六、彈性蛋白的顯示法
彈性蛋白（elastin）又稱無定形彈性蛋白（amorphous elastic）。是一種橡膠樣的彈性體。在彈性組織中，彈性蛋白極為豐富。項韌帶、脊柱弓間韌帶彈性蛋白可達70％～80%，軟骨組織亦存在一定量的彈性蛋白。
顯示彈性組織的方法很多，但都其組化機製不明。
（一）Moore法
此法主要在於成功的製得染液，一批好的染液可保存1年左右。
染色步驟：
（1）適用於各種固定液，石蠟切片。
（2）切片順序入水。
（3）用酸性高錳酸鹽（47.5ml 0.5%高錳酸鉀水溶液加2.5ml 3%H2SO4）處理2～5分鍾。
（4）水洗。
（5）用1%草酸漂白1分鍾。
（6）水洗，再用70%酒精漂洗。
（7）用Weigert染8～24小時（根據結果以確定染色時間，因每批染液變動很大）。
（8）用酸酒精（1%）洗，直到有彈性組織著色為止。
（9）水洗。
（10）用苯酚藏紅或中性紅複染。
染液的配製：①將500ml的蒸餾水放入大蒸發皿中加熱至近沸。②將2.5g甲紫、2.5g堿性品紅及1.0g糊精混合後溶解於熱水。③加入10.0g間苯二酚，煮沸。④沸騰時慢慢加入62ml新配的30%氯化鐵（B.D.H.無水）水溶液，用玻棒隨時攪拌。混合麵保持沸騰，但不能過猛。再繼續煮2分鍾，使沉澱變粗。⑤冷卻，用布氏漏鬥過濾。⑥用水洗沉澱物，直至不再洗出顏色為止。⑦沉澱物放56℃過夜烘幹。⑧從濾紙取下沉澱物，放入550ml加有1ml濃HCl的無水酒精中。浸入熱水浴30分鍾使之溶解。冷後過濾。⑨加入19ml濃HCl，放置24～48小時後使用。顏色應為深綠藍色。冰箱保存備用。⑩染色時取30ml 70%酒精加36ml貯備液（必要時此比例可改變）。
（11）水洗，脫水，透明，封固於適宜合成樹脂。
結果：彈性纖維顯示深藍黑色，核顯紅花色。
（二）顯示彈性組織的甲苯二酚新品紅法
染色步驟：
（1）各種固定液固定均可，石蠟切片。
（2）切片順序入水。
（3）於37℃染15分鍾。
試劑配製：2g新品紅（C。1.678）及4g甲苯二酚（高度純淨）加入200ml蒸餾水，煮沸5分鍾。加25ml30%氯化鐵再煮沸5分鍾。冷卻，收集濾液，將其溶於100ml 95%酒精。此液直接用於染色。
（4）用更換三次的70%酒精分化，每次15分鍾。
（5）可用1%藏紅水溶液或Van Gieson染色液進行複染，後一法可用於分化之前或分化之後。
（6）脫水，透明，用合成膠封固。
結果：彈性纖維呈深紫色。
（三）顯示彈性組織的萬-魏氏染色
染色步驟：
（1）各種固定液均可，石蠟切片。
（2）切片順序入水。
（3）用Verhoeff染液染至黑色（15分鍾）。
染色液的配製：10ml 5%新配、未成熟的蘇木精酒精溶液，4ml 10%新配氯化鐵水溶液及4ml Lugol碘液，依次混合。
（4）水洗。
（5）用2%氯化鐵分化，直至隻有彈性纖維及核著色。
（6）蒸餾水漂洗。
（7）用Van Gieson染液複染30～60秒。
染色液的配製：10ml 1%酸性複紅，90ml苦味酸飽和水溶液，100ml蒸餾水，煮沸3分鍾使之成熟。
（8）蒸餾水漂洗。
（9）脫水，透明，封固。
結果：彈性纖維呈黑色。膠原纖維呈紅色。背景結構及細胞呈黃色。
注意：複染時間不宜過長，因苦味酸能將著色分化，細微的彈性纖維不能用此法複染。
七、脂類的顯示法
脂類分成單純脂類如脂肪，複合脂類如磷脂、脂蛋白及糖脂，衍生脂類如脂肪酸、膽固醇及膽固醇脂。脂肪主要見於脂肪細胞及脂肪變性的細胞。脂類的固定：通常均用含甲醛液的固定劑，如甲醛-鈣液（1%CaCl2溶於10%甲醛溶液）既能保持中性，也利於保持磷脂，但不能保留腦磷脂。一般用該液固定於室溫6小時或4℃24小時，固定時間過久可致脂肪酸增多使脂類水解，而破壞磷酸甘油酯等。也可用2%醋酸鈣-甲醛溶液固定，同樣有緩衝液作用。脂類的切片：一般均采用冷凍切片或不經固定者用恒冷箱切片。
（一）鋨酸法顯示非飽和脂質
染色步驟：
（1）鈣-甲醛溶液短期固定或不經固定者采用恒冷箱切片，12～15μm。
（2）切片經漂浮水洗，或不用貼片劑貼裝於玻片，水洗，晾幹防脫落。
（3）入1%鋨酸水溶液，密封，室溫1小時。
（4）切片換水洗5次，每次2分鍾。貼裝切片可用流水衝洗。
（5）切片在載物片上用濾紙沾幹。
（6）水溶性封固劑封固，或入二氧六環換兩次，每次4分鍾，略搖蕩脫水，入四氯化碳透明，換兩次液，合成樹脂封固。
結果：非飽和脂類呈棕黑色，飽和脂類及膽固醇等無反應。
（二）澳－蘇丹黑法顯示脂類（Bayliss及Adams，1972）
染色步驟：
（1）恒冷箱切片後固定於鈣－甲醛溶液1小時，或短期固定後冷凍切片。
（2）切片直接附於玻片後晾幹。
（3）切片浸入2.5%溴水溶液，室溫30～60分鍾，在隔離通風櫃內操作。
（4）切片經水漂洗後，在0.5%偏重亞硫酸鈉（Sodiummetabisulfite，Na2S2O5）水溶液內約漂洗1分鍾，至溴的黃色從切片洗除，偏重亞硫酸鈉可用亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉或硫代硫酸鈉或鉀鹽的稀釋水溶液代替。
（5）蒸餾水充分漂洗，換洗4～5次即可。
（6）換70%酒精漂洗。
（7）在蘇丹黑液內染色10分鍾，略將切片在染色時予以搖蕩。
染液的配製：蘇丹黑B（Sudan black B）300mg，70%酒精100ml。先將染液攪拌（可用磁攪拌器）2小時，然後裝入封緊瓶內過夜。用時過濾，但勿攪動瓶底殘餘染料。染液可重複使用並保存4周。
（8）70%酒精漂洗5～10秒，以分色。分色時應予以攪動，然後水洗。
（9）如需要，此步可予作核的複染。
（10）水洗後以水溶劑封固。
結果：脂類顯示深藍灰色及黑色。
注：如不需染膽固醇，第3～5步驟可略去。
（三）溴-丙酮-蘇丹黑法顯示磷脂（Bayliss High，1981）
染色步驟：
（1）固定與切片：同澳－蘇丹裏法。
（2）2.5%溴水溶液內室溫處理30分鍾。
（3）0.5%焦亞硫酸鈉水溶液內漂洗1分鍾。
（4）充分水洗，然後將切片晾幹。
（5）於4℃在無水丙酮內萃取中性脂質20分鍾。
（6）蘇丹黑B染色如上法。
結果：此法僅限於磷脂染色。
（四）油紅O法顯示脂類（Catalano及Lillie，1975）
染色步驟：
（1）固定與切片同上法。
（2）切片經蒸餾水漂洗，直接貼玻片上晾幹。
（3）入60%異丙醇漂洗。
（4）入油紅O染色15分鍾。