毛蕊異黃酮葡萄糖苷對升麻素苷及其苷元大鼠體內藥代動力學特征的影響研究
藥代動力學
作者：趙曉莉 劉玲 狄留慶 李俊鬆 康安
[摘要]為了探索黃芪-防風配伍用藥的科學內涵，實驗建立了利用UPLC-MS/MS同時測定大鼠血漿中升麻素苷、升麻素的分析方法，研究黃芪中主要活性成分毛蕊異黃酮葡萄糖苷對防風中主要活性成分升麻素苷及其苷元大鼠體內藥代動力學特征的影響。取雄性SD大鼠分為2組，每組6隻，分別灌胃給藥升麻素苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷-升麻素苷，於不同時間點眼眶取血，采用UPLC-MS/MS方法，檢測血漿中升麻素苷及其苷元升麻素的含量，使用DAS3.2.4軟件處理數據並分析。該實驗建立的UPLC-MS/MS方法快速、準確和靈敏，可用於大鼠血漿中升麻素苷、升麻素的同時測定，色譜柱為BEHC18（2.1mm×100mm，1.7μm），流動相為乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脫，流速為0.3mL·min-1，采用電噴霧電離源（ESI），多反應離子監測（MRM）掃描方式。結果表明，與升麻素苷組相比，毛蕊異黃酮葡萄糖苷-升麻素苷組中升麻素苷的AUC0-t，AUC0-∞顯著性提高（P
[關鍵詞]升麻素苷；升麻素；毛蕊異黃酮葡萄糖苷；藥代動力學
[收稿日期]2014-07-17
[基金項目]國家自然科學基金青年基金項目（81102825）
[通信作者]*趙曉莉，副研究員，博士，碩士生導師，研究方向為中藥新劑型新技術應用與評價研究，Tel：（025）85811230，E-mail
《本草衍義》雲：“黃芪、防風，世多相須而用”。黃芪作為傳統的補益類中藥，具有補氣升陽、益衛固表、利水退腫之功；防風具有解表散風、勝濕止痛、祛風止痙之效。二者配伍可驅邪扶正，在治療虛人外感、表虛自汗等多種病症中均有良好療效，曆代醫著方劑中對黃芪、防風的配伍使用均有記載[1-3]，現代調查研究表明，黃芪、防風在中醫臨床配伍使用的頻率仍較高[4-5]。現代藥效學實驗研究表明黃芪、防風配伍後，在增強免疫、抗氧化等生物效應上具有顯著的協同增效作用[6-7]。以升麻素苷、升麻素等為代表的色原酮類成分，是防風發揮藥效作用的主要物質基礎[8]，且升麻素苷在體內極易轉化為其苷元升麻素[9]。毛蕊異黃酮葡萄糖苷及其苷元是黃芪中主要的黃酮類活性成分。本課題組在前期進行了黃芪、防風飲片配伍前後藥代動學力學參數的比較研究，結果提示藥對配伍後兩藥的主要活性成分的藥代動力學參數發生明顯變化，各自的生物利用度有所提高。本實驗選取前期實驗中藥代動力學特征變化顯著的升麻素苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷為研究對象，通過大鼠口服升麻素苷與毛蕊異黃酮葡萄糖苷配伍升麻素苷後升麻素苷及其苷元升麻素血藥濃度-時間曲線及其藥動學參數的比較分析，進一步揭示黃芪-防風配伍的科學內涵。
1材料
1.1藥材、對照品和試劑
橙皮苷對照品（批號110721-201115）、升麻素苷對照品（批號111522-201008）、升麻素對照品（批號111710-200501）均購於中國食品藥品檢定研究院；毛蕊異黃酮葡萄糖苷原料藥（批號20120425，純度為98%）購於上海源葉生物科技有限公司，升麻素苷原料藥（純度為98%）（南京澤郎醫藥科技有限公司）；甲醇（色譜純，德國Merck公司）、乙腈（色譜純，德國Merck公司），其餘溶劑均為分析純，水為密理博超純水儀製備的超純水。
1.2動物
清潔級SD大鼠，全雄，體重220～250g。合格證號SCXK（蘇）2008-5033。
1.3儀器
超高效液相色譜-TQD質譜聯用儀（ACQUITY係統，美國Waters公司），Mass LynxV4.1工作站。BP211D型電子分析天平（德國Sartorius公司），Micro CL21R微量離心機（美國賽默飛世爾科技公司），微量移液器（德國Eppendorf公司），Vortex-Genie2渦旋振蕩器，DCY-24G可調式濃縮儀（青島海科儀器有限公司），默克密理博Synergy超純水儀（德國Merck公司）。
2方法與結果
2.1對照品溶液的製備
2.1.1係列濃度對照品溶液的配製分別取幹燥至恒重的升麻素苷、升麻素對照品適量，精密稱定，加入甲醇溶解並定容至刻度，搖勻，製得升麻素苷、升麻素質量濃度分別為9.6，384mg·L-1的混合對照品儲備液，密封後置4℃冰箱冷藏，待用時用甲醇稀釋升麻素苷、升麻素至0.48，19.2mg·L-1，作為標準曲線的第1個點，再逐倍稀釋成係列濃度的混合對照品溶液。