幸而這幅畫老早即有臨本，這些臨本至今還留存著，其中一幅是奧喬納（Marbsp;d''Oggine）在一五一〇年（按：即在萊奧納多去世時）所摹的，臨本的大小與原作無異，現存法國盧浮美術館。米蘭亦留有好幾種臨本，都還可以窺見真品的精神。
此外，我們還有達·芬奇為這幅壁畫所作的草稿，在英國，在德國魏瑪，在米蘭本土，都保存著他的素描，這些材料當然比臨本更可寶貴。
在未曾述及本畫以前，先翻閱一下《聖經》上關於《最後之晚餐》的記載當非無益：
那個晚上到了，耶穌和十二個使徒一同晚餐，他說：“我告訴你們真理，你們中間的一個會賣我。人類的兒子，將如預定的一般，離開世界。但把人類的兒子賣掉的人要獲得罪譴，他還是不要誕生的好。”猶大，那個將來賣掉耶穌的使徒，說：“是我麼？我主？”耶穌答道：“你自己說了。”
他們在用餐時，耶穌拿一塊麵包把它祝了福，裂開來分給眾使徒，說：“拿著吃罷，這是我的肉體。”接著他又舉杯，祝了福，授給他們，說：“你們都來喝這杯酒，這是我的血，為人類贖罪，與神求和的血。可是，我和你們說，在和你們一起在我父親的天國裏重行喝酒之前，我不再喝這葡萄的酒漿了。”說完，唱過讚美詩，他們一齊往橄欖山上去了。
在這幕簡短的悲劇中，有兩個激動的時間：第一是耶穌說“你們中間的一個會賣我！”這句話的時間，眾徒又是悲哀又是憤怒，都爭問著：“是我麼？”——第二是耶穌說“這是我的肉體”“這是我的血”幾句話的時間。前後幾句話即是《最後之晚餐》的整個意義。在故事的連續上，後一個時間比較重要得多；但第一個時間更富於人間性的熱情及騷動。萊奧納多所選擇的即是這前一個時間。
時間到了。耶穌知道，使徒們也知道。這晚餐也許是最後的一餐了。耶穌在極端疲乏的時候，吐出“你們中間的一個會賣我！”的話，使眾徒們突然騷擾惶惑，互相發誓作證。這是達·芬奇所要表現的各個顏麵上的複雜的情調。
在技術方麵，表現這幕情景有很大的困難。一般虔誠的教徒熱望看到全部人物。喬托把他們畫成有的是背影有的是正麵，因為他更注意於當時的實地情景。安吉利科則畫了幾個側影。而猶大，那個在耶穌以外的第一個主角，大半都畫成獨立的人物，站在很顯著的地位。
萊奧納多的構圖則大異於是。他好像寫古典劇一般把許多小枝節省略了。耶穌坐在正中，在一張直長的桌子前麵，使徒們一半坐在耶穌的左側，一半在右側，而每側又分成三個人的兩小組。萊奧納多對於桌麵的陳設、食堂的布置，一切寫實性的部分，完全看做不重要的安插。他的注意全不在此。
我們且來研究他的人物的排列：
耶穌在全部人物中占著最重要最明顯的地位，第一因為他坐在正中，第二因為他兩旁留有空隙，第三因為他的背後正對著一扇大開著的門或窗（？），第四因為耶穌微圓的雙目，放在桌上的平靜的手，與其他人物的激動惶亂，形成極顯著的對照。大家（使徒們）都對他望著，他卻不望任何人。耶穌完全在內省、自製、沉思的狀態中。
十二個使徒，每側六個，六個又分成三人的兩小組，萊奧納多為避免這種呆板的對稱流入單調之故，又在每六個人中間，由手臂的安放與姿態動作的起落，組成相互連帶的關係。
耶穌右手第一個，是使徒聖約翰，最年輕最優秀、為耶穌最愛的一個。右手第二個是不忠實的猶大，聽見了基督的話而心虛地直視著他，想猜測他隱秘的思念。他同時有不安、恐怖與懷疑的心緒。手裏握著錢，暗示他是一個貪財的人，為了錢財而賣掉他的主人。
如果把每個使徒的表情和姿勢細細研究起來未免過於冗長。讀者隻要懂得故事的精神，再去體驗畫家的手腕，從各個人物的臉上看出各個人物的心事。他們的姿態舉止更與全部人物形成對稱或排比。
這種研究之於藝術家的修養，尤其是在心理表現與組織技能方麵，實有無窮的裨益。萊奧納多·達·芬奇並是曆史上稀有的學者，關於他別方麵的造詣，且待下一講內專章論列。