兩種運送培養基及無菌棉拭子維持細菌活性能力的比較
檢驗與臨床
作者：杜玉海 葉金豔 吳莉萍
[摘要] 目的 比較兩種運送培養基以及無菌棉拭子三種標本運送係統維持細菌活性的能力。 方法 選用金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、福氏誌賀菌、白色念珠菌、化膿鏈球菌、肺炎鏈球菌、卡他布蘭漢菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌，在0 h、1 h、4 h、8 h、12 h、24 h分別檢測它們在三種運送係統上存活的情況，每個時相點重複檢測10次。 結果 金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、福氏誌賀菌、白色念珠菌24 h內在三種運送係統上存活，且菌量無明顯變化。但對苛養菌包括化膿鏈球菌、肺炎鏈球菌、卡他布蘭漢菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌在兩種運送培養基上的存活時間和菌量不同程度優於無菌棉拭子。 結論 運送培養基運送臨床微生物標本效果好於無菌棉拭子，特別是對苛養菌的細菌培養意義重大。
[關鍵詞] 運送培養基；無菌棉拭子；細菌培養
[中圖分類號] R378 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2013）14-0085-04
微生物標本的正確采集和及時送檢是臨床診斷、疾病預防和控製、食品衛生管理和監督、醫學衛生科學研究等領域的基礎性工作，而期間的樣品運送培養對檢測結果的正確起著關鍵性的作用[1，2]。目前大部分醫院多使用一次性無菌棉拭子采集和運送標本，由於無菌棉拭子不能為標本中的細菌提供養分和水分，放置時間過長，標本易幹燥，導致細菌死亡，降低檢出率，甚至造成假陰性。為此，本課題組實驗室出於運送病原菌樣品的需要，引進兩種一次性使用運送培養基，以期延長標本中細菌存活時間，避免或盡量減少出現假陰性。但運送培養基維持細菌活性的能力如何以及與無菌棉拭子比較有何區別少有文獻報道。本實驗主要探討兩種運送培養基及無菌棉拭子維持細菌活性的能力，以便選擇一個更適用於臨床的標本運送係統。
1 材料與方法
1.1 菌株來源
金黃色葡萄球菌質控菌株ATCC25923，大腸埃希菌質控菌株ATCC25922，白色念珠菌質控菌株ATCC64548，其他為臨床標本隨機分離菌株，包括福氏誌賀菌、化膿鏈球菌、肺炎鏈球菌、卡他布蘭漢菌、流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌。
1.2材料
兩種運送培養基（法國生物梅裏埃公司、浙江拱東醫療科技有限公司生產）；無菌棉拭子（浙江拱東醫療科技有限公司生產）；哥倫比亞血平板（鄭州博賽生物技術股份公司生產）；巧克力平板（法國生物梅裏埃公司生產）；淋球菌平板（鄭州安圖綠科生物工程有限公司生產）；沙保羅氏平板（江門市凱林貿易有限公司生產）。
1.3 方法
①將待測菌培養18～24 h，挑取菌落溶於無菌生理鹽水，用比濁儀調至0.5麥氏單位，再稀釋10倍備用。②每種菌液用三種運送係統棉拭子各6支沾取。③分成6個時間段：0 h、1 h、4 h、8 h、12 h、24 h，各菌株分別接種於相適應培養基平板，金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、福氏誌賀菌、化膿鏈球菌、肺炎鏈球菌接種於哥倫比亞血平板，卡他布蘭漢菌、流感嗜血杆菌接種於巧克力平板，淋病奈瑟菌接種於淋球菌平板，白色念珠菌接種於沙保羅氏平板。四分區劃線，放入35.5℃、5%CO2孵箱培養24～48 h觀察並記錄各菌株生長情況，按四分區劃線記錄生長情況，一區～四區生長分別記錄為：1～4對應+～++++，0表示平板未見細菌生長。每組實驗重複10次。
1.4統計學分析
采用SPSS19.0軟件處理，所有數據都以均數±標準差（x±s）表示，組間比較使用方差分析，兩兩比較采用t檢驗，P 0.05），其中白色念珠菌24 h帶菌量還略有增加。但對苛養菌，如流感嗜血杆菌、卡他布蘭漢菌、淋病奈瑟菌，所選兩種運送培養基與無菌棉拭子維持細菌活性能力的差異比較明顯（P 0.05）。而無菌棉拭子對卡他不蘭漢菌、流感嗜血杆菌8 h即無細菌生長，特別是淋病奈瑟菌，1 h帶菌量明顯減少（P 0.05），隻是梅裏埃運送培養基對肺炎鏈球菌24 h帶菌量略有減少，而拱東運送培養基流感嗜血杆菌24 h帶菌量有減少。兩種運送培養基在對維持淋病奈瑟菌活性方麵區別比較明顯（P