黔嶺淫羊藿總黃酮類成分對去勢雌性大鼠骨質疏鬆症的實驗研究
藥理
作者：曹春雨 劉婷 回連強 郝然
[收稿日期] 2013-09-10
[基金項目] 國家“重大新藥創製”科技重大專項（2009ZX09103-426）
[通信作者] *回連強，主管技師，Tel：（010）84252805-2231，E-mail
[作者簡介] 曹春雨，副研究員，Tel：（010）84252805-2236，E-mail
[摘要] 目的：觀察黔嶺淫羊藿總黃酮類成分（YYH-C）對去卵巢大鼠骨質疏鬆的防治作用。方法：將去卵巢大鼠隨機分為模型組、YYH-C低、中、高劑量組（生藥0.7，1.4，2.8 g·kg-1）和陽性藥補佳樂組（0.15 mg·kg-1），另設假手術組。連續灌胃給藥3個月，測定血清中甲狀旁腺激素（PTH）、I型前膠原N末端前肽（PINP）、堿性磷酸酶（ALP）、鈣（Ca）和磷（P）含量；取左側股骨和腰椎，進行骨計量學指標測定，包括骨密度、骨鈣磷含量和骨灰重/幹重百分比；取右側股骨進行骨組織形態學觀察。結果：和假手術組比較，模型組大鼠PTH，ALP明顯升高，PINP，血鈣水平明顯降低。YYH-C 3個劑量組均能明顯對抗PINP的降低，低、中劑量組尚能明顯抑製PTH的升高，高劑量組能明顯增加血鈣含量，但對ALP的增高無明顯抑製作用，各組之間血磷含量無明顯差異；模型組動物股骨、椎骨骨密度、灰重/幹重比值和Ca，P含量與假手術組比較均明顯降低；YYH-C高劑量組能明顯提高骨密度，3個劑量組均能明顯增加灰重/幹重比值和股骨、椎骨Ca，P含量；YYH-C能顯著升高股骨近端的骨小梁平均厚度、骨小梁麵積、骨小梁麵積百分比以及骨幹的皮質骨麵積百分比等，增加骨小梁表麵成骨細胞數，減少破骨細胞數。結論：YYH-C能有效控製去卵巢所致骨質疏鬆模型大鼠的骨量丟失，防止骨顯微結構的改變，抑製骨吸收亢進，進而對抗去卵巢後的高轉換型骨質疏鬆症。
[關鍵詞] 黔嶺淫羊藿總黃酮類成分； 去卵巢大鼠； 骨質疏鬆症
隨著人口老齡化，骨質疏鬆已成常見病、多發病，尤其是絕經後骨質疏鬆症的患病率逐年上升，其與卵巢功能減退、雌激素水平降低密切相關，最終導致骨形成與骨吸收偶聯失衡，出現骨轉換加速、骨密度降低、成骨細胞減少、破骨細胞增多、骨組織微細結構被破壞[1]。中醫學理論認為“腎為先天之本，主骨生髓”，骨的生長、發育與腎密切相關。淫羊藿作為一種傳統中藥，具有補腎陽、強筋骨、祛風濕之功效[2-3]。目前的研究表明淫羊藿中以淫羊藿苷的藥理作用最為明確[4]，藥典中亦以此作為淫羊藿藥材的質量控製標準。黔嶺淫羊藿是貴州比較多的淫羊藿品種，其黃酮類成分的組成特點是淫羊藿苷的含量不是很豐富，但朝藿定C含量相對較多，按照以往的標準，入藥較少。鄧煒等[5]報道，黔嶺淫羊藿對地塞米鬆所致的骨質疏鬆模型小鼠具有明顯的改善作用。作者前期研究結果顯示，黔嶺淫羊藿總黃酮能明顯促進hFOB1.19人SV40轉染成骨細胞的增殖，同時能顯著促進細胞分泌ALP，提示黔嶺淫羊藿總黃酮成分具有促進成骨細胞生長、分化的作用[6]。本實驗進一步觀察了黔嶺淫羊藿總黃酮提取成分對去卵巢大鼠骨質疏鬆症的治療作用。
1 材料
1.1 試劑 PTH試劑盒（批號20120315）、PINP試劑盒（批號20120312）均為北京華英生物技術研究所產品。ALP試劑盒（批號GG1102AD03）、血鈣測定試劑盒（批號LL1104AD08）、血磷測定試劑盒（批號LL2102AD02T）均為北京萬泰德瑞診斷技術有限公司產品。
1.2 藥物 取黔嶺淫羊藿藥材，加20倍量70%乙醇回流3次，每次1 h，合並3次提取液，回收，得濃縮液。濃縮液加蒸餾水（1∶1）放置，棄沉澱，取上清液，再濃縮得浸膏。80 ℃減壓幹燥，粉碎，即得黔嶺淫羊藿總黃酮類部分（YYH-C），其提取率為4.96 mg·g-1（生藥），其中淫羊藿苷1.17%，朝藿定C8.87%。