苦參堿雙敏感結腸定位小丸的製備及體外釋放研究
製劑與炮製
作者：張勇鋼 揭晶
[摘要] 目的：製備苦參堿雙敏感結腸定位小丸，並研究影響其質量的因素和評價其結腸定位釋藥的效果。方法：以羧甲基魔芋膠為主要載體材料，製備酶敏感丸芯，再以丙烯酸樹脂Ⅱ，Ⅲ包衣，製成苦參堿雙敏感結腸定位小丸；通過體外釋放試驗和包封率測定，對影響製劑釋藥的處方和工藝進行單因素考察。結果：苦參堿雙敏感結腸定位小丸的優化製備工藝條件為FeCl3質量濃度為4.0 g·L-1，殼聚糖質量濃度為3.0 g·L-1，羧甲基魔芋膠質量濃度為20 g·L-1，混合膠漿pH為3，包衣增重為7%；在模擬全消化道介質中，苦參堿累積釋放接近100%，時滯為7 h。結論：所製苦參堿雙敏感結腸定位小丸在體外具有良好的結腸定位效果。
[關鍵詞]苦參堿；雙敏感；結腸定位；小丸
口服結腸定位給藥係統（OCDDS）可減少藥物在胃腸道上段的釋放，運送到盲、結腸部位後開始大量釋放藥物，可用於腸道疾病（如結腸炎症）的局部治療及改善易受胃、腸道上段酶破壞的藥物口服吸收，目前實現口服藥物結腸定位釋放的原理主要有時滯、pH敏感、壓力控製、酶降解等4種[1]。但單一原理的OCDDS往往存在著結腸定位效果不夠理想的問題。羧甲基魔芋膠（carboxymethyl konjac glucomannan， CMKGM）具有可被結腸內微生物酶降解的特性[2]。丙烯酸樹脂Ⅱ，Ⅲ是常用的pH敏感包衣材料。苦參堿 （matrine，Mat）具有抗炎、抗肝纖維化、免疫抑製、抗心律失常或對抗高血壓血管重構、抗腫瘤等作用[3]， 有研究表明其可用於治療慢性結腸炎等結腸內疾病[4-5]。苦參堿口服消除半衰期較短，常需每日口服 3～4次，給藥次數頻繁，且對胃腸道刺激較大[6]，常伴有頭暈、惡心、嘔吐、便秘等副作用[4]。如果能使苦參堿主要在結腸內釋放，用於治療結腸部位疾病，則既可減少病人服藥次數，又可降低毒副反應發生概率。因此，本實驗將苦參堿以羧甲基魔芋膠、殼聚糖為主要輔料製成小丸，再用丙烯酸樹脂Ⅱ，Ⅲ包衣，製成苦參堿的pH、酶雙敏感型結腸定位小丸，通過單因素試驗考察影響小丸性能指標的主要因素，優化工藝參數，並在模擬體內胃腸道環境中測定小丸體外釋放度，評價其結腸定位效果。
1材料
TU-1810型紫外-可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）；RC-6D型智能型溶出儀（天津市新天光分析儀器技術有限公司）；TGL-16G型離心機（上海市安亭科學儀器廠）；XT-86型小型包衣機（上海黃海藥檢儀器有限公司 ）；BS124S電子分析天平（德國Startorious公司）；苦參堿對照品（中國食品藥品檢定研究院，純度≥99%）；苦參堿原料藥（慶陽康貝利通生物技術有限責任公司，純度≥98%）；β-甘露聚糖酶（上海丹尼悅有限公司）；羧甲基魔芋膠（自製，醚化度為0.453）；殼聚糖（相對分子質量20萬，脫乙酰度95%，浙江澳興生物科技有限公司）；丙烯酸樹脂Ⅱ，Ⅲ（山東聊城安信藥用輔料有限公司）；其他試劑均為分析純。
2方法
2.1酶敏感丸芯製備
配製一定濃度的羧甲基魔芋膠水溶液，稱取苦參堿（與羧甲基魔芋膠比例為2∶1）加入其中攪拌成混合液，將此混合液用注射器（16號針頭）滴加至10倍量（體積）的含FeCl3和殼聚糖的混合膠漿中，膠凝化9 h，濾過收集小丸，水洗丸粒後於37 ℃烘箱中幹燥，再於50 ℃烘箱中熱處理12 h即得。
2.2pH敏感包衣丸製備
取上述酶敏感丸芯，置小型包衣機內，噴入包衣液（含丙烯酸樹脂Ⅱ，Ⅲ分別為1.2%，4.8%，含鄰苯二甲酸二丁酯10%的無水乙醇溶液），在38 ℃左右的熱風下包衣，完成後固化約4 h，即得苦參堿的pH、酶雙敏感型結腸定位小丸。
2.3酶敏感丸芯製備工藝影響因素試驗
采用單因素試驗法對酶敏感丸芯製備工藝的影響因素進行研究，考察的因素水平分別是混合膠漿的pH（pH 1.0，2.0，3.0，4.0，5.0），混合膠漿中殼聚糖的質量濃度（0，1.5，3.0，6，12 g·L-1），膠漿中FeCl3質量濃度（1.0，2.0，4.0，8.0，16 g·L-1），羧甲基魔芋膠溶液質量濃度（5，10，15，20，25 g·L-1）。實驗過程中，各因素固定水平分別為凝膠液pH 3，膠漿液中FeCl3質量濃度5 g·L-1，羧甲基魔芋膠溶液質量濃度20 g·L-1，殼聚糖質量濃度3.0 g·L-1。上述研究中均以苦參堿包封率和苦參堿小丸體外釋放度為評價指標。
2.4pH敏感包衣丸製備工藝影響因素試驗
按2.3項研究中得出的最佳工藝參數製備酶敏感丸芯，按2.2項下方法製備包衣層增重為4%，7%，10%的pH敏感包衣丸，以苦參堿體外釋放曲線特征做評價指標。
2.5包封率測定
稱取適量苦參堿小丸於研缽中研碎，粉末全部轉移至100 mL量瓶中（研缽用0.1 mol·L-1鹽酸洗滌，洗液並入量瓶），60 ℃水浴5 min，超聲震蕩10 min後用0.1 mol·L-1鹽酸定容、搖勻，離心後取上清液1 mL，於10 mL量瓶中用0.1 mol·L-1鹽酸定容、搖勻。以酸性染料比色法測定苦參堿含量[7]。按下式計算包封率。包封率=小丸中苦參堿量/小丸製備時投入苦參堿總量×100%。