2.3.8溶出度的測定分別精密稱取白頭翁總皂苷約20 mg、包合物約60 mg、固體分散體約60 mg各6份，參照2010年版《中國藥典》二部附錄XC第3法（小杯法）測定，置於（37±0.5）℃恒溫的雙蒸水200 mL中，轉速50 r·min-1，藥物接觸溶出介質起計時，分別於0.5，1，1.5，2 h取樣1 mL，同時立即補加等量新鮮溶出介質，取樣的樣品立即過濾，續濾液HPLC分析，計算累積溶出度。
3結果
3.1固體分散體和包合物的紅外檢測
3.1.1固體分散體物理混合物在約3 400，1 640 cm-1分別呈現出白頭翁總皂苷遊離羥基和碳氧雙鍵的特征吸收峰，在約2 900 cm-1呈現出PEG 4000的亞甲基伸縮振動特征吸收峰，整個圖譜顯示出白頭翁總皂苷和PEG 4000 2個圖譜特征峰的疊加。而在包合物的圖譜中，白頭翁總皂苷在約3 400，1 640 cm-1處的特征峰消失，整體顯示出PEG 4000的紅外吸收特征，以上分析說明白頭翁總皂苷與PEG 4000形成了固體分散體。
3.1.2包合物物理混合物在約3 400，2 930，1 100 cm-1分別呈現出更加強烈的羥基、碳氧雙鍵和碳氧單鍵的特征吸收峰，分別都為白頭翁總皂苷和HP-β-CD的特征吸收峰，整個圖譜顯示出白頭翁總皂苷和HP-β-CD 2個圖譜特征峰的疊加。而在包合物的圖譜中，白頭翁總皂苷在約3 400，2 930，1 100 cm-1處的特征峰較物理混合物有明顯減小，整體顯示出HP-β-CD的紅外吸收特征，以上分析說明白頭翁總皂苷已被HP-β-CD包合。
3.2固體分散體和包合物的DSC檢測
3.2.1固體分散體白頭翁總皂苷在267.68，270.84 ℃處出現尖銳的吸熱峰，為其熔融峰。PEG 4000在65.18 ℃有明顯的熔融峰。在物理混合物的DSC圖譜中，熔融的PEG 4000成為了白頭翁總皂苷的溶劑，使白頭翁總皂苷的特征吸熱峰消失。而在包合物的DSC圖譜中，白頭翁總皂苷在267.68，270.84 ℃處的吸熱峰幾乎消失，與PEG 4000的圖譜接近一致，與藥物的圖譜有明顯的差異，以上分析說明白頭翁總皂苷與PEG 4000形成了固體分散體。
3.2.2包合物白頭翁總皂苷在92.01 ℃出現較寬吸熱峰，在267.68，270.84 ℃處有很強的吸熱峰，280.5 ℃也有吸熱峰，都為其熔融峰。在物理混合物的DSC圖譜中，白頭翁總皂苷的吸熱峰發生位移。而在包合物的DSC圖譜中，白頭翁總皂苷在267.68，270.84 ℃處的吸熱峰完全消失，與HP-β-CD的圖譜接近一致，與藥物的圖譜有明顯的差異，以上分析說明白頭翁總皂苷與HP-β-CD形成了包合物。
3.3固體分散體和包合物的NMR檢測
3.3.1固體分散體分別取白頭翁總皂苷、PEG 4000[結構為HO（CH2CH2O）nH]和固體分散體，以氘代吡啶為溶劑，掃描其1H-NMR和13C-NMR圖譜。PEG 4000中有質子發生了化學位移變化，形成固體分散體後，化學位移增大，發生氫鍵締合作用；從白頭翁總皂苷核磁共振結果中看出，白頭翁總皂苷C28上的碳核和3種糖上的碳核均發生了化學位移變化，由此推測，白頭翁總皂苷C28上的羧基和3種糖分子中的羥基都與PEG 4000分子發生了氫鍵締合作用。
3.3.2包合物分別取白頭翁總皂苷、HP-β-CD和包合物，以氘代吡啶為溶劑，掃描其1H-NMR和13C-NMR圖譜。HP-β-CD中2，3，5位上的氫化學位移增大，其電子屏蔽作用減少，發生了氫鍵締合作用[9]，而白頭翁總皂苷中C28位上的氫核未發生改變，說明該位置上的羧基沒有與HP-β-CD發生氫鍵締合，由此，可以推斷出可能是白頭翁總皂苷結構中的糖與HP-β-CD發生氫鍵締合作用。白頭翁總皂苷C28的化學位移無變化，而糖上的碳核均發生了化學位移的變化，結合1H-NMR譜分析，確定白頭翁總皂苷中糖與HP-β-CD發生氫鍵締合作用，而且ara中3位上的羥基、rha中2，4位上的羥基和glc中3，4，6位上的羥基與HP-β-CD發生締合。
3.4固體分散體中白頭翁總皂苷含量測定
采用HPLC測定固體分散體中白頭翁總皂苷含量，結果得固體分散樣品中白頭翁總皂苷質量分數為35.97%，RSD 0.65%。
3.5包合物中白頭翁總皂苷含量測定
采用HPLC測定包合物中白頭翁總皂苷含量，結果得包合物樣品中白頭翁總皂苷質量分數為33.57%，RSD 0.34%。
3.6溶出度測定
包合物溶出度較固體分散體和白頭翁總皂苷高，在1 h即達到80%左右，固體分散體溶出度較白頭翁總皂苷高，但相差不大。溶出結果說明包合技術能顯著提高白頭翁總皂苷的溶出度，而固體分散技術對其增溶作用不明顯。
4討論
本研究分別采用IR，DSC，NMR對白頭翁總皂苷原料藥、輔料、包合物、固體分散體、輔料與原料藥物理混合物進行測試，結果表明白頭翁總皂苷分別與HP-β-CD，PEG 4000形成了穩定的包合物及固體分散體。白頭翁總皂苷與HP-β-CD在形成包合物時發生了氫鍵締合作用，且為ara，rha，glc中上的羥基與HP-β-CD發生締合。白頭翁總皂苷和PEG 4000在形成固體分散體時也形成了氫鍵締合作用，可能為白頭翁總皂苷C28上的羧基和3種糖分子中的羥基都與PEG 4000分子發生了氫鍵締合作用。
本試驗中白頭翁總皂苷係白頭翁中藥材醇提皂苷混合物，無法采用等摩爾係數法測定主客體分子比例，故采用連續遞變法[10]測定最佳包合質量比例。分別製備白頭翁總皂苷與HP-β-CD質量比分別為1.5∶1，1∶1，1∶1.5，1∶2的係列包合物，分別測定溶出度，結果得到白頭翁總皂苷與HP-β-CD質量比為1∶2製備得到的包合物溶出度最大，故采用兩者比例為1∶2進行包合。
HP-β-CD作為一種新型藥物輔料，具有毒性低、水溶性高等特點[11]。其為截錐狀空腔結構，具有高包合性[12]，白頭翁總皂苷分子部分結構進入空腔內，形成較為牢固的分子間氫鍵作用。而PEG 4000為網狀骨架結構，白頭翁總皂苷分子較大，無法進入網狀骨架機構內，在製備成固體分散體後，形成的氫鍵不牢固，因此其增容作用不明顯，而製備成包合物後，有較牢固的鍵力作用，能明顯增大白頭翁總皂苷溶解度。
對白頭翁總皂苷包合物和固體分散體進行溶出度比較，結果顯示包合物對白頭翁總皂苷的增容效果明顯高於固體分散體。包合物能顯著提高白頭翁總皂苷的溶解性能，有利於提高白頭翁總皂苷在人體的吸收和生物利用度，為白頭翁總皂苷相關製劑的研發奠定基礎。
[參考文獻]
[1] 鍾邱，倪瓊珠. 白頭翁中皂苷成分對腫瘤細胞的抑製作用[J]. 中藥材， 2004， 27（8）： 604.
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[3] 陳振華，管詠梅，張妮，等. 白頭翁總皂苷溶解性能考察[J]. 中國實驗方劑學雜誌， 2012， 18（13）： 28.