一、實訓目標
（1）了解紫外-可見分光光度計的結構和工作原理。
（2）學會紫外-可見分光光度計的使用方法。
二、實訓原理
1.儀器結構
紫外-可見分光光度計主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、記錄儀、顯示係統和數據處理係統等部分組成。
2.工作原理
通過被測物質在紫外光區的特定波長處或一定波長範圍內的吸光度，對該物質進行定性和定量分析。
三、實訓內容與步驟
1.吸收係數測定
按各品種項下規定的方法配製供試品溶液，在規定的波長測定其吸光度，並計算吸收係數，應符合規定範圍。
2.含量測定
（1）對照品比較法按各品種項下規定的方法，分別配製供試品溶液和對照品溶液，對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分標示量的（100±10）%以內，用同一溶劑，在規定的波長處測定供試品溶液和對照品溶液的吸光度。
（2）吸收係數法按各品種項下配製供試品溶液，在規定的波長及該波長±3nm處測定其吸光度，按該品種在規定條件下給出的吸收係數計算含量。
采用吸收係數法應對儀器進行校正後測定，如為測定新品種的吸收係數，需按後列“吸收係數測定法”的規定進行。
（3）計算分光光度法按《中國藥典》規定，計算分光光度法一般不宜用於含量測定，對於少數采用計算分光光度法的品種，應嚴格按各品種項下規定的方法進行。用本法時應注意：有一些吸光度是在待測成分吸收曲線的上升或下降陡坡處測定，影響精度的因素較多，故應仔細操作，盡量使供試品和對照品的測定條件一致。若該品種不用對照品，如維生素A測定法（見《中國獸藥典》附錄），則應在測定前對儀器作仔細的校正和檢定。
四、注意事項
（1）實驗中所用的量瓶和移液管均應經檢定校正、洗淨後使用。
（2）使用的石英吸收池必須潔淨。當吸收池中裝入同一溶劑，在規定波長測定各吸收池的透光率，如透光率相差在0.3%以下者可配對使用，否則必須加以校正。
（3）取吸收池時，手指拿毛玻璃麵的兩側。裝樣品溶液的體積以池體積的4/5為度。
（4）測定前應先檢查所用的溶劑在測定供試品所用的波長附近是否符合要求。
（5）供試品溶液的濃度，除各品種項下已有注明者外，供試品溶液的吸光度以在0.2～0.7為宜，吸光度讀數在此範圍誤差較小，並應結合所用儀器吸光度線性範圍，配製合適的讀數濃度。
五、考核標準
優秀:準確、熟練地完成操作環節，操作總體正確率在90%以上。筆試和回答問題準確率高，思路清晰。總體答對率在90%以上。
合格:能完成操作環節，操作基本規範，操作正確率在60%以上。筆試和回答問題準確率尚可，思路較清晰。總體答對率在60%以上。
不合格:操作不規範出現差錯，達不到合格的要求。筆試和回答問題不準確。總體答對率在60%以下。