苦石蓮中卡山烷類二萜的化學成分研究
化學
作者：孫忠浩等
[摘要] 應用多種色譜技術對豆科雲石屬植物喙莢雲實的種子苦石蓮的95%甲醇提取物進行分離純化，從乙酸乙酯部位中得到15個卡山烷型二萜類化合物。根據波譜數據鑒定為pulcherralpin（1）， caesalpinin ML（2）， chamaetexane C（3）， chamaetexane D（4）， 6β，18-diacetoxycassan-13，15-diene（5）， neocaesalpin K（6）， neocaesalpin MP（7）， neocaesalpin M（8）， neocaesalpin Q（9）， neocaesalpin P（10）， neocaesalpin R（11）， caesaldekarin D（12）， caesaldekarin A（13）， caesaldekarin b（14）， 3β，6α-diacetoxyvouacapane（15）。其中化合物1～4， 9～11為首次從該植物中分離得到。
[關鍵詞] 苦石蓮； 卡山烷型二萜；化學成分
[Abstract] Fifteen cassaen-type diterpenes were isolated from the 95% ethanolic extract of the seeds of C. minax through various chromatographic techniques. Their structures were identified on the basis of spectroscopic data as pulcherralpin（1）， caesalpinin ML（2）， chamaetexane C（3）， chamaetexane D（4）， 6β，18-diacetoxycassan-13，15-diene（5）， neocaesalpin K（6）， neocaesalpin MP（7），neocaesalpin M（8）， neocaesalpin Q（9）， neocaesalpin P（10）， neocaesalpin R（11）， caesaldekarinD（12），caesaldekarinA（13）， caesaldekarin b（14）， 3β，6α-diacetoxyvouacapane（15）. Among them， compounds 1-4， 9-11 were isolated from this plant for the first time.
[Key words] Kushilian； cassaen-type diterpenes； chemical constituent
苦石蓮又名石蓮子、老鴨枕頭、土石蓮子、青蛇子、貓兒核、廣石蓮子，為豆科雲實屬植物喙莢雲實（南蛇勒）Caesalpinia minax Hance 的種子。該屬植物Caesalpinia在全世界約有120～150種，主要分布於熱帶和亞熱帶地區，我國產17種，主要產地為南部和西南部的海南、廣東、廣西、雲南和貴州五省[1]。
苦石蓮生於低海拔的曠野草叢或緩坡林緣，分布於廣西、雲南等地。苦石蓮性涼，味苦，有清熱化濕，活血散瘀，止痛之功效，主治風熱感冒、痢疾、淋濁、癰腫、皮膚瘙癢、瘡癬、跌打損傷、毒蛇咬傷等，為我國中藥典籍《中華本草》等收錄，同時被廣西中藥材標準、貴州中藥材標準、四川中藥材標準等收載，是寶貴的傳統壯藥[2]。現階段的研究表明，苦石蓮中含有大量的卡山烷型二萜類化合物和少量的黃酮、三萜、木脂素類化合物[3-4]。其中，二萜類化合物為其特征性成分和有效成分。為了進一步明確和挖掘苦石蓮的藥效物質基礎，課題組對苦石蓮的95%甲醇提取物進行了化學成分進行研究，從中得到了15個卡山烷二萜類化合物，分別鑒定為pulcherralpin（1）， caesalpinin ML（2）， chamaetexane C（3）， chamaetexane D（4）， 6β，18-diacetoxycassan-13，15-diene（5）， neocaesalpin K（6）， neocaesalpin MP（7）， neocaesalpin M（8）， neocaesalpin Q（9）， neocaesalpin P（10）， neocaesalpin R（11）， caesaldekarin D（12）， caesaldekarin A（13）， caesaldekarin b（14）， 3β，6α-diacetoxyvouacapane（15），其中化合物1～4，9～11為首次從該植物中分離得到。
1 材料
Bruker Avance Ⅲ 600型核磁共振波譜儀，賽默飛世LTQ-Obitrap XL液質聯用儀， BYLABUV—Ⅲ紫外燈（北京炳洋科技有限公司），薄層色譜用矽膠G，H，GF-254和柱色譜用矽膠（青島海洋化工有限公司），Sephadex LH-20凝膠為Pharmacia公司產品，MCI為日本三菱化學公司產品，常規試劑均為分析純。
苦石蓮購於廣西南寧市，經廣西藥用植物園資源分類室餘麗瑩主任鑒定為喙莢雲實C. minax Hance的幹燥種子，標本保存於廣西藥用植物園標本室（No.21650）。
2 提取與分離
喙莢雲實種子苦石蓮（8 kg）幹燥後粉碎過80目篩，藥材粉末加10倍量甲醇加熱回流提取2次，每次2 h，合並提取液，減壓回收溶劑，濃縮後得總浸膏2 020 g。苦石蓮總浸膏依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯洗脫，洗脫液減壓濃縮。石油醚部位（130 g）經矽膠柱色譜，石油醚-氯仿梯度洗脫得到6個部位Fr.S1～6。Fr. S6經矽膠柱色譜反複分離，半製備HPLC 純化，得到化合物12（10.3 mg），13（5.7 mg），14（7.4 mg），15（2.1 mg）。氯仿部位浸膏325 g經矽膠柱色譜，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，得到12個部位Fr. L1～12。Fr. L12經矽膠柱色譜反複分離，半製備HPLC純化，得到化合物9（6.2 mg），10（3.1 mg），11（4.7 mg）。Fr. L6經Sephadex LH-20凝膠柱色譜，MPLC洗脫及半製備HPLC純化，得到化合物1（1.7 mg），3（2.5 mg）。Fr. L7經凝膠、MPLC柱色譜及半製備HPLC 純化，得到化合物8（4.3 mg）。Fr. L9經矽膠柱色譜反複分離，半製備HPLC 純化，得到化合物6（4.0 mg）。乙酸乙酯部位浸膏160 g經矽膠柱色譜，氯仿-甲醇梯度洗脫，得到11個部位Fr. Y1～11。Fr. Y5經矽膠柱色譜分離，半製備HPLC 純化，得到化合物4（4.7 mg）。Fr. Y6經MPLC洗脫及半製備HPLC 純化，得到化合物2（5.7 mg），化合物5（2.7 mg），化合物7（34.1 mg）。
3 結構鑒定
化合物1 無色針晶（243～246 ℃），易溶於氯仿、甲醇。ESI-MS m/z 535[M+Na]+。1H-NMR（CDCl3，600 MHz） δ：5.60（1H，d，J=3.6 Hz，H-6），4.30（1H，t，J=3.6 Hz，H-7），3.66（3H，s，16-OCH3），0.77（3H，d，J=7.2 Hz，H-17），1.21（3H，s，H-18），1.05（3H，s，H-19），1.48（3H，s，H-20），6.50（1H，d，J=16.8 Hz ，H-2′），7.77（1H，d，J=16.8 Hz，H-3′），7.57（2H，m，H-5′，H-9′），7.41（3H，m，H-6′～8′）。13C-APT（CDCl3，150 MHz） δ：33.9（C-1），18.1（C-2），37.7（C-3），39.0（C-4），77.9（C-5），73.4（C-6），68.7（C-7），41.2（C-8），40.9（C-9），40.2（C-10），40.0（C-11），211.3（C-12），50.8（C-13），35.2（C-14），31.6（C-15），173.0（C-16），8.5（C-17），27.6（C-18），25.2（C-19），16.4（C-20），51.8（16-OCH3），167.3（C-1′），117.5（C-2′），146.2（C-3′），133.9（C-4′），128.2（C-5′，9′），128.5，（C-6′，8′），130.5（C-7′）。以上數據與文獻報道pulcherralpin [5]一致，故將化合物1鑒定為pulcherralpin。
化合物2 白色粉末，易溶於氯仿、甲醇。ESI-MS m/z 327[M+Na]+。1H-NMR（CDCl3，600 MHz） δ：3.25（1H，m，H-3），3.62（1H，m，H-7），5.62（1H，t，J=3.6 Hz，H-12），6.23（1H，dd，J=16.8，12.0 Hz，H-15），5.15（1H，d，J=16.8 Hz，H-16a），4.93（1H，d，J=12.0 Hz，H-16b），0.99（3H，d，J=7.2 Hz，H-17），1.02（3H，s，H-18），0.85（3H，s，H-19），0.86（3H，s，H-20）。13C-APT（CDCl3，150 MHz）δC：37.4（C-1），27.1（C-2），78.9（C-3），38.8（C-4），51.6（C-5），31.2（C-6），71.9（C-7），42.7（C-8），42.2（C-9），36.6（C-10），25.1（C-11），127.9（C-12），140.7（C-13），27.2（C-14），138.4（C-15），110.1（C-16），14.2（C-17），28.2（C-18），15.8（C-19），14.1（C-20）。以上數據與文獻報道caesalpinin ML [6]一致，故將化合物2鑒定為caesalpinin ML。
化合物3 白色粉末，易溶於氯仿、甲醇。ESI-MS m/z 385[M+Na]+。1H-NMR（CDCl3，600 MHz）δ：3.73（1H，t，J=9.6 Hz，H-7），6.45（1H，dd，J=16.8，10.2 Hz，H-15），5.49（1H，d，J=16.8 Hz，H-16a），5.24（1H，d，J=10.2 Hz，H-16b），4.65，4.59（2H，m，H2-17），0.91（3H，s，H-18），0.87（3H，s，H-19），0.86（3H，s，H-20）。13C-APT（CDCl3，150 MHz） δ：38.3（C-1），18.6（C-2），41.7（C-3），33.0（C-4），50.9（C-5），28.2（C-6），68.7（C-7），43.6（C-8），50.6（C-9），36.4（C-10），38.4（C-11），199.0（C-12），140.4（C-13），150.1（C-14），130.1（C-15），121.6（C-16），63.3（C-17），33.1（C-18），21.5（C-19），14.4（C-20）。以上數據與文獻報道chamaetexane C [7]一致，故將化合物3鑒定為chamaetexane C。