1.9統計學處理 采用SPSS 19.0軟件,數據以±s表示,采用One-Way ANOVA分析各組間差異,P[14]。其中,氧化應激是帕金森病發病的核心因素[15],抗氧化治療成為治療帕金森病確實有效的方案之一[16]。蓽茇具有廣泛的藥理活性和較強的抗氧化能力[17]。鑒於PD發病機製複雜,而中藥有效部位的多成分具有協同作用和整體調節等優勢,本實驗選擇含有多種酰胺類生物堿的蓽茇總生物堿有效部位作為研究對象,考察其對6-OHDA致大鼠PD模型損傷的DA能神經元的保護作用,並從抗氧化作用來探討其可能的保護機製。
在大鼠的行為學評價方麵,通過外周給予DA受體激動劑APO可誘發大鼠向健側產生旋轉行為,記錄一定時間內APO誘導的旋轉次數,可以對PD的損傷程度進行量化,作為判斷模型成功與否以及藥物治療作用的標準[18]。本實驗結果表明,采用腦立體定位注射6-OHDA製備紋狀體單側毀損的PD大鼠,在APO誘導後出現明顯的旋轉行為,且在轉棒上的滯留時間縮短,該行為與大鼠黑質TH陽性神經元的損傷以及紋狀體內DA含量的減少程度有關[19]。通過TH免疫組化染色顯示了PD大鼠模型中腦黑質TH陽性細胞及紋狀體中TH陽性纖維表達減少,證明6-OHDA單側紋狀體注射造成大鼠黑質大量DA能神經元脫失,因而經黑質-紋狀體通路投射到紋狀體的DA神經遞質減少。這一結果與行為學結果一致。PLA幹預6周後,則能明顯改善PD大鼠的行為異常,增加黑質區TH陽性細胞數及紋狀體TH陽性纖維密度,從而推測PLA對DA神經元具有一定保護作用。
研究表明氧化應激和自由基損傷在PD的發病和發展過程中起著重要的作用,正常生物體內存在著SOD,GSH-Px,CAT和GSH等抗氧化酶及非酶係統,在整個防禦體製中,SOD歧化氧陰離子(O2-)為過氧化氫(H2O2),CAT催化分解H2O2為水(H2O)和氧(O2),GSH-Px利用GSH還原H2O2為H2O或醇類化合物,它們相互協調,通過抗氧化以及清除多餘的自由基對機體起保護作用[20-21]。而6-OHDA誘導的PD模型處於氧化應激狀態,抗氧化保護係統SOD,GSH-Px,CAT和GSH等功能異常,導致氧化應激反應增強,氧自由基增多,引起過氧化脂質產物MDA的含量明顯升高[22-23]。而NO作為氧自由基的一種,其神經毒性在PD的發病中起著重要作用,在病理狀態下,NOS過量表達和NO含量升高,致使機體內過氧亞硝基的生成增多,從而誘導細胞的凋亡[24]。本實驗結果表明,6-OHDA誘導的PD大鼠黑質及紋狀體內SOD,GSH-Px,CAT的活力降低,NOS的表達升高,MDA和NO含量升高,GSH的含量降低,說明模型動物的抗氧化能力降低。而PLA幹預後,提高了大鼠黑質及紋狀體內的SOD,GSH-Px,CAT的活力,降低NOS的表達及MDA和NO的含量,升高GSH的含量,表明PLA能提高6-OHDA誘導的PD大鼠抗氧化能力。
綜上所述,經過蓽茇總生物堿治療後,PD大鼠的神經元受損得到一定的修複,行為得到明顯改善,而機體抗氧化能力也明顯提高,說明蓽茇總生物堿對6-OHDA誘導的PD大鼠具有神經保護作用,並且這種保護作用可能與PLA的抗氧化作用有關。
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