1.2 方法
1.2.1 EV71 RNA檢測 所有患兒在入院24 h進行EV71 RNA檢測：取患兒外周血3 mL，采用逆轉錄酶-聚合酶鏈式反應檢測，熒光定量PCR儀由Applied Biosystems公司提供，試劑盒由上海吉瑪製藥技術有限公司提供。
1.2.2 神經內分泌指標檢測 神經內分泌指標包括皮質醇（COR）和β-內啡肽（β-EP），其中COR采用化學發光分析法進行檢測，試劑盒購至上海研域生物科技有限公司；β-EP采用放射免疫吸附法檢測，試劑盒購至上海信然生物科技有限公司；所有操作均參考試劑盒說明書。
1.2.3 免疫學指標檢測 免疫學指標包括免疫球蛋白、淋巴細胞亞群、B淋巴細胞、自然殺傷細胞（NK細胞）、白細胞介素-13（IL-13）、幹擾素-γ（IFN-γ）；其中IL-13、IFN-γ采用化學發光分析法進行檢測，試劑盒購至上海研域生物科技有限公司；免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）采用單向瓊脂擴散試驗檢測，試劑盒由上海源葉生物科技有限公司提供；外周血T細胞亞群、B淋巴細胞、NK細胞用BD FACSAria II流式細胞儀（BD公司）進行檢測。
1.3 統計學方法
采用SPSS19.0統計學軟件，計量資料用（x±s）表示，若方差齊采用方差分析，方差不齊采用秩和檢驗。P
2 結果
2.1 各組神經內分泌指標檢測結果比較
A、B、C三組COR、β-EP水平顯著高於對照組，隨著病情的加重，COR、β-EP水平逐漸升高，組間相比差異具有統計學意義（P
2.2 各組免疫球蛋白水平比較
B組、C組IgG、IgA、IgM水平顯著高於對照組；而A組與對照組各免疫球蛋白水平相比差異無統計學意義（P>0.05）；隨著病情的加重，IgG、IgA、IgM水平顯著升高，差異有統計學意義（P
2.3 各組外周血T細胞亞群、B淋巴細胞、NK細胞水平比較
B組、C組CD3+、CD4+、CD8+等T細胞亞群及B淋巴細胞（CD16+ CD56+）水平顯著低於對照組，而A組與對照組T細胞亞群水平相比差異無統計學意義（P>0.05）；隨著疾病的加重，CD3+、CD4+、CD8+、CD16+ CD56+顯著降低，差異有統計學意義（P
2.4 各組IL-13、IFN-γ免疫指標水平比較
A、B、C三組IL-13、IFN-γ水平顯著高於對照組，隨著病情的加重，IL-13、IFN-γ水平逐漸升高，差異有統計學意義（P
3 討論
手足口病是由腸道內病毒感染所導致的傳染性疾病，好發於7歲以下的小兒；手足口病病原主要以柯薩奇病毒A和腸道病毒71型（EV71）為主[4]，其中EV71病毒存在嗜神經性，多數患兒合並有神經係統損害症狀。患兒在早期主要表現為咽痛、高熱、水皰等，均屬於普通感染；少數患兒繼發性出現意識障礙、昏迷、腦膜刺激征時則屬於重症手足口病。由於重症手足口病的危害較大，因此及時評估患者的病情並采取積極的治療措施對提高患兒的療效、改善預後具有重要的意義。
大量研究顯示[5，6]，感染EV71病毒所致手足口病會使患兒的應激反應增強，其中一個重要的表現是介導COR的分泌。本研究中隨著病情的加重，COR水平逐漸升高，危重型患兒體內COR水平高出正常值的15倍。這是因為，COR能有效增強機體對外界刺激的防禦作用，但是當病情沒有得到有效控製，應激反應過度時會導致COR過度分泌，進而引起血糖升高、腦組織缺血、神經病變等[7]。由於EV71病毒具有一定的嗜神經性，因此患兒的神經係統會出現損害；當神經係統損害時會刺激腦垂體釋放大量的β-EP[8]，部分β-EP會進入血液，病情越重血漿β-EP水平越高。本研究中危重患兒血漿β-EP水平最高，普通型最低，但均顯著高於對照組。因此我們推測手足口病患者呼吸抑製、肺水腫等均是由β-EP升高所致，這也證實β-EP可以作為評價病情的指標之一。
許紅梅[9]對EV71感染後患兒的免疫功能進行研究後發現，免疫性損傷是導致手足口病的主要原因之一。在感染初期，機體原有的免疫係統對EV71病毒起到抵抗作用；隨著病情的加重，患兒T淋巴細胞、NK細胞、B淋巴細胞發生變化，導致機體內出現大量炎症因子和抗體。本研究中，B組、C組IgG、IgA、IgM水平顯著高於對照組；而A組與對照組各免疫球蛋白水平相比差異無統計學意義；隨著病情的加重，IgG、IgA、IgM水平顯著升高，說明感染重症期患兒體內體液免疫功能亢進，產生大量免疫球蛋白保護機體；但是免疫亢進又會在一定程度上引起免疫損傷，致使患兒病情進一步轉化為危重症。國外研究亦證實手足口病是一種自身免疫性疾病，本研究結果也證實此結論。這一結果也提示免疫球蛋白對重型和危重型手足口病患兒的檢測價值更高。另外B組、C組T細胞亞群、B淋巴細胞水平顯著低於對照組，A組與對照組無明顯差異；A組、B組、C組NK細胞水平均顯著低於對照組，隨著病情的加重NK細胞水平顯著升高。曾慧慧[10]報道稱手足口病患兒在病毒感染下激活體液免疫和細胞免疫，其中體液免疫被過度激活，而細胞免疫則激活不足。這一結論被上述結果證實，提示手足口病患兒存在細胞免疫功能低下，可以將細胞免疫指標作為診斷病情的參考指標之一；其中B淋巴細胞、NK細胞可以作為手足口病的評價指標，而T細胞亞群對重症型患兒評價的價值更高；與劉亞敏[11]報道結論一致。