第十題,實驗設計題。請同學們閱讀一篇材料。
核酸限製性內切酶是重組DNA技術中最重要的工具酶之一,它是一類能識別雙鏈DNA中特定堿基序列,內切方式水解DNA鏈的核酸水解酶。最適合基因工程操作的限製內切酶為第二類內切酶,這類酶的一個重要特點是切割的斷裂點都在反轉重複序列上,亦稱回文式序列,如:
EcoR I
5’-G↓AATT C-3’
3’-C TTAA↑G-5’
BamH I
……
請設計一個質粒DNA的限製性內切酶酶解鑒定實驗。
‘還好我做過核酸的其他實驗,這個核酸限製性內切酶的實驗設計,編吧!’
蘭傑並沒有親手做過限製性內切酶的實驗,他也很想做啊,然而限製內切酶是昂貴的生化試劑,教練不給他做。
這個時候,蘭傑隻能依靠類似實驗的操作經曆及豐富的理論知識儲備,進行合理的編排。
第一步,酶切反應。
第二步,電泳凝膠板的製備。
第三步,電泳加樣。
第四步,電泳與鑒定。
蘭傑首先設計出四個主要的實驗步驟。
需要的實驗材料包括:質粒DNA、反應緩衝液、BSA、限製性內切酶……
需要的實驗器材包括:電泳槽與電泳儀、紫外檢測儀、電熱恒溫水浴箱……
然後就是細化每一個步驟,寫出具體的實驗操作細節。
‘設計完了,理論上應該是可行的。’
蘭傑從頭到尾檢查一遍試卷,剛檢查完,鈴聲響起,交卷。
明天將進行實驗考試,雷天剛對他的隊員們說:“理論考試自我感覺良好的同學,可以和我們教練團隊溝通一下理論考試的情況。自我感覺一般的同學,你們回宿舍好好休息,調整狀態,積極備戰明天的實驗考試。”
雷天剛說罷,有一半的隊員回去休息了,剩下的一半隊員跟教練們對答案。
“對對對!我是這麼寫的!”
“哈哈!我又做對一題!”
“啊?錯了?”
“又錯了?”
“第六題之後,我全錯?”
“我特麼心態崩了啊!”
……
在競賽尚未全部結束的時候對答案,存在一定風險。
自我感覺良好的同學對完答案後發現準確率較高,他們的自我感覺當然會更加良好,信心和士氣倍增,有利於明日的實驗賽。
反之則炸裂。
“這麼看來,我的理論分數不會低於95分?”對完理論題的答案之後,蘭傑發現他的感覺蠻準確的啊,如果能獲得不低於理論分95%的分值,就非常可觀。
“而我的理論分不會高於50分,我撲街了,我不想參加實驗賽了……”高二的某位隊員唉聲歎氣,心情極為低落。
能入選羊中生競隊的學生都是生物領域的尖子生,正常情況下,這些尖子生交了卷,在沒有對答案之前,對於自己分數的估值基本上是八九不離十。
對完答案,實際值是預期值的80%~90%,這很常見,大部分學生的估分準確率在這個區間內。
估90分,考了30分。或者估30分,考了90分。這兩種極端情況都很少見。
羊中生競隊的這位高二學生考完了理論題,自我感覺極其良好,他自我感覺能考到90分,對完答案後發現,他的實際值有很大概率不會超過50分。