) nm,分散指數(PDI)為0.156,Zeta電位為(-34.3±3.2) mV。已知粒徑PDI越小粒子分散越均勻,Zeta電位絕對值越高體係越穩定,實驗結果中PDI小於0.2,Zeta電位-1處有明顯吸收,3 234.90 cm-1為νOH吸收峰,2 919.46 cm-1為νC-H吸收峰,1 608.48,1 435.57 cm-1為νC=C或νC=N吸收峰,1 074.27 cm-1為β=C-H吸收峰,598.89 cm-1為γC-H或γO-H吸收峰,這些吸收峰表明銀納米粒表麵可能含有黃酮類和萜類成分等[16-17]。由於銀納米粒表麵含有金蕎麥中的化學成分,這些成分分散銀納米粒,使銀納米粒不易團聚,表現出很好的穩定性。故本研究中金蕎麥提取液不僅是還原劑同時也是穩定劑 [18]。
2.13金蕎麥銀納米粒穩定性考察 將優化條件下所製金蕎麥銀納米粒常溫放置2個月,並分別測定其與當天所製備金蕎麥銀納米粒溶液及金蕎麥藥液三者在300~800 nm吸收情況,初步考察金蕎麥銀納米粒溶液的穩定性。所製銀納米粒常溫放置2月後,吸光度降低不超過2%,紫外-可見吸收穩定,表明以金蕎麥提取液為還原劑在優化條件下所製銀納米粒穩定性較好。
3討論
本文采用中藥金蕎麥提取液作為還原劑及穩定劑成功合成了銀納米粒,合成方法迅速高效、綠色安全、穩定可行。金蕎麥銀納米粒的成功製備,表明利用中藥製備銀納米粒的可行性。
經實驗測定銀納米粒製備前後金蕎麥藥液中多酚類物質含量由19.83%降低至4.79%,多酚類物質的含量降低75.8%,還原前後多酚類物質含量變化顯著,說明金蕎麥中多羥基化合物具有較好的還原能力可用於還原銀離子製備銀納米粒。中藥種類繁多,含有較多多羥基化合物的中藥可作為還原劑製備銀納米粒,本研究為今後更多中藥還原劑的發掘提供了參考。
實驗中可觀察到銀納米粒形成前後溶液顏色變化明顯,據文獻報道這主要是銀納米粒表麵等離子體共振的原因[15],所製備的銀納米粒多呈球狀,粒徑在6.69~30.63 nm,這是由於金蕎麥提取液中含有多種還原性成分,還原Ag+的速率不同,致形成的銀納米粒粒徑存在一定差異。
反應物質的量變會引起吸收峰位變化,當 AgNO3濃度不變,隨提取液量的增加吸收峰位由445 nm藍移到436 nm,這是由於金蕎麥提取液既為還原劑又是穩定劑,當其加入量增加時所形成的銀納米粒不易團聚,粒徑減小,因此等離子體共振吸收峰向短波方向移動。當金蕎麥提取液的用量不變,隨AgNO3的濃度增加吸收峰位由437 nm紅移到444 nm,這是由於穩定劑的量相對不足,形成的銀納米粒易團聚,粒徑增大,因此等離子體共振吸收峰向長波方向移動[19]。
據R M Gengan等[20]報道,利用具有抗腫瘤作用的合歡皮製備的銀納米粒具有很好的抗腫瘤作用,且對正常外周淋巴細胞無細胞毒性。本實驗紅外圖譜表明金蕎麥銀納米粒上包裹有金蕎麥化學成分,且中藥金蕎麥具有明顯抗腫瘤作用,因此金蕎麥銀納米粒是否具有協同抗腫瘤作用,有待進一步研究。
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