【知識目標】了解菌種保藏常用的培養基；熟悉菌種保存的條件；掌握菌種保藏方法及注意事項。
【技能目標】會製作保藏種培養基；會2～3種菌種保藏方法。
【德育目標】培養學生認真嚴謹、求真務實的科學態度和一絲不苟、勤奮鑽研的工作精神。
【生產任務】
保藏現有食用菌試管母種。
1生產計劃
1.1確定菌種保藏培養基的配方
1.2菌種保藏前的準備工作
（1）設備設施手提式高壓滅菌鍋、接種箱或超淨工作台、恒溫培養箱、冰箱。
（2）用品用具試管、棉塞、接種工具、無菌鑷子、固體石蠟或膠塞、酒精燈、坩堝、試管架或試管筐、塑料薄膜、牛皮紙、捆紮繩、標簽、火柴、幹燥器等。
（3）材料試管母種，增加了氮源和磷酸二氫鉀的保種培養基，木屑、麩皮或麥粒培養基等。
2實施任務
菌種保藏的工藝流程：菌種保藏培養基的製備→接種→培養→保藏。
2.1菌種保藏培養基的製備
（1）PDA、馬鈴薯培養基製作方法同前斜麵培養基的製作。
（2）麩皮保種培養基選取新鮮麩皮，過60目篩去粗粒；將麩皮和水按1∶1拌勻，試管裝量1/3；0.15MPa滅菌30min。
（3）木屑培養基將配方中各物質按比例混勻，裝入18mm×180mm試管中，0.15MPa滅菌1.5h。
（4）麥粒培養基去除小麥粒中的幹癟粒和雜質，浸泡12～15h，加水煮沸約20min（麥粒脹而不破），攤開晾去多餘水分，使麥粒含水量達25%；再拌入碳酸鈣和石膏粉，試管裝量1/3；0.15MPa滅菌1.5h。
2.2接種
（1）接種環境及用具的消毒將試管母種（用報紙包好，避免紫外線照射）、斜麵培養基、木屑、麩皮和麥粒培養基、接種工具、酒精燈、火柴等用品放入接種箱內或超淨工作台上。接種前必須對接種室、接種箱或超淨工作台進行消毒，以保證接種操作是在嚴格無菌的條件下進行的。
（2）接種方法同轉管技術。
2.3培養
在菌種適宜的溫度和濕度下，避光培養。培養過程中注意檢查汙染情況，及時清除並處理汙染菌種。
2.4保藏
2.4.1斜麵低溫保藏法
菌絲長至斜麵2/3時，選擇菌絲生長粗壯整齊的母種試管，將試管口的棉塞用剪刀剪平，利用酒精燈在坩堝裏熔化固體石蠟，用以密封試管口。也可外紮一層塑料薄膜，或在無菌條件下換膠塞。最後將試管斜麵朝下，置於4℃冰箱保存。
2.4.2木屑保藏法
菌絲長至1/2時，剪平試管口棉塞，用蠟密封，包紮牛皮紙，置於4℃冰箱保存。
2.4.3麩皮保藏法
菌絲長滿麩皮後，將菌種置幹燥器中放置一個月，無菌條件下換膠塞，置冰箱中或低於20℃幹燥條件下保存。
2.4.4麥粒保藏法
菌絲長滿基質後，將菌種置幹燥器中放置一個月，無菌條件下換膠塞，置冰箱中或低於20℃幹燥條件下保存。
2.4.5液體石蠟保存法
是把液體石蠟灌注在菌種（菌絲體菌種）斜麵上來保藏菌種。使菌種與空氣隔絕，抑製細胞代謝，同時防止培養基中水分的蒸發，可延長保藏時間。
選用化學純液體石蠟，分裝於三角瓶中，塞好棉塞並包紙，於0.1MPa下滅菌1h。放40℃恒溫箱中，以蒸發其中水分，至石蠟油完全透明為止。進行雜菌檢測後方可使用。按照無菌操作的方法把液體石蠟注入待保藏的試管菌種中，注入量以高出培養基斜麵頂端1～1.5cm為宜，塞上橡皮塞，用石蠟密封，直立於低溫幹燥處保藏。