正文 附錄三 常用試劑及指示劑的配製(3 / 3)

4.土黴素溶液(8mg/mL)

稱取土黴素(醫用粉劑)8mg溶於1mL無菌蒸餾水中,臨用時配製。

5.絲裂黴素C母液(0.3mg/mL)

稱取3mg絲裂黴素C,溶於10mL無菌蒸餾水中,製成0.3mg/mL絲裂黴素C母液。誘導溶源性細菌釋放噬菌體時,每20mL細菌培養物中加0.2mL絲裂黴素C母液,使終濃度為3μg/mL。

五、消毒藥劑

1.結晶紫液(1%)

取醫用粉劑甲紫1g溶解於100mL無菌蒸餾水中,即配成1%的水溶液。俗稱紫藥水,對G+細菌作用較強。

2.碘酊溶液(碘酒)

本藥含碘2%、碘化鉀1.5%。稱取2g碘和1.5g碘化鉀,置於100mL量杯中,加少量50%酒精,攪拌待其溶解後,再用50%酒精稀釋至100mL,即得碘酊溶液。

3.過氧化氫溶液(3%~10%)

俗稱雙氧水,係無色無臭的水狀液體,通常含30%的H2O2,用無菌蒸餾水稀釋成3~10倍即可。臨用前配製。

4.5%石炭酸液

石炭酸(苯酚)50g、蒸餾水1000mL。配製時先將石炭酸在水浴內加熱溶解,稱取50g,倒入1000mL蒸餾水中。

5.2%~5%來蘇爾溶液

來蘇爾水是肥皂乳化甲酚的混合液。配製2%的來蘇爾溶液用於皮膚消毒,配製3%~5%來蘇爾溶液用來處理微生物實驗的廢棄物品。量取5mL來蘇爾水,用無菌蒸餾水稀釋至100mL,即配成5%(1∶20)的來蘇爾原液。

六、脫纖維全血、血漿和血清的製備

1.脫纖維全血的製備(用於製備血瓊脂培養基)

將針筒中的血立即以無菌操作注入已滅過菌並加有適量玻璃珠或碎玻璃片的三角瓶中,用手搖擺,使血液中的纖維蛋白全部附著在玻璃珠或碎玻璃片上,置於冰箱中保存備用。

2.兔血漿的製備(用於血漿凝固酶試驗)

製法一:將針筒中的血注入含有檸檬酸-檸檬酸鈉-葡萄糖溶液的無菌三角瓶中(兩者比例為4∶1),搖勻,再以3000r/min離心30min,除去紅血球,即得血漿。

製法二:取0.106mol/L檸檬酸鈉溶液(3.13g Na3C6H5O72H2O溶於100mL蒸餾水中)1份加兔血9份,混合後以2000r/min離心10min,吸取上清液即為兔血漿。

3.血清的製備(用於血清學試驗)

將針筒中的血注入無菌小三角瓶中,待血液凝固後,析出來的上清液即為血清。

七、鮮乳中抗生素檢驗

1.滅菌脫脂乳

成分:無抗生素的脫脂乳。

製法:經115℃滅菌20min,也可采用無抗生素的脫脂牛乳粉,以蒸餾水10倍稀釋,加熱至完全溶解,115℃滅菌20min。

2.4% 2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)水溶液

成分:2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)1g,滅菌蒸餾水5mL。

製法:稱取TTC溶於滅菌蒸餾水中,裝褐色瓶內於2~5℃保存。如果溶液變為半透明的白色或淡褐色,則不能再用,臨用時用滅菌蒸餾水5倍稀釋,成為4%水溶液。

3.青黴素G參照溶液

成分:青黴素G鉀鹽30mg,無菌磷酸鹽緩衝液適量,無抗生素的脫脂乳適量。

製法:精密稱取青黴素G鉀鹽標準品,溶於無菌磷酸鹽緩衝液中,使其濃度為100~1000IU/mL。再將該溶液用滅菌的無抗生素的脫脂乳稀釋至0.006IU/mL,分裝於無菌小試管中,密封備用。-20℃保存不超過6個月。

4.溴甲酚紫葡萄糖蛋白腖培養基

成分:蛋白腖10.0g,葡萄糖5.0g,2%溴甲酚紫乙醇溶液0.6mL,瓊脂4.0g,蒸餾水1000mL。

製法:在蒸餾水中加入蛋白腖、葡萄糖、瓊脂,加熱攪拌至完全溶解,調節pH至7.1±0.1,然後再加入溴甲酚紫乙醇溶液,混勻後,115℃高壓滅菌30min。