2.2.2 單次給藥心髒“量-毒”關係研究 小鼠雌雄各半，隨機分為6組，每組10隻，即空白對照組和附子水提物5個劑量組。按25.0 mL·kg-1灌胃1次，正常組灌服蒸餾水，附子水提物各劑量組分別灌服7.20，4.64，2.99，1.93，1.25 g·kg-1。60 min後按2.2.1項方法測定心電圖和血清CK，LDH，BNP和CTn-I，稱量並計算髒器指數。
2.3 統計學方法
采用SPSS 11.5統計軟件，數據用±s表示，計量資料先進行正態檢驗，正態分布資料采用單因素方差分析，非正態分布資料先轉換成正態分布再用單因素方差分析。進行組間比較，P
3 結果
3.1 單次給藥對小鼠心髒“時-毒”關係研究
3.1.1 對心電圖的影響 單次給藥附子後，小鼠心電圖P波的時間和幅度、P-R間期、Q波和S波幅度的變化與0 min組無統計學意義；小鼠心率從藥後5 min開始升高，60 min達到峰值後顯著降低（P
3.1.2 對血清生化指標的影響 單次給藥附子後，小鼠血清中CK，LDH，BNP和CTn-I等指標的含量從藥後5 min開始，隨著時間的變化均升高。其中，CK含量在90 min達到峰值，與0 min組比較呈顯著性差異（P
3.1.3 對髒器指數的影響 與0 min組比較，單次給予附子水提物後不同時間點的小鼠心體比值、肝體比值和腎體比值均無顯著性變化。
3.2 小鼠單次給藥心髒毒性“量-毒”關係研究
3.2.1 對心電圖的影響 單次給藥劑量從1.25 g·kg-1到7.20 g·kg-1逐漸增大時，小鼠心電圖的P波的時間和幅度、P-R間期、Q波、R波和S波幅度的變化與對照組無統計學意義；小鼠心率升高，QRS間期、T波時間和幅度、QT間期減小，與對照組比較，2.99～7.20 g·kg-1均有統計學意義（P
給予附子後0～60 min，附子水提物的毒性積分增大，60～120 min，積分減小，其中峰效應點為60 min；在一定範圍內，隨著附子水提物濃度的增大，積分增大。灌胃大劑量及臨床範圍劑量的附子水提物後不同時間點對小鼠心髒有一定的損傷，並呈現一定的“量-時-毒”關係，其毒性峰效應時間點出現在藥後60 min。因此，在臨床運用過程中，應嚴格控製附子用量，及時監測患者體內靈敏指標變化情況，避免不良反應的發生。
4 討論
附子作為臨床常用有毒中藥，臨床上連續有因心髒中毒致死的病例報道，現代毒理研究發現，附子的毒性成分是雙酯型生物堿，引起中毒的靶器官主要是心髒，髒器係數是毒理學研究中評價受試物毒性作用的重要指標，對確認藥物毒性作用的靶器官具有重要參考價值[14]。隨著近年附子ADR報道頻頻出現，其心髒毒性也越來越引起重視。因此為減少不良反應的發生，更合理的使用附子，了解其心髒毒性特點，對附子進行“量-時-毒”研究具有重要意義[15]。
肌酸激酶（CK）、乳酸脫氫酶（LDH）廣泛存在於心肌組織細胞中，當心肌細胞受損時，心肌酶釋放入血，使血液中CK，LDH的活性增高，造成心肌細胞代謝紊亂。因此，臨床常監測血中CK，LDH活性變化，以評估心肌細胞損傷程度。B-型腦鈉肽（BNP）是一種心髒神經激素，主要存在於心室肌內，因此正常人循環血液中僅有低水平的BNP。心功能障礙時極大激活機體利鈉肽係統，心室負荷增加導致BNP釋放。其血中水平可作為心功能損傷的早期預測指標，並能很好的反映左心室參數及心肌梗死範圍[16]。心肌肌鈣蛋白（CTn-I）有獨特的氨基酸順序編碼，僅在心肌組織中表達，使之具有高度特異性、敏感性，正常血液中基礎濃度可以忽略不計，因而對心肌損害的檢測更為敏感。成為心肌損傷最具價值的血清標誌物之一，並與心肌組織的損傷程度有關[17]。綜合考慮選擇CK，LDH，BNP，CTn-I作為其毒性的檢測指標。本實驗結果發現，附子水提物提高小鼠血中CK，LDH，BNP，CTn-I的水平，其中BNP，CTn-I在血中含量的變化能更早的反映附子對小鼠心髒的損傷。
心電圖（ECG）反映心髒每個心動周期中生物電變化，尤其心率、QRS波群、T波及ST段的變化對心功能的影響更靈敏，是臨床中能夠即時反映患者心髒功能、診斷心髒疾病的重要指標。本實驗研究結果發現，小鼠ECG中QRS間期、R波幅度、T波時間和幅度、QT間期等的變化，可能預示著藥後60 min時出現了較明顯的房室傳導阻滯，且隨著時間的變化，小鼠單次灌服7.20 g·kg-1的附子水提物相當於臨床人用量的33.6倍，對心髒的損傷在藥後60 min表現最為明顯。
本實驗僅以單次給予大劑量和臨床規定用量研究附子水提物0～120 min對小鼠心髒毒性的影響。時間短、給藥次數少，因此不同時間和劑量的附子水提物僅引起了小鼠心電圖和血清生化指標的變化，而未引起髒器的實質性病變，對心、肝、腎等髒器指數也就無顯著性影響。