正文 項目五 液體菌種生產(1 / 3)

【知識目標】了解液體菌種的用途和特點;了解液體菌種培養液配方;掌握液體菌種製作、培養與檢查方法;掌握液體菌種的使用方法。

【技能目標】會製作和使用液體菌種。

【德育目標】培養學生刻苦鑽研業務、勇於創新的精神。

【生產任務】

8月下旬生產2000袋金針菇,自繁液體菌種。

1生產計劃

1.1製種的時間和數量

生產金針菇2000袋,按液體接種量為10~15mL/袋,成功率按95%計算,需液體菌種量約30L。製種時間是栽培日期向前推算5~7d。

1.2確定液體菌種培養基配方

食用菌常用的液體菌種培養基配方,主要有以下八種。根據各液體培養基的特點,選定配方7作為金針菇液體培養基。

1.3生產條件

(1)設備設施高壓滅菌鍋、接種箱或超淨工作台、大型旋轉式搖床。

(2)用具天平、電爐子、大鋁鍋、玻璃棒、藥匙、標簽、750mL三角瓶或輸液瓶、1000mL燒杯、量筒、記號筆、紗布、線繩、接種工具、火柴、酒精燈等。

(3)材料以生產2000袋金針菇所需液體菌種為計算單位,以配方7為例列出明細表。

2任務實施

液體菌種搖瓶培養法的工藝流程:液體培養基的製備→接種→搖瓶培養→菌種檢驗→液體菌種。

2.1液體培養基的製備

2.1.1液體培養基的製作流程

計算→稱量→熬製→定容→分裝→包紮→滅菌。

2.1.2製作方法

(1)計算按照選定的培養基配方,計算各種成分的用量。

(2)稱量用電子天平或托盤天平稱取各種物質。

(3)熬製將稱好的黃豆粉加入總量2/3的水中,煮沸約30min,用4層紗布過濾;將可溶性澱粉加入少量冷水中調成糊狀,加入煮沸的黃豆粉濾液中,攪拌均勻。

(4)定容繼續小火加熱,準確稱量其餘藥品,加到濾液中攪勻,使其完全溶解,補足水量。注意攪拌防止溢出或焦底。

(5)分裝將培養基小心分裝到各輸液瓶中。裝液量約為容器容積的1/5,裝量保持一致。注意勿汙染瓶口,如有應及時清理幹淨。在每瓶培養基內加入10~13粒小玻璃珠或直徑在0.8cm內的玻璃碎片。

(6)包紮一般以8cm×8cm的8層紗布封口,並用油紙或牛皮紙包紮。注明培養基名稱和日期等。

(7)滅菌0.1MPa壓力下,滅菌30~40min,取出冷卻後,放入無菌室中備用。

2.2接種

(1)接種環境及用具的消毒將試管母種(用報紙包好,避免紫外線照射)、液體培養基、接種工具、酒精燈、火柴等用品放入接種箱內或超淨工作台上。接種前必須對接種室、接種箱或超淨工作台進行消毒,以保證接種操作是在嚴格無菌的條件下進行的。

(2)接種方法與轉管技術相似,都必須嚴格遵守無菌操作規程。不同的是:液體菌種的接種,每瓶需從斜麵母種中挑取4~5塊黃豆粒大小的菌塊,並使母種氣生菌絲一麵向上懸浮於液麵,每支母種可接3~4瓶;或接入1%~5%的液體菌種。

2.3搖瓶培養

在24~26℃下避光、靜止培養1~2d後,置搖床上培養。培養液體菌種,用搖瓶機(也稱搖床)來培養。搖瓶機有旋轉式和往複式兩種,一般多用往複式。往複式搖床的振蕩頻率為80~100次/min,振幅8~10cm;旋轉式搖床,利用旋轉的偏心軸使托盤擺動,偏心距為4cm,振蕩頻率為150~220r/min。如果用旋轉式搖床,旋轉速度不宜過大,否則菌絲球較大,表麵絨毛狀菌絲少,不適於作菌種使用。

搖床室溫度控製在24~26℃,培養3~4d即可。培養結束時,因菌種不同,培養液出現不同的色澤。金針菇的培養液呈淺黃色、清澈透明、液體中懸浮著大量小菌絲球,並伴有香味時,即可判斷培養結束。如果培養液混濁,大多是細菌汙染所致。

2.4菌種檢驗

液體菌種培養結束,必須經過檢驗才可以用於生產。常用的檢驗方法有:感觀檢驗、取樣檢驗。

2.4.1感觀檢驗

(1)看將樣品靜置桌上觀察。

(2)旋手提樣品輕輕旋轉一下,觀察菌絲體的特點。

(3)嗅在旋轉樣品後打開瓶蓋嗅氣味。培養好的優質液體菌種,均具有菌蕈特有芳香氣味;而染雜菌的培養液則散發出酸、甜、黴、臭、餿等各種異味。

2.4.2取樣檢驗

可取液體菌種進行稱重檢查和黏度檢查;生長力測定和出菇試驗;化學檢驗包括測pH、含糖量和含氧量等;顯微檢查包括細胞分裂狀態觀察、普通染色和特殊染色;還可用PDA斜麵進行檢查,置25℃的條件下24~48h可判斷其檢測結果。