正文 第八節 畜禽胸腺製劑(2 / 2)

(6)除熱原把沉澱溶於無熱原蒸餾水中,用1∶12的鹽酸調節pH至5.0,然後加入等量乙醚,劇烈攪拌1h左右。用離心機離心,1500r/min 20min,吸取離心管中層清液,再用等量乙醚處理2次。合並清液,加入5倍量冷丙酮,攪拌均勻,靜置2~3h,濾除丙酮液,收集丙酮粉。測定熱原合格後,製劑調整含量至2.5mg/mL,無菌灌封,即得胸腺素注射液,pH 6~7.5。

二、胸腺肽的提取

胸腺肽是多種胸腺多肽類物質的總稱,是從冷凍的小牛胸腺中提取出的混合肽類藥物製劑。SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分析研究表明,胸腺肽中主要組分是分子質量為9600u和7000u左右的兩類多肽。對熱較穩定,加溫至80℃時生物活性不降低。

胸腺肽可調節細胞免疫功能,運用於原發和繼發性免疫缺陷病以及因免疫功能失調所引起的疾病,對腫瘤有很好的輔助治療效果,也用於再生障礙性貧血、急慢性病毒性肝炎等。無過敏反應和不良反應。

製備胸腺肽的髒器原料為小牛胸腺,多肽分子質量小於10000u的產品稱為小牛胸腺肽。收率大約為3g/kg胸腺。國內產品多為注射用胸腺肽,微黃色或類白色的無菌凍幹製劑。標示量為95%~120%,規格有3mg/支、4mg/支或8mg/支產品。

(一)製備工藝

1.工藝流程

2.工藝要點

(1)原料處理取-20℃冷藏的小牛胸腺,除去脂肪、筋膜等非胸腺組織,再用冰冷無菌蒸餾水衝洗,置於絞肉機中絞碎。所用器具要經滅菌處理。

(2)製勻漿、提取將絞碎胸腺與冷重蒸餾水按1∶1的比例混合,置於10000r/min的勻漿器中勻漿1min,製成胸腺勻漿,浸漬提取,溫度應在10℃以下,並放置-20℃環境下冰凍冷藏48h。

(3)變性、離心、過濾將凍結的勻漿液融化後,置水浴上,在攪拌下加溫至80℃,保持5min,迅速降溫,放置-20℃以下冷藏2~3d。然後取出融化,以5000r/min離心40min,溫度2℃。收集上清液,除去沉渣,用濾紙漿或微孔濾膜(0.22μm)減壓抽濾,得澄清液。

(4)超濾、提純、分裝、凍幹將濾液用截留分子質量為10000u以下的超濾膜進行超濾,收取分子質量10000u以下的活性多肽,得精製液。置-20℃冷藏。經檢驗合格,加入3%甘露醇作賦形劑,用微孔濾膜除菌過濾,分裝,冷凍幹燥即得注射用胸腺肽。

(二)胸腺肽的質量標準與檢驗方法

胸腺肽的質量標準為:每1mL中含多肽不得少於5mg,其檢測方法參考《國家藥品標準》2003年版第4卷第6期17~19頁。