早在1998年7月，馬英九當選台北市長，周美青第一次公開露麵，就給媒體留下了深刻印象。與一般“官太太”以夫為尊的態度截然不同，她甚至衝著馬英九頻頻“開炮”，直言“所有做丈夫的缺點他都有”，率真言辭，讓馬英九略顯尷尬。有一次，她甚至在公開場合，在攝像鏡頭前率真地按著馬英九的頭示意他向大家鞠躬致謝，其“厲害”可見一斑。
周美青曾是台灣兆豐銀行的法務處長，也是兆豐國際證券投資信托股份有限公司及財團法人台北敦安社會福利基金會的董事。20多年來，她每天早上搭乘606路公交車去上班，無論有多少記者上車拍照、攝影，她都冷靜地站在公交車一角，看著車窗外的風景，偶爾插著耳機聽音樂。一到銀行，她就進入了法務處長的角色，精幹利落。特立獨行讓人欽佩。
然而，自從馬英九當選後，幾乎全台的記者都蜂擁到606路公交車上，圍追堵截周美青，讓乘客們不堪其擾。周美青不得不改變自己，不再坐公交車上班。後來，她也不得不辭去董事職務，這是她為馬英九再次做出的“犧牲”。
馬英九天生一張“明星臉”，沒少受台灣一些女性的“騷擾”，有的甚至寫信、打電話向他一表“愛慕之情”。周美青對此十分大度，信心十足：“不怕！他哪有機會亂來？全台灣的人都在幫我監視他呢！”
每天馬英九結束工作回到家中時，兩個女兒多半都已就寢，他們之間就用貼小紙條的辦法溝通。在馬英九的全家福照片裏，女兒們都和媽媽一樣的“酷”，唯一溫柔微笑的人，隻有馬英九一個。女兒馬元中評價馬英九：“他是個有一點糊塗的可愛父親。”玩腦筋急轉彎時，他很少答對；在餐桌上聊天時，他的話題都很無趣；他每次出國都會帶同樣的巧克力當禮物，重複到女兒們由驚喜轉為無奈……
馬英九是台灣“最受女性歡迎的男人”，但在馬家卻絕對是“最受貶抑的男人”。周美青曾笑言，他們是“一家五口”，排名第四的是收養的流浪狗“馬小九”，馬英九隻能排名第五。
馬英九曾收養了一隻流浪狗，並親自取名“馬小九”。第一次帶回家，把周美青嚇了一跳。但周美青很快就喜歡上了“馬小九”，對它照顧得十分周到。周美青對“馬小九”的好，讓馬英九十分吃醋。“馬小九”對這個整天在外忙碌的男主人十分陌生，馬英九每晚回家，“馬小九”都當他是陌生人，朝他狂吠。
有一次馬英九和周美青近距離說話，竟被“馬小九”咬了一口，周美青非但沒有遷怒於小狗，反而用責怪的語氣對馬英九說：“你幹嗎？”2006年除夕夜，全家人圍坐在火爐旁烤火時，“馬小九”迅速霸占了周美青旁邊馬英九的位置，硬是不讓馬英九坐。鬱悶的馬英九在巡視台北市狗年春節的主花燈區時調侃說：“提到‘馬小九’我隻有歎氣，因為‘英不如小，人不如狗，馬英九不如馬小九’。”
2012年2月14日，情人節，馬英九在Facebook上感謝夫人周美青的相知相惜：三十五年來，美青為我的付出與犧牲，我對她的感激，絕非這篇短文所能表達……有一首美青非常喜愛的歌叫做“箏”：“天有多長，地有多久？天真的你，曾如此問我，許下的承諾，要一生相守。”博文中馬英九還提到，不久前情人節時，一位網友看到周美青跟他的照片，留言說“好恩愛喔！可惜美青姊說過下輩子不嫁給馬英九了”。
對此，馬英九說，他看完笑了好久，決定“下輩子不娶別的女人，看她嫁不嫁我；或下輩子我們互換性別，我嫁給她！”