正文 附錄三 常用試劑及指示劑的配製(2 / 3)

稱取酚紅0.1g,加28.2mL 0.01mol/L氫氧化鈉,加蒸餾水定容至500mL。變色範圍:pH6.8~8.4,顏色由黃色變紅。

8.0.04%甲基橙指示劑

稱取甲基橙0.1g,加3mL 0.1mol/L氫氧化鈉,加蒸餾水定容至250mL。變色範圍:pH3.1~4.4,顏色由紅色變橙色。

9.美藍氧化還原指示劑

成分:0.006mol/L氫氧化鈉,0.015%美藍溶液,6%葡萄糖溶液。

製法:使用時將三種溶液等量混合,加熱使美藍褪色,迅速置於厭氣罐中。如溶液無色或淡藍色,即為厭氣環境。

三、溶液及緩衝液

1.2%伊紅溶液

稱取2g伊紅Y,加蒸餾水至100mL,0.10MPa滅菌20min,然後將2mL 2%伊紅溶液在無菌條件下加入100mL肉膏蛋白腖培養基中,搖勻放涼即可;或將配製好的2%伊紅溶液直接加入肉膏蛋白腖培養基中,然後再行滅菌。

2.0.5%美藍溶液

稱取0.5g美藍,加蒸餾水至100mL,0.1MPa滅菌20min,然後將1mL美藍溶液在無菌條件下加入肉膏蛋白腖培養基中,搖勻放冷即可;或將配製好的0.5%美藍溶液直接加入肉膏蛋白腖培養基中,然後再行滅菌。

3.1%澱粉溶液

稱取可溶性澱粉1g,先用少量蒸餾水調成糊狀,傾入煮沸的蒸餾水中,定容至100mL蒸餾水中。

4.5%碳酸氫鈉溶液(俗稱蘇打水)

稱取碳酸氫鈉5g溶於100mL蒸餾水中。

5.酒精稀釋法

95%酒精配製75%酒精。如果將兩種濃度的酒精配製成某種濃度酒精溶液時,可用十字交叉法。

或采用直接稀釋法,如用工業或醫用95%酒精配製成75%酒精,則可取75mL 95%酒精加入20mL蒸餾水即可。

6.10%FeC13溶液

稱取FeC13·6H2O 10g,溶於蒸餾水中,定容至100mL。

7.0.85%生理鹽水

稱取氯化鈉0.85g,溶解於100mL蒸餾水中,0.10MPa滅菌20min。

8.碘液

碘2g,碘化鉀4g,蒸餾水100mL。配製方法同Lugol氏碘液。

用途:澱粉糖化試驗。

9.磷酸鹽緩衝液

成分:磷酸二氫鉀(KH2PO4)34.0g,蒸餾水500mL,pH7.2。

製法:

貯存液:稱取34.0g的磷酸二氫鉀溶於500mL蒸餾水中,用大約175mL的1mol/L氫氧化鈉溶液調節pH至7.2,用蒸餾水稀釋至1000mL後貯存於冰箱中。

稀釋液:取貯存液1.25mL,用蒸餾水稀釋至1000mL,分裝於適宜容器中,121℃高壓滅菌15min。

用途:用於金黃色葡萄球菌檢驗。

10.乳酸-苯酚溶液

成分:苯酚10g,乳酸(相對密度1.21)10g,甘油20g,蒸餾水1000mL。

製法:將苯酚在水中加熱溶解,然後加入乳酸及甘油。

用途:檢驗真菌形態時用。

四、常用抗生素溶液

1.鏈黴素溶液

1000U/mL標準鏈黴素製品為10000000U/瓶。先準備好100mL無菌水,在無菌條件下用無菌移液管吸取0.5mL無菌水加入鏈黴素標準製品瓶中,待鏈黴素溶解後取出加至另一無菌錐形瓶中,如上操作反複用無菌水洗鏈黴素標準製品瓶5次,最後將所剩餘無菌水全部轉移至鏈黴素溶液中為止,此鏈黴素溶液為10000U/mL。

2.氨苄青黴素溶液(8mg/mL和25mg/mL)

稱取氨苄青黴素(醫用粉劑)8mg和25mg,分別溶於1mL無菌蒸餾水中,臨用時配製,或臨用時再經濾膜濾器過濾除菌。

3.標準多黏菌素E溶液

E製品為1mL約有18000U。精確稱取多黏菌素E標準品55.56mg,用無菌1/15mol/LpH6的磷酸緩衝液溶解定容至100mL,即配製成10000U/mL的多黏菌素E標準母液,在4℃下保存備用。

將10000U/mL多黏菌素E母液用無菌1/15mol/L pH6.0的磷酸緩衝液稀釋成600、800、1000、1200、1400U/mL。用濾膜濾器過濾除菌,貯存於無菌試管或無菌三角瓶中,最好臨用前配製。