牛奶中抗生素殘留及其檢測方法研究
隨著抗生素在乳畜飼養業中的廣泛應用，牛奶中抗生素殘留問題日趨受到國際社會的重視。對此，檢測技術也迅速發展，以尋求簡便、快速、準確、敏感性高的檢測方法滿足日趨嚴格的殘留限量的要求，保障人們飲用牛奶的衛生和安全。
1牛奶中抗生素殘留的來源及其危害
1.1牛奶中抗生素殘留的來源
一般認為，對泌乳牛用藥不當或不注意安全時間是牛乳中抗生素殘留的重要因素，尤其是使用乳房灌注法治療乳腺炎時，易造成牛乳中抗生素殘留。隨著畜牧業的發展，在牛飼料中添加飼料添加劑已十分廣泛，其中含有一定比例的抗生素，主要作用是預防疾病的發生，這也是牛乳抗生素殘留重要原因。此外，在高溫季節，一些不法交奶戶為防止乳的酸敗，往往向牛乳中摻雜各種抗生素，這也是乳中抗生素殘留的一個來源。1983年，Egan調查表明，重用經抗生素治療的乳牛用過的擠乳器給正常乳中擠乳，可使正常牛的乳中殘留抗生素，於是他指出：擠乳是乳中抗生素淺留的另一個來源。
1.2牛奶中抗生素殘留的危害
牛奶是老少皆宜的營養品，牛奶中若含有抗生素，對長期飲用者來說無疑是等於長期服用小劑量的抗生素，對抗生素有過敏體質的人服用殘留抗生素的乳後會發生過敏反應。即使是正常飲用者，體內的某些條件性致病菌易產生耐藥性，一旦患者再用同種抗生素治療很難奏效。抗生素是奶牛場治療乳房炎的常規藥物。由於長期大量使用抗生素，使耐藥菌株增加，一些乳房炎病例變得難以用常規方法治愈。這又促使臨診獸醫在治療過程中加大抗生素的用量。此外，牛奶中抗生素殘留會影響奶製品的品質，如果用含抗生素的奶做酸奶或乳酪等，則殘留在其中的抗生素會抑製細菌的發酵，使產量和質量降低。因此市場不允許出售抗生素殘留過量的牛奶，這樣也造成牛奶生產者的經濟損失。
2牛奶中的抗生素殘留檢測方法研究進展
2.1微生物檢測法
微生物檢測法是應用較廣泛的方法，如紙片法、TTC法等等，因其測定原理基於抗生素對微生物的生理機能、代謝的抑製作用，因而與臨床應用的要求一致，但其測定時間長且結果誤差較大。目前趨向靈敏、準確、簡便、快速的微生物檢測方法研究，如酶標抗體檢測法等。
2.1.l紙片法
紙片法，即PD法（Paper Disc）。將一吸滿受檢乳樣的濾紙圓片放入一接種枯草杆菌的瓊脂平皿上，並放入一含有標準抗生素的陽性對照圓片。將陪替氏培養皿在 32℃下培養17－ 24h，然後觀察有無抑菌圈，若要判定結果是否為真陽性，則需將乳樣在82℃下加熱2－3min，冷卻，再重複試驗。該方法對奶樣中青黴素殘留的檢測限可達0.0l IU/ml。崗田雪南（1986）應用PD法調查日本島根縣540份生乳，陽性55份（l0.2％）；並指出乳中的一些抗菌物質如溶菌酶、乳膽鐵質等等影響試驗結果。而嗜熱脂肪杆菌紙片檢測法僅用於檢測奶樣中β-內酰胺類抗生素，並能暗示是否還存在其它抑菌物質，檢測限可達0.008IU/ml以下。一般在4h內即可獲得有關乳中是否還存在β-內酰胺抗生素殘留的結果。
2.1.2 TTC法
TTC，即氯化三苯基四氮唑（ tripheye tetrazolium chloride），這是目前我國食品衛生標準中規定的檢查牛乳中抗生素殘留的檢測方法（GB5409—85）。如果牛乳中有抗生素存在，當乳中加入菌種（嗜熱鏈球菌）經培養後，菌種不增殖，此時加入的TTC指示劑不發生還原反應，所以仍呈無色狀態；如果沒有抗生素存在，則加入菌種即行增殖，TTC還原變成紅色，使樣品染成紅色。周樹南采用TTC法調查了江蘇省8市10個牧場生奶、消毒牛奶和奶粉中抗生素殘留情況，生奶陽性率3.6％，消毒牛奶11.4％，奶粉39.58％。1991年，李權超用TTC法檢測長春市鮮牛奶中抗生素殘留情況，結果陽性率3.3％，可疑率18.3％。
此外，王春奕等用圓盤法對西寧市消毒鮮牛奶中抗生素殘留調查。實驗結果表明檢測的5批25份市售消毒鮮牛奶中抗生素殘留質量分數在1.5×10-9以上，超過了世界衛生組織（WHO）和聯合國糧農組織（FAO）規定的奶中青黴素含量為0的標準。並認為這可能與飼料中添加的抗生素過量和獸醫臨床上大劑量、長期使用抗生素有關。
2.2理化檢測法
理化檢測方法是利用抗生素分子中的基團所具有的特殊反應或性質來測定其含量，如高效液相色譜法、氣相色譜法、比色法、熒光分光光度法等等，能進行定性、定量和藥物鑒定，敏感性較高，但有的檢測程序較複雜，有的檢測費用較高。
2.2.l高效液相色譜
高效液相色譜是目前廣泛應用的一種理化檢測方法，它引入了氣相色譜理論，在技術上采用了高壓泵，高效固定相和高靈敏度檢測器，實現了分離速度快、效率高和操作自動化。高效液相色譜法測定牛奶中的藥物殘留都要經曆樣品處理（包括樣品的提取、脫蛋白、離心、層析柱淨化、衍生化等步驟）、殘留藥物的分離和殘留藥物的檢測。