[摘要] 目的 探討選擇性環氧合酶-2(COX-2)抑製劑NS-398和抗癌藥5-氟尿嘧啶(5-FU)聯用對胃癌細胞增殖的影響。方法 不同濃度的NS-398與10μg/mL的5-FU單用、聯用48h。四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測各組抑製率，應用中效原理和金正均法判定選擇性環氧合酶-2抑製劑與抗癌藥聯用的效果。結果 兩藥單獨應用時藥物濃度和抑製率呈量效關係，其效應隨藥物濃度的增加而增加；兩種藥物聯用抑製率均高於單用，具有協同作用。結論 NS-398與5-FU聯用後起協同作用，可以作為5-FU的化療增敏劑。
[關鍵詞] 胃腫瘤； 環氧合酶抑製劑； 化療藥物； 生長抑製
[中圖分類號] R735.2 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2010)03-16-02
胃癌是我國最常見的三大腫瘤之一，其發病率和病死率都超過了世界平均水平。聯合用藥是臨床上治療腫瘤的常用策略，其目的是為了獲取協同作用[1]。研究表明，抑製環氧合酶-2(COX-2)在非甾體抗炎藥(NASAIDs)腫瘤化學預防中起重要的作用。在人類多種腫瘤中，包括消化道腫瘤均存在過表達[2，3]。另外研究發現，COX-2抑製劑可抑製多種腫瘤的生長[4]。5-氟尿嘧啶(5-FU)是臨床上治療胃癌等消化道係統腫瘤的常用藥物。本實驗觀察環氧合酶-2抑製劑NS-398和抗癌藥5-FU單用和聯用時對體外培養的人胃癌細胞係SGC-7901生長的抑製作用，為胃癌的治療提供新的依據。
1 材料與方法
1.1 材料
胃癌細胞株SGC-7901(中國科學院上海生命科學研究院細胞庫)、NS-398(美國Cayman公司)、5-FU(Sigma公司)，RPMI- 1640培養基(美國Gibco BRL公司)、胎牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)、二甲基亞碸(dimethyl sulfoxide，DMSO)(淮安和元化工有限公司)，四甲基偶氮唑藍(MTT)(北京夏斯生物技術有限公司)。
1.2 主要儀器
倒置顯微鏡(重慶光學儀器廠)、超低溫冰箱(日本Sanyo公司)、CO2培養箱(美國Revco)、公司無菌工作台(北京市新技術應用研究所)、紫外分光光度計(美國Gene Company Limited 公司)。
1.3 方法
1.3.1 細胞培養 胃癌細胞株SGC-7901培養於含10%胎牛血清、100U/mL青黴素和100μg/mL鏈黴素的RMPI-1640的培養液中，培養條件為37℃，5%CO2，飽和濕度，2～3d傳代1次。
1.3.2 藥物的配製及濃度設計 按照說明書用DMSO分別溶解NS-398和5-FU配製成終濃度為1mmol/L的NS-398和1mg/mL的5-FU，各組的DMSO濃度不超過0.1%，本實驗設計的濃度為：10、100、1000μmol/L的NS-398和10μg/mL的5-FU。
1.3.3 MTT法檢測細胞的增殖活性 取對數生長期的SGC- 7901細胞，胰酶消化細胞，以每孔1×105個細胞接種於96孔板中，每孔體積200μL，37℃，5%CO2條件下培養24h。分別加入DMSO溶解的不同濃度的NS-398(10、100、1000μmol/L)和10μg/mL的5-FU進行實驗。設各濃度NS-398單獨處理組、5-FU單獨處理組、各濃度NS-398與5-FU聯合處理組，每個處理組同時設DMSO對照組和SGC-7901細胞空白對照組，各四個複孔。加入相應藥物和試劑孵育48h，孵育結束前4h加入5g/L的MTT溶液20μL。吸去上清，每孔加入150μL二甲基亞碸，振蕩10min，使結晶充分溶解，1h內用分光光度計在570nm處測定吸光度(A)，計算細胞增殖抑製率。細胞增殖抑製率=(1-實驗組A值/細胞空白對照組A值)×100%。重複3次，取其平均值。