古代啤酒的發酵均是自然發酵。19世紀認識到發酵是由酵母引起的,並收集、分離酵母,逐步走向純種發酵。當時采用的酵母和發酵技術均屬利用上麵發酵酵母的發酵方法,隨後分離出下麵發酵酵母,研究出了下麵發酵酵母的發酵方法。我國(從1900年建立的第一家啤酒廠)一直采用下麵發酵酵母的發酵方法。本節討論下麵發酵酵母的發酵方法。
啤酒的發酵方法可分成:分批式發酵〔傳統發酵;大容量罐發酵(單罐、多罐)〕;連續式發酵;固定化酵母發酵(分批式、連續式)。
傳統啤酒發酵分為前發酵和後發酵兩個階段,前發酵在發酵池進行(是主要的發酵過程,所以又稱主發酵);在後發酵罐中進行後發酵。
一、前發酵
前發酵過程在前發酵間中的前發酵池中進行。
1.前發酵間及發酵設備
前發酵間一般建在地麵之上,在麥汁冷卻間的下麵,後發酵間的下麵或附近。由酵母添加室、前發酵室、酵母間三部分組成。不帶冷卻裝置的酵母繁殖池位於酵母添加室,酵母間用於回收的酵母處理、保存。
前發酵設備主要是前發酵池,早期多采用木桶,後來發展到水泥和金屬槽。前發酵池位於前發酵室,一般為敞口形式,容積一般10~100m3/個,池高2~2.5m,池充滿係數為80%。池底向出口處傾斜2%。
由於一般采用開口的發酵池,要求室內無菌(細菌總數小於300個/m3),為此在出入口處須設緩衝間,門口應有消毒池,牆壁和屋頂能耐水、耐酸堿、防黴變。地麵有1%~2%的坡度,排水暢通,便於定期清洗滅菌。
考慮安全,應安裝通風排氣裝置,能在5min內使前發酵間CO2濃度降至9mg/L以下。照明燈應該使用36V以下的安全電壓。
每1kg糖類發酵,將釋放出605kJ熱量。為維持發酵溫度和降溫,發酵池均裝有浸沉式冷卻盤管或側壁夾套冷卻裝置,發酵產生的一部分熱量會散發於發酵間,因此發酵間必須降溫控溫(一般在7~9℃)。一般采用冷風循環冷卻方式,冷風從下至上經過發酵池,發酵間走道作為冷風風道。要求牆壁和屋頂能隔熱,降低能耗,便於控製發酵溫度。
2.前發酵階段及其特征
在麥汁冷卻的同時通入無菌空氣,當一定量的冷麥汁進入到酵母繁殖池後,按0.5L/hL添加所需酵母泥並與麥汁均勻混合,直至接種麥汁全部進入到酵母繁殖池,開始5~7d的主酵過程,主酵結束後下酒,回收酵母。根據發酵液麵外觀現象(泡沫的變化),傳統的主發酵過程可分為酵母繁殖期和倒池、起泡期、高泡期、落泡期、泡蓋形成期幾個階段。
(1)酵母繁殖期麥汁和酵母進入繁殖池後,開始進行酵母繁殖,在接種後的12~16h,當發酵液麵上形成一層白色、細膩、薄的泡沫層,並覆蓋在整個發酵液液麵上時,即可倒池。由於酵母繁殖池的出口處有一個帶孔的短管(俗稱酵母檔),防止倒池時沉澱的冷凝固物又被帶入前發酵液中。倒池完畢後,拆下酵母檔,清洗滅菌酵母繁殖池。
通過酵母繁殖和倒池,使酵母活化並渡過停滯期,進行酵母繁殖。通過倒池可分離冷凝固物和死酵母。接種24h後,糖度下降0.3%~0.5%、pH下降0.25~0.30、溫度上升0.5~1℃。
(2)起泡期倒池4~6h後,發酵池四周出現白色泡沫,逐漸擁向中間,覆蓋住整個液麵。泡沫潔白細膩,慢慢增厚而緊密,形狀似菜花形,高度10~15cm。溫度上升0.5~0.8℃/d;(不降溫),糖度下降0.3~0.5°P/d,一般保持1~2d。
(3)高泡期發酵1~2d後,泡沫繼續增高,最高可達30~40cm,泡沫形狀呈卷曲狀,類似浪花、卷發形。由於酒花樹脂、色素物質、蛋白質-多酚複合物的析出,顏色由白色變成黃色。發酵旺盛,溫度上升快,需控製溫度。糖度下降1.5~2.5°P/d,一般保持2~3d。
(4)落泡期發酵3~5d後,CO2生成量減少,泡沫回縮高度下降,形成鋸齒形,析出物增多,泡沫顏色由黃色變成棕色。糖度下降0.5~0.8°P/d。應根據糖度下降來逐漸降溫,溫度下降0.5~0.8℃/d,維持1~2d。
(5)泡蓋形成期5~7d時,發酵基本停止,CO2產生更少,泡沫繼續回縮,最終在發酵液麵上形成棕褐色的泡蓋,厚度2~4cm。糖度下降0.2~0.4°P/d;一般保持0.5~1d;控製溫度到下酒溫度,沉澱酵母。
3.前發酵過程的控製
技術主要參數是溫度、糖度、時間,這三者互相聯係,溫度高,糖度下降快,發酵時間短。
(1)溫度發酵液溫度的變化,反映了發酵速度、降糖情況,一般把主發酵溫度分為三個階段。
①接種溫度:大約等於(或略高於)麥汁冷卻溫度,一般控製比高泡溫度低2~3℃。
②高泡溫度:是前發酵過程中的最高溫度。如溫度高,發酵旺盛,決定了發酵速度、代謝產物的組成、啤酒的風味。現在一般控製在9~12℃。
③下酒溫度:前發酵的終了溫度,決定了酵母的回收量(溫度低酵母回收量多),影響到後發酵的情況(後發酵強度、澄清、雙乙酰的還原、CO2的飽和、酒齡)。一般下酒溫度控製在5~7℃。
溫度每天最少檢查記錄3次,而且應該有一定的間隔時間(如4h 1次),最好每班檢查2次。也可隨時檢查,以防發酵液的溫度忽高忽低。
(2)時間一般前發酵時間為5~7d。發酵時間的長短主要取決於發酵時的高泡溫度。
溫度低,發酵較緩慢,發酵時間長,pH下降慢,蛋白質析出少,啤酒酒體醇厚,泡沫豐富,但對非生物穩定性不利。
溫度高,發酵旺盛,發酵時間短,pH下降快,酸度上升過急,有利於蛋白質的析出沉澱,啤酒口味較淡爽,泡沫較鬆散,但啤酒非生物穩定性好。
(3)糖度通過糖度變化了解發酵過程,作為發酵控製的依據。糖度變化反映了麥汁組成、酵母性能、繁殖情況及添加量。實際工作中,一般在達到高泡溫度時,才開始檢查,每天最好3次(即每班1次),也可隨時檢查,根據具體糖度下降來控製溫度。
用糖度表檢測發酵液時,受酒精的影響,測得的糖度稱為外觀糖度,由此計算出的發酵度是外觀發酵度。
(4)發酵度發酵度是在一定時間內,被發酵的浸出物占總浸出物的百分數。
發酵度可分為外觀發酵度、真正發酵度兩種,或分為麥汁最終(極限)發酵度、前發酵間發酵度、成品發酵度三種。
①外觀發酵度(Vs):外觀發酵度是以糖度計實測的外觀濃度計算的發酵度。外觀濃度受發酵液中酒精的影響,其濃度值偏低,所以外觀發酵度一般偏高。由於測定外觀濃度操作簡單,生產現場常常采用。
②真正發酵度(Vw):發酵液經除去酒精和CO2後,蒸餾的量用水補充,再測定的濃度,稱為真正濃度。用真正濃度計算的發酵度稱為真正發酵度。真正發酵度數據較準確,是檢查啤酒質量的重要指標之一。
真正發酵度(Vw)始終低於外觀發酵度(Vs)。Balling在1870年推算出二者之間的近似值:
Vw=0.81Vs
③麥汁最終發酵度(EVG):麥汁最終發酵度又稱為極限發酵度,是在實驗室測定協定、定型麥汁的最大發酵能力,常用外觀濃度的形式計算。生產麥汁的外觀最終發酵度反映麥汁的可發酵性能,是控製發酵過程的依據之一。
④(前)發酵間發酵度(GVG):在下酒時測定,是確定下酒糖度的依據。
麥汁外觀最終發酵度與前發酵間發酵度的差值為10%~12%,是傳統下酒時確定下酒濃度的依據;對於大罐來說,麥汁的外觀最終發酵度與發酵液發酵度的差值約為10%,是為了CO2飽和、進行封罐升壓的最遲時刻。
⑤成品啤酒發酵度(AVG):在啤酒過濾前測定,是結束啤酒發酵的依據之一。對於大罐發酵來說,是發酵結束、開始降溫的依據之一。現代生產的淡爽型啤酒,希望成品啤酒發酵度(AVG)盡可能接近最終發酵度(EVG),差值至少小於5%。否則成品啤酒發酵度低、口味帶甜、生物穩定性差。
幾種類型的啤酒EVG與AVG的差值要求:淺色的出口啤酒0.5%~2%;比爾森啤酒0.5%~5%;貯藏啤酒3%~4%;黑色啤酒6%。
成品啤酒發酵度(AVG)的高低主要取決於:EVG、EVG與AVG差值,酵母生理性能、酵母耐溫性,麥汁通氧狀況及前發酵、後發酵工藝操作。
(5)下酒前發酵結束後的嫩啤酒進入後酵罐的條件和下酒前的準備工作。
①下酒口和下酒管道的清洗、滅菌;下酒前應打撈泡蓋。在泵送下酒時,為防止泡沫過多,後酵罐需背壓0.03~0.05MPa。
②為了順利進行後酵過程,應控製好下酒條件,包括下酒糖度、下酒溫度和嫩啤酒中酵母數等。
a.下酒糖度控製:前發酵結束下酒時的外觀發酵度與最終發酵度差值,一般控製為10%~12%,由此下酒糖度也要控製在一定範圍。
b.下酒的溫度一般為5~7℃。
c.嫩啤酒中酵母數一般為(8~12)×106個/mL。
二、酵母添加、回收、貯存
1.啤酒酵母的管理
啤酒發酵是一個極為複雜的生化反應過程,而啤酒生產中的酵母管理則是一項認真細致的工作。包括進行擴大培養和酵母處理時的工藝要求。
(1)酵母使用的代數、擴大培養周期。
(2)回收酵母和擴大培養酵母應使用的接種量。
(3)回收酵母的貯存條件(溫度、攪拌、通風),包括把回收酵母溫度降至貯存溫度的最長時間、回收酵母的貯存時間、確定回收前的酵母溫度、錐形大罐錐底的降溫。