一、實訓目標
（1）學會梯度pH萃取法和提取分離大黃中各種蒽醌苷元的原理及實驗方法。
（2）了解蒽醌類化合物的顏色反應及色譜檢查方法。
二、實訓原理
本實驗是根據大黃中的蒽醌類苷元成分能溶於氯仿的性質，采用氯仿提取，又利用羥基蒽醌類化合物酸性強弱不同，用pH梯度法進行分離。具有羧基或多個β位酚羥基的蒽醌可溶於5%碳酸氫鈉溶液；具有一個β位酚羥基的蒽醌可溶於5%碳酸鈉溶液；隻具有α位酚羥基的蒽醌，酸性弱，隻溶於氫氧化鈉溶液。
三、主要儀器及試藥
儀器：分液漏鬥、滲濾筒等。
試藥：大黃、乙醇、NaHCO3、Na2CO3等。
四、實訓內容與步驟
1.大黃中醌類化合物的提取與分離
2.顏色反應及色譜檢查
（1）取以上各產物少量，分別於試管中，加5%NaOH溶液數滴，觀察顏色變化。
（2）取以上各產物少量，分別於試管中加濃H2SO4數滴，觀察顏色變化。
（3）取以上各產物少量，分別於試管中，加少量甲醇溶解，再滴加醋酸鎂的甲醇溶液數滴，觀察顏色變化。
（4）薄層色譜
吸附劑：矽膠G板，105℃，活化2h。
展開劑：氯仿-乙酸乙酯-醋酸(4∶1∶0.2)。
檢品：各產物的乙醇液。
顯色：可見光下觀察色斑，紫外燈下觀察熒光斑點。
五、注意事項
（1）大黃中蒽醌的存在形式以結合狀態為主，遊離狀態的僅占小部分，為了提高遊離蒽醌的得率，在提取過程中采取酸水解和萃取相結合的方法。
（2）兩相萃取時，不可猛力振搖，隻能輕輕旋轉搖動，並經常打開活塞放氣。搖動時間可長一些，以免造成嚴重乳化現象而影響分層，溶劑與水溶液應保持一定量的比例，但親水性較大的成分不易轉入有機溶劑層時，須增加萃取次數，或改變萃取溶劑。氯仿液用水洗時，尤其易乳化，可加入氯化鈉鹽析，使兩層分離。
六、考核標準
優秀：操作熟練、規範；熟悉醌類化合物提取的原理、方法；能熟練完成大黃中大黃醌類化合物的提取分離過程，熟悉其顏色反應。
合格：操作基本熟練、規範；了解醌類化合物提取的原理、方法；能基本完成大黃中大黃醌類化合物的提取分離過程，了解其顏色反應。
不合格：操作不熟練、不規範；不了解醌類化合物提取的原理、方法；不能完成大黃中大黃醌類化合物的提取分離過程。