miR—21聯合CA153、CA125、CA199檢測在乳腺癌早期診斷中的價值研究
檢驗與臨床
作者：李蘇霞 郭貴龍 陳素秀 蔣亦燕 曾謙
[摘要] 目的研究miR-21聯合3C腫瘤標誌物檢測在乳腺癌患者診斷中的應用價值。方法選擇乳腺癌患者作為觀察組、乳腺良性疾病患者作為良性對照組、健康體檢者作為健康對照組，檢測外周血中CA125、CA199、CA153與miR-21的含量。結果觀察組患者miR-21、CA125、CA153、CA199水平明顯高於良性對照組和健康對照組，並且呈現出TNMⅠ期>Ⅱ期>Ⅲ期>Ⅳ期；四項指標聯合檢查靈敏度87.5%、特異度94.5%，均高於四項指標單獨檢測。結論 miR-21參與了乳腺癌發生的生理、病理過程，可以作為乳腺癌早期診斷的腫瘤標誌物，聯合CA125、CA199和CA153檢查能提高乳腺癌診斷的靈敏度和特異度，具有積極的臨床價值。
[關鍵詞] 乳腺癌；腫瘤標誌物；miR-21
[中圖分類號] R737.9 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2013）01-0067-03
乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤，早期診斷可以為患者爭取保乳手術的機會，對於提高生活質量和社會功能具有積極意義。近年來，腫瘤標誌物逐漸成為乳腺癌領域的研究熱點，3C腫瘤標誌物的檢測研究與報道很多，但對於miRNA的研究很少。越來越多的證據表明，miRNA的分析可以用於惡性腫瘤的早期診斷、預後判斷和治療[1]。為了闡述乳腺癌組織中miR-21表達的差異性，本文以miR-21聯合CA153、CA125、CA199 3C標誌物檢測的方式，探討miR-21作為乳腺癌腫瘤標誌物早期診斷的可能性及應用價值。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選擇2007年10月30日～2011年10月30日期間在我院就診的120例乳腺癌患者作為本研究的觀察組，年齡33～51歲，平均（41.42±5.62）歲。入選標準：①有乳頭溢液的臨床症狀，通過體格檢查發現乳房腫塊；②B超、鉬靶X線發現乳腺腫塊；③乳腺結節穿刺活檢術確診為乳腺癌。收住院後，根據活檢結果選擇保乳手術、乳腺癌改良根治術以及化療後保乳手術等不同治療方案。選擇100例同期在我院就診的乳腺良性疾病患者作為良性對照組，年齡30～50歲，平均（40.17±6.05）歲；選擇100名同期在我院體檢的健康女性作為健康對照組，年齡30～50歲，平均（41.58±5.87）歲。三組受試者的年齡、全身情況等差異均無統計學意義（P > 0.05），具有可比性。
1.2 檢查方法
觀察組和良性對照組在入院時采集靜脈外周血5 mL、健康對照組在體檢時采集靜脈外周血5 mL，加入EDTA抗凝後於4℃、3 000 rpm離心10 min，收集上清保存於-80℃待檢。采用Roche Elecsys 2010全自動電化學發光儀及相應試劑盒進行檢測。首先配製濃度梯度的標準品並於全自動電化學發光儀上檢測發光強度，繪製發光強度-樣本濃度標準曲線。然後檢測患者外周血樣本的發光強度，代入標準曲線後計算腫瘤標誌物的含量。
1.3 判斷標準
按照下列標準判斷檢查結果為陽性：CA153>25 U/mL、CA125>35 U/mL、CA199>35 U/mL。miR-21以snRNA的量為內參照，求得miR-21的相對量，計算公式為：F=2-△△Ct，△△Ct=（Ct miR-21/155-CtU6ncRNA）腫瘤/血清-（CtmiR-21/155-CtU6ncRNA）[2]四項指標聯合檢查，當有3項或以上為陰性即判斷為陰性、當有3項或以上為陽性即判斷為陽性。靈敏度=真陽性人數/（真陽性人數+假陰性人數）×100%，特異度=真陰性人數/（真陰性人數+假陽性人數）×100%。
1.4 統計學方法
采用SPSS 18.0軟件對上述數據進行統計學分析，計量資料采用方差分析，計數資料采用χ2檢驗，P Ⅱ期>Ⅲ期>Ⅳ期（P Ⅱ期>Ⅲ期>Ⅳ期，說明這四項指標與乳腺癌的發病密切相關。
CA125最初被作為卵巢癌的特異性標誌物，與卵巢癌的發病、治療和預後密切相關。但是隨著近年來研究的深入，也發現它可以作為一種廣譜的標誌物，在82.2%卵巢癌、58%胰腺癌、32%肺癌及其他非婦科腫瘤患者中均有不同程度的升高[8]。CA153是乳腺細胞上皮表麵糖蛋白的變異體，是近年來研究發現的乳腺癌特異性標誌物，在100%晚期乳腺癌患者以及75%早中期乳腺癌患者中均發生明顯升高[9]。Iorio等2005年首次從乳腺癌組織篩選出miRNA異常表達譜，發現miRNA的表達異常與乳腺癌的臨床病理特征密切相關；Tavazoie等[10]發現miRNA的異常表達密切相關於乳腺癌的遠處轉移。本研究中miR-21在不同TNM分期中有較大差異性表現，與文獻報道基本一致[11]。但是，由於上述腫瘤標誌物在其他疾病和健康人群中均會發生不同程度的升高，因此，單獨檢測某一糖蛋白抗原會造成較高的假陽性率，對於疾病的早期發現和診斷並無明顯意義。為了進一步探尋早期發現和診斷乳腺癌的方法，我們比較了上述指標的靈敏度和特異度。由結果可以看出，CA125、CA153、CA199、miR-21四項指標聯合檢查靈敏度87.5%、特異度94.5%，均高於四項指標的單獨檢測。