[Key words]Forensic pathology； Postmortem interval； Vitreous humor； Concertration of ionic； Rabbit； Automatic biochemistry analyzer
死亡時間推定(esti mati on of the time sincedeath)是法醫學屍體檢驗首先要解決的問題。本實驗旨在探索一種簡單、快速、穩定，益於普及和推廣的方法，以德國Cobas Integra 400全自動生化分析儀為工具，利用比色法研究家兔玻璃體液內鐵和磷含量變化，以找出其與死後時間(post mortem interval，PMI)的相關性，為進一步闡明死後經過時間的生物學效應提供實驗性依據。
1 材料與方法
1.1 實驗動物分組及取材
健康家兔150隻(雌雄不限，重約1～2.5kg)，隨機分為10組，每組15隻，在室內將兔斷頭處死後，於死後即時、6、12、18、24、 30、36、42、48、54h各取玻璃體液1mL，以3000r/min離心(4℃)2min，取0.5mL上清待測。
1.2 檢測方法
將待測上清液加入德國Cobas Integra 400全自動生化分析儀測定通道。
1.3 統計學分析
所得數據采用SPSS10.0統計軟件包進行單元回歸分析，經t檢驗或方差分析，P
2 結果
家兔在死後即刻至死後54h間的Fe和P含量測定結果見表1。
由表1可知，家兔死後在6～30h之間，玻璃體液鐵含量呈逐步下降的趨勢，經Pearson相關分析，其與PMI呈明顯的負相關，相關係數：-0.993(P由表1可知，家兔死後在0～54h之間，玻璃體液磷含量呈逐步上升的趨勢，經Pearson相關分析，其與PMI呈明顯的正相關，相關係數：0.975(P
3 討論
死亡時間推定一直是法醫學的重點，它為公安偵察工作提供了有力的線索，受到國內外學者的廣泛關注和研究[1，2]。玻璃體具有解剖位置相對隔離，很少受到汙染和腐敗的影響，發生化學變化比血液和腦脊液慢，其各種成分的變化相對穩定[3]，是屍體化學研究的理想檢材。玻璃體成分的死後變化與PMI關係也成為國內外法醫學研究的熱點[4，5]。本實驗用CabasIntegra全自動生化分析儀研究不同的溫度下家兔玻璃體液中Fe、P含量變化，探求其與PMI的相關性，取得了具有顯著意義的結果，並獲得了各自的回歸方程，所得單元回歸方程經t檢驗有顯著意義(P
實驗所用Cobas Intergra Phosphate和Cobas Intergra Iron試劑盒是一種體外診斷試劑盒，可以在CabasIntegra係統上分別對體液中的Fe和P濃度進行定量檢測。其中體液鐵在酸性介質中解離出來，被還原劑還原成二價鐵，後者與亞鐵嗪生成紫紅色化合物，在562nm處監測其吸光度變化。體液中的無機磷在酸性溶液中與鉬酸銨反應生成的磷鉬酸銨複合物，直接在340nm波長處測定其吸光度。德國奧巴斯全自動生化分析儀可同時測定36個項目，其通過光電比色原理檢測反應產物顏色深淺，被檢物含量越高，反應產物顏色越深，檢測數據越大。這兩種方法的優點是簡單、快速、穩定，有利於方法的普及和推廣，同時其本底幹擾可以通過設立空白對照來解決。
家兔死後玻璃液磷含量升高可能與死後細胞膜通透性增加有關，磷元素釋放進玻璃體液有關，本試驗與陶濤的研究[6]相一致。同時與文獻[7]報道的豬屍體眼玻璃體液中磷含量的變化趨勢基本相同。本實驗鐵元素的變化規律與許小明、龔誌強的研究[8]相同，但鐵元素在30h左右才從最低限開始上升，其原因不十分明確，有可能係實驗係統誤差所致，但不管怎樣，有理由相信，隨著設備自動化及先進化發展，應用玻璃體內磷、鐵的含量變化來推測PMI將會成為推測死亡時間的有用方法。