華南木薑子的化學成分研究
化學
作者：薑明 林生 郭慶蘭 江誌波 王素娟 楊永春 林鵬程
[摘要]通過大孔吸附樹脂、MCI樹脂、正相矽膠、Sephadex LH，20、製備薄層色譜和反相HPLC等多種色譜分離方法相結合，從華南木薑子樹枝乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分離得到11個化合物，分別為N，反式，3，4，亞甲二氧基肉桂酰基，3，甲氧基酪胺（ 1），N，反式對香豆酰基，3，O，甲基多巴胺（ 2），N，順式對香豆酰基，3，O，甲基多巴胺（ 3），（+），芝麻素（4），（+），鬆脂素（ 5），4，4′，二羥基，3，3，二甲氧基木脂烷，7，酮（ 6），4，羥基，3，5′，二甲氧基，4′，7，環氧，8，3′，新木脂烷，9，9′，二醇（ 7），苯甲酸（ 8），對羥基苯甲酸乙酯（ 9），對羥基苯甲醛（ 10）和4，羥基，3，甲氧基苄醇（ 11）。化合物 1為一新化合物，化合物 2～11均為首次從該植物中分離得到。
[關鍵詞]樟科；華南木薑子；化學成分；N，反式，3，4，亞甲二氧基肉桂酰基，3，甲氧基酪胺
樟科Lauraceae木薑子屬Litsea植物全世界約有200餘種，在我國約有72種18變種和3變型，是我國樟科中種類較多，分布較廣的屬之一[1]。本屬植物入藥的達17種，如山雞椒Litsea cubeba[2]，楊葉木薑子L. populifoliu，木薑子L. pungens，宜昌木薑子L. ichangensis和豺皮樟L. rotundifolia[3]。華南木薑子L. greenmaniana多生於山穀雜木林中，海拔1 200 m以下，在我國的廣東、廣西、福建分布較廣[4]。國內外文獻未見華南木薑子藥理活性和化學成分的研究報道。為了深入研究華南木薑子中的活性成分，對華南木薑子樹枝的化學成分進行了研究，從其95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分離得到了11個化合物（ 1～11），其中化合物 1為一新化合物。
1 材料
Micromass Auto spc，Ultima ETOF質譜儀（美國Micromass公司），Mercury，300，Inova，500及SYS，600型核磁共振光譜儀（美國Varian公司），Sq 16x（ISCO），combi Flash，RP，C18（40～60 μm，Micron Silicag Gel）組合閃式色譜儀（Isco公司），Agilent HP 1100型高效液相色譜儀，RP，C18（5 μm，半製備型）（Agilent公司），羥丙基葡聚糖凝膠Sephadex LH，20（Amersham Biosciences），色譜用矽膠和矽膠預製板（青島海洋化工集團公司）。所用試劑若無特別說明均購自北京化工廠，級別為分析純或色譜純。
華南木薑子樹枝於2006年8月采自廣西大瑤山，由廣西林業局龍光日工程師鑒定為華南木薑子L. greenmaniana，標本現存於中國醫學科學院藥物研究所植物標本室（YG06010）。
2 提取分離
幹燥的華南木薑子枝1.5 kg ，粉碎後用95%乙醇浸泡48 h，回流提取3次，每次3 h，提取液減壓濃縮得浸膏94.4 g。將浸膏分散於500 mL水中，用乙酸乙酯（1：1）萃取5次，萃取液合並濃縮，得乙酸乙酯部位（49.0 g）和水部位（12.3 g）。乙酸乙酯相部位經矽膠柱色譜分離，用氯仿，甲醇（100：1～0：100）梯度洗脫，洗脫液經薄層色譜檢測，合並相似組分，回收溶劑得到A～K共12個組分。組分A中有無色針晶析出，經不同的溶劑洗滌，得化合物 8（10 mg）。A組分母液，經Sephadex LH，20柱色譜，石油醚，氯仿，甲醇（5：5：1）洗脫，洗脫液經薄層色譜檢測，合並相似組分，回收溶劑得亞組分A1～A5。A1經製備薄層色譜（氯仿，甲醇 50：1）得化合物 11（5 mg）；A3經反相HPLC半製備色譜（90%甲醇）製備，得化合物 9（8 mg）。B組分經Sephadex LH，20柱色譜，石油醚，氯仿，甲醇（5：5：1）洗脫，洗脫液經薄層色譜檢測，合並相似組分，回收溶劑得亞組分B1～B3。B3經反相HPLC半製備色譜（78%甲醇，水），得化合物 1（3 mg）， 4（7 mg）和 5（3 mg）。C組分，經Sephadex LH，20柱色譜，石油醚，氯仿，甲醇（5：5：1）洗脫，洗脫液經薄層色譜檢測，合並相似組分，回收溶劑得亞組分C1～C4。C2經組合閃式色譜儀，（70%～90%）甲醇洗脫，得C2a～C2c。C2c再經反相HPLC半製備色譜（49%乙腈），得化合物 7（6 mg）， 10（3 mg）。D組分，經Sephadex LH，20柱色譜，石油醚，氯仿，甲醇（5：5：1）洗脫，洗脫液經薄層色譜檢測，合並相似組分，回收溶劑得亞組分D1～D4。D1經矽膠柱色譜分離，石油醚，丙酮（30：1～1：1）梯度洗脫，合並相似組分得D1a～D1c。D1c經反相HPLC半製備色譜純化（30%乙腈），得化合物 2（3 mg）， 3（2 mg）， 6（5 mg）。
3 結構鑒定
化合物 1 白色粉末，UV（MeOH） λmax（logε） nm： 207（1.8），286（1.1），322（1.1）；IR（KBr） νmax 3 289，3 079，2 920，2 851，1 656，1 604，1 516，1 505，1 491，1 359，1 250，1 154，1 126，1 037，979，930，812 cm-1。（+）HR，ESI，MS m/z 364.115 6 [M+Na]+（calcd 364.115 5），提示分子式為C19H19NO5。1H，NMR（Me2CO，d6，500 MHz）顯示可歸屬於一組1，2，4，取代的反式肉桂酰基的質子共振信號δH 7.08（1H，d，J=1.5 Hz，H，2），6.85（1H，d，J=7.5 Hz，H，5），7.04（1H，dd，J=7.5，1.5 Hz，H，6），7.43（1H，d，J=15.5 Hz，H，7），6.51（1H，d，J=15.5 Hz，H，8），一組1，2，4，取代的苯乙基質子信號δH 6.83（1H，d，J=1.5 Hz，H，2′），6.72（1H，d，J=7.5 Hz，H，5′），6.67（1H，dd，J=7.5，1.5 Hz，H，6′），2.74（2H，t，J=7.0 Hz，H，7′），3.49（2H，t，J=7.0 Hz，H，8′），以及1個亞甲二氧基質子信號δH 6.03（2H，s，，OCH2O，）和1個甲氧基質子信號δH 3.80（3H，s，，OMe）。由以上數據結合其13C，NMR數據推斷化合物 1為含有反式肉桂酰基取代的苯乙胺類衍生物。通過1H，1H，COSY和HSQC對化合物 1的13C，NMR譜中碳共振信號進行了準確歸屬後，其取代基位置通過HMBC進行確定。在化合物 1的HMBC譜中，亞甲二氧基質子信號與C，3和C，4有相關，甲氧基與C，3′有相關，H，2′，6′與C，4′有相關，以及H，8′與酰基碳有相關。根據以上信息，確定化合物 1的結構為N，反式，3，4，亞甲二氧基肉桂酰基，3，甲氧基酪胺。