一、常用試劑
1.吲哚(靛基質)試劑(用於吲哚試驗)
製法一:將5g對二甲基氨基苯甲醛溶解於75mL戊醇(正、異戊醇均可)中,而後緩慢加入濃鹽酸25mL。溶液呈土黃色。
製法二:將1g對二甲基氨基苯甲醛溶解於95mL 95%乙醇中,而後緩慢加入濃鹽酸20mL。
2.5%α-萘酚無水乙醇溶液(用於V-P試驗)
稱取5gα-萘酚,用無水乙醇定容至100mL,保存於棕色瓶中。該試劑易氧化,臨用時現配。
3.40%KOH溶液(用於V-P試驗)
稱取40gKOH,用蒸餾水溶解定容至100mL。
4.氨試劑(奈氏試劑)
A液:碘化鉀10.0g,蒸餾水100mL,碘化汞20.0g。
B液:氫氧化鉀20.0g,蒸餾水100mL。
製法:將10g碘化鉀溶於50mL蒸餾水中,在此液中加碘化汞顆粒,待溶解後,再加KOH和蒸餾水,然後再將澄清的液體倒入棕色瓶中貯存。
二、指示劑
1.甲基紅指示劑(用於甲基紅試驗)
成分:甲基紅0.04g,95%乙醇60mL,蒸餾水40mL。
製法:先將甲基紅溶於95%乙醇中,然後加入蒸餾水。變色範圍:pH4.2~6.3,顏色由紅變黃。
2.溴甲酚紫指示劑(用於配製培養基)
(1)1.6%溴甲酚紫乙醇(BCP)溶液
成分:溴甲酚紫1.6g,95%乙醇50mL,蒸餾水50mL。
製法:精確稱取溴甲酚紫1.6g,溶於50mL95%乙醇中,再加入蒸餾水50mL,過濾後使用。按相同方法,可以配製1.6%溴甲酚綠(BCG)或溴麝香草酚藍(BTB)乙醇指示劑。
(2)0.04%溴甲酚紫水溶液
成分:溴甲酚紫0.04g,0.01mol/L NaOH 7.4mL,蒸餾水92.6mL。
製法:精確稱取溴甲酚紫0.04g,溶於0.01mol/L NaOH 7.4mL中,然後再加入蒸餾水92.6mL,過濾。溴甲酚紫變色範圍:pH5.2~6.8,顏色由黃變紫。常用濃度為0.04%。
3.溴麝香草酚藍指示劑(用於配製培養基)
(1)1%溴麝香草酚藍乙醇溶液
成分:溴麝香草酚藍1.0g,95%乙醇50mL,蒸餾水50mL。
製法:精確稱取溴麝香草酚藍1.0g,溶於50mL95%乙醇中,再加入蒸餾水50mL,過濾。
(2)0.2%溴麝香草酚藍水溶液
成分:溴麝香草酚藍0.2g,0.01mol/L NaOH 6.4mL,蒸餾水93.6mL。
製法:精確稱取溴麝香草酚藍0.2g,溶於0.01mol/L NaOH 6.4mL中,然後再加入蒸餾水93.6mL,過濾。溴麝香草酚藍變色範圍:pH6.0~7.6,顏色由綠變藍,常用濃度為0.2%。
4.石蕊指示劑(用於配製培養基)
(1)1%~2%石蕊乙醇溶液
成分:石蕊顆粒8.0g,40%乙醇300mL。
製法:先將石蕊顆粒研碎,然後倒入有一半體積的40%乙醇溶液中,加熱1min,倒出上層清液,再加入另一半體積的40%乙醇溶液,再加熱1min,倒出上層清液,將兩部分溶液合並,過濾。如果總體積不足300mL,可添加40%乙醇,最後加入0.01mol/L HCl溶液,攪拌,使溶液呈紫紅色。
(2)2.5%石蕊水溶液
成分:溴麝草酚藍0.2g,0.01mol/L NaOH 6.4mL,蒸餾水93.6mL。
製法:稱取石蕊2.5g,溶解於100mL蒸餾水中,過濾後使用。變色範圍:pH5.0~8.0,顏色由紅色變藍色。
5.0.04%中性紅指示劑
稱取中性紅0.1g,溶於70mL 95%乙醇中,用蒸餾水定容至250mL。變色範圍:pH6.8~8.0,顏色由紅色變黃。
6.0.5%酚酞指示劑
稱取酚酞0.5g,溶解於100mL 50%或60%乙醇溶液中。變色範圍:pH8.2~10.0,顏色由無色變紅色。
7.0.02%酚紅指示劑