按照GB 12392—1990《蔬菜、水果及其製品中抗壞血酸（維生素C）的測定方法》進行。
在測定維生素C的國標方法中，熒光法為測定食物中維生素C含量的第一標準方法，2，4－二硝基苯肼法作為第二法。
一、熒光法
1.原理
樣品中還原型抗壞血酸經活性炭氧化成脫氫型抗壞血酸後，與鄰苯二胺（OPDA）反應生成具有熒光的喹喔啉,其熒光強度與脫氫抗壞血酸的濃度在一定條件下成正比，以此測定食物中抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的總量。
脫氫抗壞血酸與硼酸可形成複合物而不與OPDA反應，以此排除樣品中熒光雜質所產生的幹擾。本方法的最小檢出限為0.022g/mL。
2.適用範圍
適用於蔬菜、水果及其製品中總抗壞血酸的測定。
3．儀器
（1）實驗室常用設備。
（2）熒光分光光度計或具有350nm及430nm波長的熒光計。
（3）打碎機。
4．試劑
本實驗用水均為蒸餾水，試劑不加說明均為分析純試劑。
（1）偏磷酸－乙酸溶液稱取15g偏磷酸，加入40mL冰乙酸及250mL水，攪拌，放置過夜使之逐漸溶解，加水至500mL。4℃冰箱可保存7～10d。
（2）0.15mol/L硫酸取10mL硫酸，小心加入水中，再加水稀釋至1200mL。
（3）偏磷酸－乙酸－硫酸溶液以0.15mol/L硫酸液為稀釋液，其餘同偏磷酸-乙酸溶液配製。
（4）50％乙酸鈉溶液稱取500g乙酸鈉（CH3COONa·3H2O），加水至1000mL。
（5）硼酸-乙酸鈉溶液稱取3g硼酸，溶於100mL 50%乙酸鈉溶液中。臨用前配製。
（6）鄰苯二胺溶液稱取20mg鄰苯二胺，於臨用前用水稀釋至100mL。
（7）0.04％百裏酚藍指示劑溶液稱取0.1g百裏酚藍，加0.02mol/L氫氧化鈉溶液，在玻璃研缽中研磨至溶解，氫氧化鈉的用量約為10.75mL，磨溶後用水稀釋至250mL。
變色範圍：pH1.2紅色
pH2.8黃色
pH＞4.0藍色
（8）活性炭的活化加200g炭粉於1L 1+9鹽酸中，加熱回流1～2h，過濾，用水洗至濾液中無鐵離子為止，置於110～120℃烘箱中幹燥，備用。
（9）標準抗壞血酸標準溶液（1mg/mL）：準確稱取50mg抗壞血酸，用偏磷酸-乙酸溶液溶於50mL容量瓶中，並稀釋至刻度。
抗壞血酸標準使用液（100μg/mL）:取10mL抗壞血酸標準液，用偏磷酸-乙酸溶液稀釋至100mL。定容前測試pH，如其pH＞2.2時，則用偏磷酸-乙酸-硫酸溶液稀釋。
標準曲線的製備：取下述“標準”溶液（抗壞血酸含量10μg/mL）0.5、1.0、1.5和2.0mL標準係列，取雙份分別置於10mL帶蓋試管中，再用水補充至2.0mL。
5.操作步驟
（1）樣品製備全部實驗過程應避光。
稱取100g鮮樣，加100g偏磷酸-乙酸溶液，倒入打碎機內打成勻漿，用百裏酚藍指示劑調試勻漿酸堿度。如呈紅色，即可用偏磷酸-乙酸溶液稀釋，若呈黃色或藍色，則用偏磷酸-乙酸-硫酸溶液稀釋，使其pH為1.2。勻漿的取量需根據樣品中抗壞血酸的含量而定。當樣品液含量在40～100μg/mL之間，一般取20g勻漿，用偏磷酸-乙酸溶液稀釋至100mL，過濾，濾液備用。
（2）氧化處理分別取樣品濾液及標準使用液各100mL於帶蓋三角瓶中，加2g活性炭，用力振搖1min，過濾，棄去最初數(mL)濾液，分別收集其餘全部濾液，即樣品氧化液和標準氧化液，待測定。