掌葉梁王茶莖皮的化學成分研究
化學
作者：楊青 張健 歐陽勝 葉文才 趙守訓 殷誌琦
[收稿日期] 2013-12-12
[基金項目] 國家自然科學基金項目（81001379）；江蘇省第九批“六大人才高峰”高層次人才項目（2012-YY-008）；天然藥物活性組分與藥效國家重點實驗室項目（ZJ11175）；江蘇省“青藍工程”項目
[通信作者] *殷誌琦，副教授，主要研究方向為天然產物活性成分，Tel：（025）86185371，E-mail
[作者簡介] 楊青，碩士研究生，E-mail
[摘要] 利用各種現代色譜方法從掌葉梁王茶Nothopanax delavayi莖皮70%乙醇提取物中分離得到11個化合物，通過波譜技術和理化性質鑒定它們的結構為三對節酸3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯苷（1），三對節酸3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖酯苷（2），三對節酸（3），三對節酸3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（4），三對節酸3-O-β-（2′，4′-O-二乙酰基）-D-吡喃木糖-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖酯苷（5），三對節酸3-O-α-（4′-O-乙酰基）-L-吡喃阿拉伯糖-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖酯苷（6），三對節酸3-O-α-（2′-O-乙酰基）-L-吡喃阿拉伯糖-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖酯苷（7），三對節酸3-O-β-D-吡喃木糖-28-O-α-L-吡喃鼠李糖-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖酯苷（8），原兒茶酸（9），咖啡酸乙酯（10），咖啡酸酐（11）。其中化合物3～4，9～11為首次從梁王茶屬植物中分離得到，化合物5～8為首次從該植物中分離得到。
[關鍵詞] 掌葉梁王茶；三萜皂苷；化學成分；結構鑒定
梁王茶屬Nothopanax植物約有15種，主要分布於大洋洲，我國僅有2種，即掌葉梁王茶Nothopanax delavayi （Franch.） Harms ex Diels和異葉梁王茶N. davidii （Franch.） Harms ex Diels。掌葉梁王茶為民間草藥，其莖皮有清熱消炎，生津止瀉之效，主治喉炎，分布於貴州，雲南，生於海拔1 600～2 500 m的森林或灌木叢中[1]。梁王茶新鮮植株有芳香氣味，胡英傑等[2]對掌葉梁王茶N. delavayi精油的化學成分進行了研究。現代藥理研究表明，掌葉梁王茶具有較好的鎮痛作用[3]。另據報道，梁王茶多糖具有顯著的消炎、抗衰老等功效，並且具有雙向免疫調節作用，有學者[4]對梁王茶多糖的提取工藝路線及其抗氧化活性進行了研究。為深入發掘掌葉梁王茶化學成分內涵，該文對掌葉梁王茶開展化學成分研究，從中分離並鑒定了11個化合物，包括3個苯環類和8個皂苷類化合物，其中化合物3～4，9～11為首次從梁王茶屬植物中分離得到，化合物5～8為首次從該植物中分離得到。
1 材料
熔點用X-4 型熔點測定儀測定（溫度計未校正）；核磁用Bruker Avance-500 和Avance-300 型核磁共振儀測定；柱色譜矽膠100～200，200～300，300～400目為青島海洋化工廠產品；薄層色譜矽膠 GF254 為煙台化工研究所產品；Sephadex LH-20為美國Pharmacia公司產品；MCI HP-20為日本三菱化學公司產品；ODS（C-18）為Merk公司產品；Pre-HPLC為Waters公司製備型HPLC係列產品；其他試劑均為分析純。
掌葉梁王茶藥材購買於2012年3月，產地為雲南，經中國藥科大學秦民堅教授鑒定為掌葉梁王茶N. delavayi的莖皮，標本保存於中國藥科大學天然藥物化學教研室。
2 提取與分離
幹燥的掌葉梁王茶莖皮20.0 kg，70%乙醇加熱回流提取3次，每次分別為2，2，1.5 h，提取液減壓濃縮至無醇味，加適量水稀釋後依次用乙酸乙酯，水飽和的正丁醇萃取，分別回收溶劑後得乙酸乙酯部位（230 g）和正丁醇部位（920 g）。
取乙酸乙酯部位浸膏230 g，經矽膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇（100∶0～0∶100）梯度洗脫，每份500 mL，TLC檢識，合並得到7個流分（Fr.1～7）。Fr.3經Sephadex LH-20凝膠柱色譜以氯仿-甲醇（1∶1）洗脫，反複重結晶，得化合物3（25 mg）。Fr.4依次經Sephadex LH-20凝膠柱色譜以氯仿-甲醇（1∶1）洗脫，再經Sephadex LH-20柱色譜純甲醇洗脫和製備液相色譜（35%甲醇-水+0.05%TFA）分離純化，得到化合物9（15 mg），11（20 mg）。
取正丁醇部位浸膏700 g經大孔吸附樹脂柱色譜，依次用水，10%，25%，60%，95%乙醇-水洗脫，其中60%乙醇洗脫部分（220 g）經矽膠柱色譜，以氯仿-甲醇-水梯度洗脫（75∶25∶10～70∶30∶10～65∶35∶10～0∶100∶0），TLC檢識，合並得7個流分（Fr.1～7）。Fr.1經矽膠柱色譜以氯仿-甲醇-水梯度洗脫，合並流分1-3，經ODS柱色譜以甲醇-水梯度洗脫，反複Sephadex LH-20柱色譜以甲醇洗脫純化，得化合物10（5 mg）；合並流分10-19，經矽膠柱色譜以氯仿-甲醇（15∶1～1∶1）梯度洗脫，甲醇反複重結晶，得化合物4（100 mg）；合並流分23-31，經反複Sephadex LH-20柱色譜以甲醇，甲醇-水純化，反複ODS柱色譜以甲醇-水梯度洗脫，得化合物1（20 mg）。Fr.3經矽膠柱色譜，以氯仿-甲醇-水梯度洗脫和製備液相色譜（56%甲醇-水+0.01%TFA），反複Sephadex LH-20柱色譜以甲醇洗脫純化，得到化合物5（15 mg），6（15 mg），7（10 mg）。Fr.5經矽膠柱色譜氯仿-甲醇-水（65∶35∶10）等度洗脫，合並其中流分26～63，回收溶劑後用適量甲醇完全溶解，加8倍量丙酮靜置，白色沉澱物經反複重結晶得化合物2（1.0 g）；合並流分64～79，反複ODS柱色譜以乙腈-水（15∶85～100∶0）梯度洗脫得化合物8（10 mg）。
3 結構鑒定
化合物 1 白色粉末（甲醇），mp 220～222 ℃，Liebermann-Burchard和Molish反應均陽性，香草醛-濃硫酸顯紫紅色。1H-NMR（C5D5N，300 MHz） δ：6.32（1H，d，J=7.9 Hz，C28-Glc-H-1），5.48（1H，m，H-12），4.75（1H，d，J=7.0 Hz，C3-Ara-H-1），1.43，1.24，1.24，1.09，0.94，0.86（各3H，s，-Me×6）；13C-NMR（C5D5N，75 MHz）。以上數據與文獻[5]報道的liangwanosideⅠ數據一致，故化合物1鑒定為三對節酸3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯苷。