一、高效液相色譜流程
貯器1中的流動相溶劑被泵2吸入，然後輸出，經壓力和流量測量(4)後導入進樣器(5)。被分析樣品由進樣器處注入，並隨流動相一起依次通過保護柱(6)(非必需部件)、分離柱(7)後進入檢測器(8)。檢測信號用微處理機(10)采集和進行數據處理，或用積分儀(或記錄儀)(11)記錄色譜峰麵積和色譜圖。如果不是分析而是製備目的，可以使用餾分收集器(12)。遇到複雜樣品可以采用梯度淋洗操作(借助於梯度控製器3)，使樣品各組分均得到最佳分離，而又不致花費更多的時間。整個儀器也可使用一台微處理機操縱，包括數據處理和操作控製。
二、高效液相色譜裝置部件
（一）輸液泵
泵是一套高效液相色譜設備中重要的單元部件，是驅動溶劑和樣品通過色譜分離柱和檢測係統的高壓源，其性能好壞直接影響整個儀器和分析結果的可靠性。用於分析目的的泵應當流量穩定、耐高壓(30～60MPa)、耐各種流動相，如有機溶劑、水和緩衝液。目前，商品高效液相色譜儀普遍采用體積小、方便多用的往複泵和隔膜泵。
（二）色譜柱
色譜柱是色譜儀的心髒，色譜的核心問題分離是在色譜儀中進行的。為適應不同的分離分析要求，色譜柱有不同的柱型，內裝不同性質的填料。最常使用的色譜柱是10～30cm長，2～5mm內徑的內壁拋光的不鏽鋼管柱，內裝5～10μm高效微粒固定相，采用高壓勻漿裝柱技術填充。相同柱長的效率遠遠高於氣相色譜，例如2mm細內徑柱、250cm長的5μm YWG矽膠柱柱效可達20000理論塔板數，而5μm YQG—CH反相鍵合相柱效可達14000理論塔板數。高效色譜柱的填充需要特殊的設備和技術，各色譜儀和色譜產品廠家均提供預裝柱。
（三）進樣器
待分析樣品從柱頭進樣器引入的方式可分為注射器進樣、停流進樣、閥進樣和自動進樣器進樣四種，其中注射器進樣和閥進樣最為常用。在10MPa以下的進口壓力可用1～10μL的微量注射器進樣，一般能獲得最高的柱效率，但進樣重複性不佳，特別是在較高壓力下。閥進樣時進樣體積可變也可以固定，但柱效會受些影響。自動進樣器適合於多樣品重複操作，便於用微處理機控製，實現自動化。
（四）檢測器
被分析組分在柱流出液中濃度的變化可通過檢測器轉化為光學的或電學的信號而被檢出，從而完成定性定量任務。HPLC最常用的檢測器包括示差折光檢測器（RI）、紫外檢測器（UV）、熒光檢測器和電化學檢測器。示差折光檢測器是通過測量流出物折射率的變化對組分的響應值進行檢測，是通用型的檢測器，但靈敏度較低，適合於常量分析。紫外吸收檢測器是HPLC中應用最早而又最廣泛的檢測器之一，它不僅有比較高的靈敏度，而且對環境溫度、流動相的波動和組成變化不太敏感，無論等度洗脫或梯度洗脫都可使用，但它隻能檢出在特定波長下有吸收的化合物。紫外分光光度檢測器可適用較寬的範圍，可以彌補單波長吸收檢測器選擇性太強的缺陷，是一種應用麵較廣的高效液相色譜檢測器。近年來發展的二極管陣列紫外檢測器，可以對柱中流出物進行不停流的瞬間的波長快速掃描，通過微處理機控製，獲得光吸收、波長和時間的三維色譜或光譜圖，從而取得更多的定性和色譜峰純度鑒定的信息，是一種比較理想的檢測器。熒光檢測器可測量某些樣品在紫外光激發下所發射的熒光，是一種選擇性好、靈敏度高的檢測器，它比紫外吸收檢測器的靈敏度要高10～1000倍。用來檢測能發出熒光的化合物例如芳香族化合物，以及本身雖然不能產生熒光，但含有適當的官能團，可與熒光試劑反應生成熒光衍生物的物質。電化學檢測器用來檢測一些沒有紫外吸收或不能發出熒光但具有電活性的物質，目前已研製出了電導、電位、庫侖和安培等多種不同類型的電化學檢測器。電化學檢測器的靈敏度高；選擇性好，可測量大量非電活性物質中的痕量電活性物質；線性範圍寬，3～4個數量級。