祁連圓柏葉乙醇提取物揮發性成分GC—MS分析
技術與方法
作者：王瑋 汪濤 王索安
[摘要] 目的采用氣相色譜-離子肼質譜聯用法測定分離祁連圓柏葉中乙醇提取物。方法用70%乙醇常溫浸漬提取祁連圓柏葉中成分，用氣相色譜-離子肼質譜儀對所得的祁連圓柏葉浸膏進行鑒定分析，色譜圖用麵積歸一化法測定組分的相對百分含量。結果所得的質譜圖采用去卷積化分析並在 NIST 98標準圖譜庫中比對檢索化合物，共鑒定了12個組分，按麵積歸一化法計算，其峰麵積比重占揮發性成分的90%。結論通過采用自動質譜退卷積定性係統（AMDIS）處理數據，增加對目標成分定性的準確性，提高色譜峰純度，從而提高了定性的準確性。
[關鍵詞] 氣相色譜-離子肼質譜；祁連圓柏；揮發性成分；麵積歸一化法；AMDIS
[中圖分類號] R284 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2013）01-0070-02
祁連圓柏（Juniperus Przewalskii Kom）[1，2]為常綠喬木，性味苦澀、微寒，可用於治療咯血、尿血、便血等，是一種常用藏藥的藥源植物。近年來有研究發現[3]，祁連圓柏種子及樹葉中均含有揮發性的二帖類成分，藥材氣味芳香，對女性卵巢癌有較好的抑製效果。另外王索安等[4]研究發現祁連圓柏提取物對人胃癌細胞SGC-7901細胞具有明顯的增值抑製及誘導凋亡作用。本實驗采用70%乙醇提取祁連圓柏葉子中的有效成分，采用氣相色譜結合質譜分析祁連圓柏葉子中的揮發性物質，並結合標準質譜圖譜庫NIST98搜索並初步分析其中的成分，並希望通過初步的成分分析，為以後的有效成分分離確定及藥效學工作打下基礎。
1 材料與方法
1.1 材料
Finnigam Innigam Trace GC Ultra氣相色譜儀，Finnigam Polaris Q 離子肼質譜檢測器、Dikma Cp-sil 5CB-MS FS（30 m×0.25 mm ID×0.25 μm df）毛細管氣相色譜柱，Thermo AS 3000自動進樣器。祁連圓柏葉子粉末藥材采自青海甘肅（由浙江醫學高等專科學校藥學係天然藥物實驗室鄧茂芳副教授鑒定），其他溶劑（乙醇、三氯甲烷、石油醚）均為分析純。
1.2 方法
1.2.1 供試液提取及處理稱取祁連圓柏幹燥藥材葉子粉末200 g，置500 mL圓底燒瓶中，先加入適量石油醚浸提至無色，再用70%乙醇600 mL，常溫浸漬3～4次至無色。浸漬液紗布過濾後，濾液用旋轉蒸發儀揮發幹淨，得浸膏。稱取約100 mg 浸膏用2 mL三氯甲烷溶解得供試液，備用。
1.2.2 GC-MS條件毛細管氣相色譜柱Restek DB-5，載氣：高純氦氣，流速1.0 mL·min-1，進樣口溫度：300℃，接口溫度：280 ℃，離子源溫度200 ℃，進樣方式：不分流進樣，柱程序升溫：初溫80℃，保持1 min後，以5 ℃·min-1的速率升溫至200 ℃，保持15 min。進樣量為1 μL。從進樣5 min開始質譜以全掃描方式檢測，掃描範圍：（33～420） m/z，電離方式為EI，電子轟擊能量為70 eV，倍增電壓1300 V。